發(fā)布時間：2021-03-15 08:44

　　嗜酸乳桿菌作為動物腸道中重要的益生菌,具有維護(hù)動物腸道健康、緩解不良應(yīng)激、改善飼養(yǎng)環(huán)境、調(diào)節(jié)機體脂肪代謝和改善畜禽產(chǎn)品品質(zhì)等功能。乳酸菌微生態(tài)制劑作為動物飼料添加劑正逐漸被廣大消費者應(yīng)用。本課題從仔豬糞便中分離獲得一株嗜酸乳桿菌。經(jīng)馴化,提高其對胃腸道的耐受性,并研制出微膠囊制劑,其研究結(jié)果如下：（1）利用MRS瓊脂平板梯度稀釋法自15d齡、未使用過任何抗生素藥物的仔豬糞便中篩選得到13株乳酸桿菌疑似菌株,通過生理生化鑒定,初步確定其中9為乳酸桿菌。經(jīng)碳水化合物發(fā)酵試驗,推測編號La-5, La-6, La-8和La-9的4株菌為嗜酸乳桿菌。比較4株菌的形態(tài),長勢及產(chǎn)酸能力,選定菌株La-5作為本研究的出發(fā)菌株。通過對菌株La-5的16 SrDNA同源性分析,結(jié)合其生理生化試驗結(jié)果確定菌株La-5為嗜酸乳桿菌（Lactobaclllus acidophilus）。（2）以嗜酸乳桿菌La-5為出發(fā)菌株,采用梯度傳代馴化法,對其耐酸、耐膽鹽、耐熱性能進(jìn)行馴化,得到一株對低pH、高膽鹽、高溫具有良好強耐受性的優(yōu)良菌株La-5c。對菌株La-5c的產(chǎn)酸性能研究表明,經(jīng)發(fā)酵48h后的MRS培養(yǎng)液... 

