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10種預(yù)測的鸚鵡熱衣原體Ⅲ型分泌系統(tǒng)效應(yīng)蛋白的定位分析

發(fā)布時間:2021-03-15 08:10
  旨在分析預(yù)測的10種鸚鵡熱衣原體(Chlamydia psittaci, Cps)Ⅲ型分泌系統(tǒng)效應(yīng)蛋白在細(xì)胞內(nèi)的定位,為下一步研究其結(jié)構(gòu)與功能奠定基礎(chǔ)。本研究利用計(jì)算機(jī)輔助的生物信息學(xué)方法(Effective T3和BPBAac tool)預(yù)測Cps T3SS效應(yīng)蛋白。利用分子克隆技術(shù)構(gòu)建重組質(zhì)粒pGEX-6P-1/目的基因,誘導(dǎo)表達(dá)、純化相應(yīng)重組蛋白。皮下免疫BALB/c小鼠,制備各重組蛋白的多克隆抗體,ELISA測定其效價。以制備的多克隆抗體為一抗,應(yīng)用間接免疫熒光法檢測假定的效應(yīng)蛋白在感染細(xì)胞中的定位。本研究通過應(yīng)用Effective T3、BPBAac tool交叉驗(yàn)證,預(yù)測了14個Cps T3SS效應(yīng)蛋白編碼基因:CPSIT0357、CPSIT0429、CPSIT0461、CPSIT0463、CPSIT0490、CPSIT0594、CPSIT0785、CPSIT0

【文章來源】:畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2020,51(06)北大核心

【文章頁數(shù)】:8 頁

【部分圖文】:

10種預(yù)測的鸚鵡熱衣原體Ⅲ型分泌系統(tǒng)效應(yīng)蛋白的定位分析


PCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳

10種預(yù)測的鸚鵡熱衣原體Ⅲ型分泌系統(tǒng)效應(yīng)蛋白的定位分析


重組蛋白純化的SDS-PAGE結(jié)果

10種預(yù)測的鸚鵡熱衣原體Ⅲ型分泌系統(tǒng)效應(yīng)蛋白的定位分析


GST-重組蛋白的免疫印跡鑒定

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]衣原體T3SS效應(yīng)蛋白的研究進(jìn)展[J]. 唐婷,伍海英,陳麗麗.  中國病原生物學(xué)雜志. 2018(09)
[2]多重PCR檢測奶牛布魯菌、鸚鵡熱衣原體和貝納氏柯克斯氏體[J]. 彭武麗,季新成,于學(xué)輝,史茜,王科珂,李娜.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2014(01)



本文編號:3083855

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