植物多糖是從天然植物中提取的具有較高的生理和藥理活性的物質(zhì),它作為一種對機體副作用小,安全無毒的生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑,無論是在抗病毒還是免疫增強方面都發(fā)揮著重要作用。然而,傳統(tǒng)的植物多糖提取方法工藝繁瑣,提取率較低。研究表明,纖維素酶可以高效分解天然植物的細胞壁,本研究采用基因工程技術(shù)構(gòu)建一株高表達纖維素酶的枯草芽孢桿菌,將其與黃芪粉共同發(fā)酵分解,用以優(yōu)化提取工藝,提高多糖提取率。為評估經(jīng)過發(fā)酵的黃芪多糖的抗病毒作用,將黃芪多糖與豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）共同作用后感染細胞,發(fā)現(xiàn)病毒在細胞上的復(fù)制被抑制。本研究以構(gòu)建高產(chǎn)纖維素酶的重組菌為開端,進一步研究產(chǎn)纖維素酶的重組菌對黃芪多糖提取率的影響,為植物多糖提供一種簡單高效的提取方式,并有望在畜牧業(yè)上得到廣泛推廣。本研究選取地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis）中Cel9A基因作為目的基因,連接于pHT43分泌型表達載體,采用CaCl₂的方法構(gòu)建重組菌并對其進行誘導(dǎo)表達后檢測產(chǎn)酶能力。對重組菌誘導(dǎo)表達,通過對其上清及沉淀處理后,SDS-PAGE結(jié)果顯示無論是在上清還是沉淀中,在72.36kD... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

糖原及相關(guān)蛋白質(zhì)（W0illiamD,2006）

纖維素酶化學(xué)結(jié)構(gòu)示意圖（Cheng,2011）

pHT43質(zhì)粒圖譜

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3084886