【文章來源】：江西農(nóng)業(yè)大學(xué)江西省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1 文獻(xiàn)綜述
        1.1 國內(nèi)外嗜酸乳桿菌的研究進(jìn)展
            1.1.1 嗜酸乳桿菌的生物學(xué)特性
            1.1.2 嗜酸乳桿菌的益生功能特性
            1.1.3 嗜酸乳桿菌對畜禽養(yǎng)殖的應(yīng)用效果
            1.1.4 嗜酸乳桿菌的分類及分布
                1.1.4.1 嗜酸乳桿菌的分類
                1.1.4.2 嗜酸乳桿菌的分布
        1.2 抗性突變菌株的選育方法
            1.2.1 自然突變選育
            1.2.2 誘發(fā)突變選育
        1.3 微生態(tài)制劑的概述
            1.3.1 微生態(tài)制劑的概念
            1.3.2 微生態(tài)制劑的分類
            1.3.3 動物微生態(tài)制劑的作用機制
    2 本課題的研究目的和內(nèi)容
        2.1 研究目的
        2.2 研究內(nèi)容
第二章 豬源性嗜酸乳桿菌的分離篩選與鑒定
    1 材料
        1.1 樣品來源
        1.2 培養(yǎng)基的成分以及配制方法
        1.3 主要的試劑
        1.4 引物
        1.5 主要儀器
    2 方法
        2.1 樣品的采集及前處理
            2.1.1 取樣
            2.1.2 樣品處理
        2.2 嗜酸乳桿菌的分離純化
            2.2.1 菌株的初篩
            2.2.2 菌株的復(fù)篩
        2.3 嗜酸乳桿菌的鑒定
            2.3.1 細(xì)菌的形態(tài)特征觀察
            2.3.2 生理生化特性的鑒定
                2.3.2.1 乳桿菌屬的初步鑒定
                2.3.2.2 碳水化合物發(fā)酵產(chǎn)酸鑒定
            2.3.3 16 SrDNA序列分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 細(xì)菌的形態(tài)特征
        3.2 生理生化特性的鑒定
            3.2.1 乳桿菌屬初步鑒定
            3.2.2 碳水化合物發(fā)酵產(chǎn)酸鑒定
        3.3 菌株La-5的16 SrDNA序列分析
            3.3.1 PCR片段擴增
            3.3.2 序列分析和種系發(fā)生關(guān)系
    4 小結(jié)
第三章 嗜酸乳桿菌La-5優(yōu)良菌株的選育
    1 材料
        1.1 試驗菌株
        1.2 培養(yǎng)基成分以及配制方法
        1.3 主要試劑與藥品
        1.4 主要儀器
    2 方法
        2.1 菌株La-5的生長動力學(xué)測定
        2.2 菌株La-5耐酸性能的馴化
        2.3 菌株La-5a耐膽鹽性能的馴化
        2.4 菌株La-5b耐熱性能的馴化
        2.5 菌株La-5c產(chǎn)酸性能的測定
            2.5.1 電位滴定法測總酸
            2.5.2 發(fā)酵液總酸計算方法
        2.6 嗜酸乳桿菌活菌數(shù)和存活率的計算
            2.6.1 嗜酸乳桿菌活菌數(shù)的計算
            2.6.2 嗜酸乳桿菌存活率的計算
    3 結(jié)果與分析
        3.1 菌株La-5的生長動力學(xué)測定
        3.2 菌株La-5耐酸性能的馴化
        3.3 菌株La-5a耐膽鹽能力的馴化
        3.4 菌株La-5b耐熱性能的馴化
        3.5 菌株La-5c產(chǎn)酸性能測定
    4 小結(jié)
第四章 嗜酸乳桿菌La-5c的小白鼠喂養(yǎng)試驗
    1 材料
        1.1 供試菌株及動物
        1.2 培養(yǎng)基成分及配制方法
        1.3 主要試劑與藥品
        1.4 主要儀器
    2 方法
        2.1 菌株La-5c菌液制備和試驗準(zhǔn)備
        2.2 菌株La-5c的安全性試驗
        2.3 菌株La-5c的益生效果試驗
            2.3.1 菌株La-5c對小白鼠體態(tài)特征的作用試驗
            2.3.2 菌株La-5c對小白鼠的增重試驗
            2.3.3 菌株La-5c對小白鼠免疫器官的影響
    3 結(jié)果與分析
        3.1 菌株La-5c的安全性試驗
            3.1.1 小白鼠體態(tài)特征的變化
            3.1.2 小白鼠肝腎組織形態(tài)的變化
            3.1.3 血常規(guī)檢測
        3.2 菌株La-5c的益生效果試驗
            3.2.1 菌株La-5c對小白鼠體態(tài)特征的作用試驗
            3.2.2 菌株La-5c對小白鼠的增重試驗
            3.2.3 菌株La-5c對小白鼠免疫器官的影響
    4 小結(jié)
第五章 嗜酸乳桿菌La-5c的微生態(tài)制劑壁材的優(yōu)化
    1 材料
        1.1 供試菌株
        1.2 培養(yǎng)基成分及配制方法
        1.3 主要試劑與藥品
        1.4 主要儀器
    2 方法
        2.1 芯材的制備
        2.2 壁材與菌株La-5c的生物相容性測定
            2.2.1 阿拉伯膠與菌株La-5c的生物相容性測定
            2.2.2 海藻糖與菌株La-5c的生物相容性測定
            2.2.3 麥芽糊精與菌株La-5c的生物相容性測定
        2.3 菌株La-5c微膠囊化的單因素試驗
            2.3.1 阿拉伯膠濃度對微生態(tài)制劑的影響
            2.3.2 海藻糖濃度對微生態(tài)制劑的影響
            2.3.3 麥芽糊精濃度對微生態(tài)制劑的影響
        2.4 菌株La-5c微膠囊化的正交試驗
        2.5 菌株La-5c微生態(tài)制劑的技術(shù)路線圖
        2.6 菌株La-5c微生態(tài)制劑的穩(wěn)定性試驗
    3 結(jié)果與分析
        3.1 壁材與菌株La-5c的生物相容性測定
            3.1.1 阿拉伯膠與菌株La-5c的生物相容性測定
            3.1.2 海藻糖與菌株La-5c的生物相容性測定
            3.1.3 麥芽糊精與菌株La-5c的生物相容性測定
        3.2 菌株La-5c微膠囊化的單因素試驗
            3.2.1 阿拉伯膠濃度對微生態(tài)制劑的影響
            3.2.2 海藻糖濃度對微生態(tài)制劑的影響
            3.2.3 麥芽糊精濃度對微生態(tài)制劑的影響
        3.3 菌株La-5c微膠囊化的正交試驗
        3.4 菌株La-5c微生態(tài)制劑的穩(wěn)定性試驗
    4 小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
    1 結(jié)論
    2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]微生物飼料添加劑的主要功能及其研究進(jìn)展[J]. 徐鵬,董曉芳,佟建明.  動物營養(yǎng)學(xué)報. 2012(08)
[2]嗜酸乳桿菌部分生理特性的研究[J]. 王菡,代海兵,連一霏.  牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2011(06)
[3]基于易錯PCR技術(shù)的黏質(zhì)沙雷氏菌脂肪酶基因LipA的定向進(jìn)化[J]. 陳英,朱綺霞,張搏,陳東,黃日波.  生物技術(shù)通報. 2011(04)
[4]微生物飼料添加劑的應(yīng)用現(xiàn)狀與展望[J]. 賈志霞.  畜牧與飼料科學(xué). 2011(02)
[5]乳酸菌添加劑在我國畜牧業(yè)中的應(yīng)用研究[J]. 潘艷,何勝江.  糧食與飼料工業(yè). 2010(09)
[6]化學(xué)誘變及其突變體篩選在育種中的應(yīng)用[J]. 李清國,付晶,鈕力亞,于亮,陸莉,張煥英,王奉芝.  河北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(05)
[7]無活性放線菌野生株抗腫瘤活性突變株的自發(fā)突變抗性篩選和化學(xué)誘變抗性篩選[J]. 孫玉雯,崔承彬,韓小賢,李長偉,楊明.  軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊. 2010(01)
[8]化學(xué)誘變技術(shù)在微生物育種研究中的應(yīng)用[J]. 程明,崔承彬,李長偉,田從魁,杜智敏.  國際藥學(xué)研究雜志. 2009(06)
[9]阿魏菇多糖高產(chǎn)菌株篩選的離子束誘變和復(fù)合誘變對比研究[J]. 王連峰,陳恒雷,張軍,曾憲賢.  輻射研究與輻射工藝學(xué)報. 2009(04)
[10]微生態(tài)飼料添加劑及其在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用研究現(xiàn)狀[J]. 王金合.  畜牧與飼料科學(xué). 2009(02)

碩士論文
[1]耐高溫乳酸菌的選育及應(yīng)用研究[D]. 崔國艷.西北大學(xué) 2007
[2]益生性微生物飼料添加劑的研究[D]. 尹苗.山東師范大學(xué) 2000



本文編號：3083899