發(fā)布時(shí)間：2021-03-04 18:26

　　隨著大型集約化養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,規(guī)模化的養(yǎng)禽生產(chǎn)中常伴有沙門氏菌病的發(fā)生,被感染的雛禽若不加以治療,重者死亡,耐過者終身帶菌,產(chǎn)出帶菌蛋,不僅造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失,對(duì)公共衛(wèi)生的危害也不容忽視。由于耐藥性的產(chǎn)生,藥物治療效果差,可供選擇藥物的空間縮小。有效的疫苗接種對(duì)傳染病的預(yù)防起著舉足輕重的作用。目前,我國并沒有針對(duì)鴨沙門氏菌病的標(biāo)準(zhǔn)疫苗。本研究根據(jù)川渝地區(qū)鴨源沙門氏菌的血清型分布情況,通過動(dòng)物攻毒試驗(yàn)進(jìn)行對(duì)比,篩選出一株血清型分布廣且毒力最強(qiáng)的菌株作為研究對(duì)象。采用傳統(tǒng)方法制備蜂膠滅活疫苗,對(duì)試驗(yàn)鴨進(jìn)行免疫接種,從細(xì)胞免疫和體液免疫兩個(gè)方面來檢測(cè)該疫苗的免疫水平,對(duì)免疫效果進(jìn)行評(píng)價(jià),以期為鴨源沙門氏菌病的防控提供參考依據(jù)。本文所開展的研究和取得的結(jié)果如下：1本試驗(yàn)選取了12株鴨源沙門氏菌,在相同菌液濃度下對(duì)試驗(yàn)鴨進(jìn)行分組攻毒,篩選出死亡率最高、毒力較強(qiáng)的菌株：用30種沙門氏菌診斷血清進(jìn)行血清型鑒定為鴨源徹斯特沙門氏菌（1,4,[5],12：e,h：e,n,x）,細(xì)菌毒力試驗(yàn)測(cè)得該菌株的LD50為1×108.47 CFU。將該菌株作為疫苗菌株,研制出三個(gè)濃度（108 CFU/ml、109 C... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
符號(hào)說明
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 沙門氏菌概述
        1.1 病原學(xué)概況
        1.2 毒力因子的研究
            1.2.1 菌毛
            1.2.2 外膜蛋白
            1.2.3 脂多糖
            1.2.4 莢膜
            1.2.5 腸毒素
            1.2.6 毒力相關(guān)基因
    2 沙門氏菌病研究進(jìn)展
        2.1 流行病學(xué)
        2.2 臨診癥狀及病理變化
        2.3 檢測(cè)方法
            2.3.1 實(shí)驗(yàn)室分離鑒定
            2.3.2 免疫學(xué)技術(shù)
            2.3.3 分子生物學(xué)技術(shù)
        2.4 治療概況
            2.4.1 耐藥性研究
            2.4.2 藥物防治進(jìn)展
    3 沙門氏菌疫苗研究進(jìn)展
        3.1 滅活疫苗
        3.2 弱毒疫苗
        3.3 疫苗載體
    4 選題目的與意義
第二章 鴨源沙門氏菌滅活疫苗的研制
    1 材料
        1.1 供試菌株
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
        1.4 試驗(yàn)動(dòng)物
    2 方法
        2.1 疫苗菌株篩選
            2.1.1 動(dòng)物致病性試驗(yàn)
            2.1.2 目的菌株再分離
        2.2 細(xì)菌毒力測(cè)定
        2.3 滅活疫苗研制
            2.3.1 疫苗菌液制備
            2.3.2 蜂膠佐劑制備
            2.3.3 疫苗配制
        2.4 疫苗安全性檢測(cè)
        2.5 動(dòng)物保護(hù)試驗(yàn)
    3 結(jié)果
        3.1 疫苗菌株篩選結(jié)果
            3.1.1 動(dòng)物致病性試驗(yàn)結(jié)果
            3.1.2 目的菌株再分離結(jié)果
        3.2 細(xì)菌毒力測(cè)定結(jié)果
        3.3 滅活疫苗的物理性狀
        3.4 安全性試驗(yàn)結(jié)果
        3.5 動(dòng)物保護(hù)試驗(yàn)結(jié)果
    4 討論
第三章 鴨源沙門氏菌抗體檢測(cè)間接ELISA方法的建立
    1 材料
        1.1 主要試劑
        1.2 主要儀器
        1.3 試驗(yàn)動(dòng)物
    2 方法
        2.1 主要試劑的配制
        2.2 菌體裂解抗原制備
        2.3 陽性和陰性血清的制備
            2.3.1 陽性血清制備
            2.3.2 陰性血清制備
        2.4 間接ELISA操作步驟
        2.5 間接ELISA參數(shù)選擇
            2.5.1 抗原最適包被濃度和血清最佳稀釋度的選擇
            2.5.2 酶標(biāo)羊抗鴨IgG最佳作用濃度選擇
        2.6 判斷標(biāo)準(zhǔn)的確定
        2.7 特異性試驗(yàn)
            2.7.1 交叉試驗(yàn)
            2.7.2 阻斷試驗(yàn)
        2.8 重復(fù)性試驗(yàn)
    3 結(jié)果
        3.1 抗原蛋白含量的測(cè)定
        3.2 抗原和血清最適濃度的確定
        3.3 酶標(biāo)二抗最適工作濃度
        3.4 陰性臨界值確定
        3.5 特異性試驗(yàn)
        3.6 重復(fù)性試驗(yàn)
    4 討論
第四章 鴨源沙門氏菌滅活疫苗的免疫原性研究
    1 材料
        1.1 主要試劑
        1.2 主要儀器
        1.3 試驗(yàn)動(dòng)物
    2 方法
        2.1 試驗(yàn)鴨分組與免疫程序
        2.2 細(xì)胞免疫水平檢測(cè)
            2.2.1 淋巴細(xì)胞增殖能力檢測(cè)
            2.2.2 外周血清中細(xì)胞因子含量檢測(cè)
            2.2.3 外周血白細(xì)胞吞噬活性檢測(cè)
        2.3 血清抗體水平檢測(cè)
    3 結(jié)果
        3.1 細(xì)胞免疫水平檢測(cè)結(jié)果
            3.1.1 淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)結(jié)果
            3.1.2 外周血清中IL-4和IFN-γ的含量
            3.1.3 白細(xì)胞吞噬活性檢測(cè)結(jié)果
        3.2 血清抗體的消長(zhǎng)規(guī)律
    4 討論
        4.1 疫苗免疫對(duì)細(xì)胞免疫水平的影響
            4.1.1 疫苗免疫對(duì)淋巴細(xì)胞增殖活性的影響
            4.1.2 疫苗免疫對(duì)外周血細(xì)胞因子濃度的影響
            4.1.3 疫苗免疫對(duì)白細(xì)胞吞噬活性的影響
        4.2 疫苗免疫對(duì)血清抗體水平的影響
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
發(fā)表論文情況


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3063684