植物多糖是從天然植物中提取的具有較高的生理和藥理活性的物質(zhì),它作為一種對(duì)機(jī)體副作用小,安全無毒的生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑,無論是在抗病毒還是免疫增強(qiáng)方面都發(fā)揮著重要作用。然而,傳統(tǒng)的植物多糖提取方法工藝繁瑣,提取率較低。研究表明,纖維素酶可以高效分解天然植物的細(xì)胞壁,本研究采用基因工程技術(shù)構(gòu)建一株高表達(dá)纖維素酶的枯草芽孢桿菌,將其與黃芪粉共同發(fā)酵分解,用以優(yōu)化提取工藝,提高多糖提取率。為評(píng)估經(jīng)過發(fā)酵的黃芪多糖的抗病毒作用,將黃芪多糖與豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）共同作用后感染細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)病毒在細(xì)胞上的復(fù)制被抑制。本研究以構(gòu)建高產(chǎn)纖維素酶的重組菌為開端,進(jìn)一步研究產(chǎn)纖維素酶的重組菌對(duì)黃芪多糖提取率的影響,為植物多糖提供一種簡(jiǎn)單高效的提取方式,并有望在畜牧業(yè)上得到廣泛推廣。本研究選取地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis）中Cel9A基因作為目的基因,連接于pHT43分泌型表達(dá)載體,采用CaCl₂的方法構(gòu)建重組菌并對(duì)其進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)后檢測(cè)產(chǎn)酶能力。對(duì)重組菌誘導(dǎo)表達(dá),通過對(duì)其上清及沉淀處理后,SDS-PAGE結(jié)果顯示無論是在上清還是沉淀中,在72.36kD... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

糖原及相關(guān)蛋白質(zhì)（W0illiamD,2006）

纖維素酶化學(xué)結(jié)構(gòu)示意圖（Cheng,2011）

pHT43質(zhì)粒圖譜

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]黃芪多糖的藥理作用及其在仔豬疾病防治中應(yīng)用的研究進(jìn)展[J]. 鄭新新,李富寬,潘章源,呂慎金,王慧.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2018(10)
[2]茯苓胞外多糖、胞內(nèi)多糖與菌核多糖的抗氧化活性比較研究[J]. 陳林,廖彥,黃威,張書航,魯耀邦,崔培梧.  北方園藝. 2018(02)
[3]正交設(shè)計(jì)優(yōu)化黃芪多糖提取工藝[J]. 李海歐,陳琪,林英華,雷雯樸,孫耀,段鵬飛,陳治宇,盛華,金蓉,賽那.  畜牧與飼料科學(xué). 2018(01)
[4]植物多糖構(gòu)效關(guān)系研究進(jìn)展[J]. 譚西,周欣,陳華國(guó).  中國(guó)中藥雜志. 2017(21)
[5]響應(yīng)面法優(yōu)化纖維素酶提取澤瀉多糖的工藝研究[J]. 張雪,諶賽男,陳瑩,張方方,黃小強(qiáng),吳水生.  中藥材. 2016(07)
[6]不同結(jié)構(gòu)大麥多糖降血糖活性差異的研究[J]. 侯圓圓,楊延超,徐德平.  食品研究與開發(fā). 2016(02)
[7]纖維素酶解輔助水提黃芪多糖的工藝條件[J]. 張嘉怡,謝藍(lán)華,杜冰,楊濤,李薇,楊公明.  農(nóng)產(chǎn)品加工(學(xué)刊). 2013(02)
[8]纖維素酶法提取黃芪多糖的動(dòng)力學(xué)[J]. 魏鳳玉,康家勝,張宇.  過程工程學(xué)報(bào). 2012(05)
[9]藥用植物多糖的提取方法研究進(jìn)展[J]. 黃小葳.  現(xiàn)代化工. 2010(12)
[10]纖維素酶的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 王亮,尚會(huì)建,楊立彥,鄭學(xué)明.  河北工業(yè)科技. 2010(06)



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