禽流感病毒（Avian influenza virus, AIV）引起的禽流感疫病一直以來都困擾著世界養(yǎng)禽業(yè),并因此導(dǎo)致巨大的經(jīng)濟(jì)損失。同時(shí),禽流感病毒出現(xiàn)的從禽傳染到人的現(xiàn)象也威脅著人類健康,引起社會(huì)的恐慌。禽流感病毒的神經(jīng)氨酸酶（Neuraminidase, NA）是一種位于病毒體包膜上呈蘑菇狀的四聚體糖蛋白,具有水解唾液酸的活性,是病毒分型的依據(jù)之一,它與流感病毒的致病力和感染特異性直接相關(guān)。禽流感病毒感染導(dǎo)致較高的死亡率被證明和過度炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。而CD4+T細(xì)胞的Th17分化參與介導(dǎo)炎癥細(xì)胞浸潤,從而導(dǎo)致宿主嚴(yán)重病理組織損傷和機(jī)體的功能紊亂。在本研究中,我們發(fā)現(xiàn)禽流感H5N1的NA能導(dǎo)致CD4+T細(xì)胞的Th17分化,推測(cè)可能和AIV導(dǎo)致的過度炎癥反應(yīng)和細(xì)胞因子風(fēng)暴相關(guān),取得的主要結(jié)果如下：1.禽流感病毒H5N1的NA接種小鼠引起小鼠肺臟Th17細(xì)胞數(shù)量增加。通過對(duì)5周齡的小鼠鼻腔接種H5N1的神經(jīng)氨酸酶,取小鼠肺臟組織的T細(xì)胞進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Th17和Treg細(xì)胞分化。結(jié)果發(fā)現(xiàn),經(jīng)過H5N1的神經(jīng)氨酸酶感染后的小鼠肺臟Th17的細(xì)胞比例顯著上升,并且呈現(xiàn)劑量依賴性。2.禽... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語表
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 禽流感
        1.1.1 禽流感病毒
        1.1.2 流感病毒的復(fù)制
        1.1.3 神經(jīng)氨酸酶（Neuraminidase,NA）
        1.1.4 神經(jīng)氨酸酶與TGF-β的互作
        1.1.5 神經(jīng)氨酸酶抑制劑（Neuraminidase Inhibitors,NAIs）
    1.2 細(xì)胞因子風(fēng)暴
        1.2.1 細(xì)胞因子風(fēng)暴介紹
        1.2.2 禽流感病毒感染與細(xì)胞因子風(fēng)暴
    1.3 樹突狀細(xì)胞
        1.3.1 樹突狀細(xì)胞來源與功能
        1.3.2 樹突狀細(xì)胞與神經(jīng)氨酸酶
    1.4 淋巴細(xì)胞
        1.4.1 T淋巴細(xì)胞
+T細(xì)胞">        1.4.2 CD4⁺T細(xì)胞
+T細(xì)胞Th17分化的研究進(jìn)展">    1.5 CD4⁺T細(xì)胞Th17分化的研究進(jìn)展
2 目的意義
3 材料方法
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.2 小鼠
        3.1.3 細(xì)胞培養(yǎng)試劑與耗材
        3.1.4 主要藥品與試劑
        3.1.5 其他試劑的配制
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 禽流感病毒H5N1的NA接種小鼠
        3.2.2 細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子分流分析
        3.2.3 Treg細(xì)胞流式檢測(cè)方法
        3.2.4 小鼠骨髓來源的樹突狀細(xì)胞分離培養(yǎng)
        3.2.5 BMDC誘導(dǎo)成熟和產(chǎn)物檢測(cè)
        3.2.6 ELISA檢測(cè)細(xì)胞因子
        3.2.7 細(xì)胞流式檢測(cè)細(xì)胞表面分子
+T細(xì)胞分離培養(yǎng)">        3.2.8 小鼠脾臟CD4⁺T細(xì)胞分離培養(yǎng)
        3.2.9 細(xì)胞RNA提取及反轉(zhuǎn)錄
        3.2.10 熒光定量PCR檢測(cè)
        3.2.11 數(shù)據(jù)分析方法
4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 禽流感病毒H5N1 NA接種小鼠
    4.2 BMDC細(xì)胞體外培養(yǎng)
    4.3 禽流感病毒NA促進(jìn)BMDC成熟
+T細(xì)胞細(xì)胞分化">    4.4 H5N1的NA刺激CD4⁺T細(xì)胞細(xì)胞分化
    4.5 產(chǎn)物檢測(cè)
5 討論
    5.1 禽流感病毒NA誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞成熟
+T細(xì)胞">    5.2 NA誘導(dǎo)共培養(yǎng)的BMDC和CD4⁺T細(xì)胞
    5.3 H5N1 NA細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子
+T細(xì)胞分化">    5.4 H5N1 NA誘導(dǎo)CD4⁺T細(xì)胞分化
    5.5 本課題的展望
    5.6 試驗(yàn)結(jié)論總結(jié)模式圖
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]濾泡輔助性T細(xì)胞[J]. 冀麗軍,孫劍.  生命的化學(xué). 2013(03)
[2]CD4+ T淋巴細(xì)胞功能研究新進(jìn)展[J]. 孫君重,肖文華,于力.  中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2010(02)
[3]樹突狀細(xì)胞表面標(biāo)志及功能研究進(jìn)展[J]. 劉秀紅,付萍.  皮膚病與性病. 2009(03)
[4]禽流感病毒神經(jīng)氨酸酶的結(jié)構(gòu)及其生物學(xué)功能[J]. 王全英,喬傳玲,申之義.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2005(12)
[5]Development of Dendritic Cell System[J]. Aleksandar Dakic.  Cellular & Molecular Immunology. 2004(02)



本文編號(hào)：3065549