發(fā)布時(shí)間：2021-03-03 16:38

　　本研究以引起仔豬腹瀉的幾個(gè)主要病原:產(chǎn)腸毒素性大腸埃希氏菌（Enterotoxigenic Escherichia Coli,ETEC）、流行性腹瀉病毒（Poricine epidemic diarrhoea,PEDV）及傳染性胃腸炎病毒（Poorcine transmissible gastroenteritis,TGEV）為抗原免疫產(chǎn)蛋雞,制備了抗仔豬病原性腹瀉的特異性卵黃抗體（Egg Yolk Immunoglobulins,IgY）。利用微膠囊和納米技術(shù),制備了抗仔豬病原性腹瀉的IgY納米粒-微球,以達(dá)到提高IgY穩(wěn)定性及靶向釋放目的。并通過(guò)建立小鼠大腸桿菌腹瀉動(dòng)物模型探討IgY及IgY納米粒-微球?qū)π∈蟾篂a模型的預(yù)防作用。將產(chǎn)腸毒素性大腸埃希氏菌（K88,K99,987P）標(biāo)準(zhǔn)菌株混合制備成油乳苗,與流行性腹瀉和傳染性胃腸炎二聯(lián)苗同時(shí)免疫產(chǎn)蛋雞,監(jiān)測(cè)抗體消長(zhǎng)規(guī)律,結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩種疫苗相互間無(wú)干擾,三種抗體水平均能持續(xù)增長(zhǎng)。收集含此IgY的高免蛋,水稀釋法去脂后,以氯化鈉鹽析法進(jìn)行純化,加入氯化鈉晶體濃度至1.5 mol/L,調(diào)節(jié)pH至4.0可以除去大部分雜蛋白,獲得電泳純的IgY... 

【文章來(lái)源】：廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：77 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１?ＩｇＧ和ＩｇＹ的對(duì)比??

廣西大學(xué)頓士學(xué)位論文?抗仔猜病康性腹強(qiáng)卵黃抗體及其納米粒－微球的制備與評(píng)價(jià)??化學(xué)結(jié)構(gòu)是Ｎ－乙酰胺基葡萄糖和脫乙酰胺基葡萄糖兩種單體的共聚物（見圖１－３），ｐＫａ??值為５．５？６．５，可溶解于稀酸，在酸性條件下帶正電，具有良好的凝膠性和成膜性，因此??可制作成包含藥物的凝膠、膜或微球等藥物緩釋控制的載體，此外其幾乎無(wú)免疫原性，??分解產(chǎn)物無(wú)毒性，對(duì)機(jī)體無(wú)害。目前大量研究表明，殼聚糖本身亦具有一定抗菌活性，??提高機(jī)體免疫功能等其他對(duì)機(jī)體有利的作用［４２］，所以殼聚糖己成為靶向和緩控釋研究的??熱點(diǎn)，特別在于蛋白質(zhì)、多肽、基因等生物活性大分子藥物的包載方面，具有廣闊的應(yīng)??用前景。??ｉ?＾?ｉ?＜；?？?ｒ?＂?？?、?ｒ?Ｈ，?ａ??＾?０ｈ?〇ｃｉｘ?＊＊?Ｈ?Ｈｈ?１４??Ａ〇?Ａ?０?Ｄ??ＣｈｔｔｏＢａｎ??圖１－３殼聚糖化學(xué)結(jié)構(gòu)??Ｔａｂｌｅ?１－３?Ｔｈｅ?ｃｈｅｍｉｃａｌ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?Ｃｈｉｔｏｓａｎ??１．２．?２．?２殼聚糖納米粒的制備??１）離子交聯(lián)法??離子交聯(lián)法又稱離子凝膠法，其原理是在水溶液中，殼聚糖上帶正電荷的氨基和聚??陰離子或陰離子鹽通過(guò)電荷相互作用而發(fā)生反應(yīng)形成納米粒

２．３．１抗體消長(zhǎng)規(guī)律??按免疫程序進(jìn)行免疫后，采血分離血清進(jìn)行大腸桿菌（ＥＴＥＣ）、流行性腹瀉（ＰＥＤＶ）、??傳染性冑腸炎（ＴＧＥＶ）三種抗體的檢測(cè)，抗體消長(zhǎng)規(guī)律如圖２－１。在此免疫方法下，三??種抗體在三免時(shí)均達(dá)到較大值，據(jù)實(shí)驗(yàn)室前期研宄［６３］，二免后血清中抗體效價(jià)和蛋黃中??抗體效價(jià)差異不大，可開始收集高免蛋。在收集過(guò)程中效價(jià)有下降趨勢(shì)時(shí)進(jìn)行補(bǔ)免后可??很快回升。??大腸桿菌抗休效價(jià)變化??Ｉ：??ｉ６?＇?／?—誠(chéng)??０?５?１０?１５?２０?２５?周數(shù)??ＰＥＤＶ抗體效價(jià)變化??１．８?Ｔ－?—?—????抗?１．６?Ｉ．丨？丨ｖ?．丨￣，￣?????體！．４???－―＾——，???：???Ｈ?＞＿?？抗圓??ｐ?多??０．６???????????Ｊｉ?〇－４?—－??????????Ｏ?５?ｌＯ?１５?２０?２５?周數(shù)??ＴＧＥＶ抗體效價(jià)變化??１．８?—?■＇—？—．—?—???１?Ｓｉ?—??Ｊ?０８?４??—０．６?？，？．????

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]靶向遞藥系統(tǒng)白蛋白納米粒的研究進(jìn)展[J]. 王夢(mèng)迪,何廣衛(wèi).  安徽醫(yī)藥. 2013(10)
[2]大腸桿菌自家滅活油乳苗的制備及疫苗質(zhì)量檢驗(yàn)[J]. 付興祥,張忠平,張海琴,劉瓊,趙永平,楊貴樹.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2013(05)
[3]硒化乳酸菌胞外多糖對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞免疫功能的影響[J]. 劉佳,潘道東.  營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2013(01)
[4]載馬錢子堿納米粒的微球系統(tǒng)的制備與初步評(píng)價(jià)[J]. 王建,陳志鵬,蔡寶昌.  南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2013(01)
[5]抗金黃色葡萄球菌IgY酶解穩(wěn)定性及體外抑菌研究[J]. 彭維,歐愛(ài)芬.  食品工業(yè)科技. 2013(07)
[6]智能納米材料在藥物傳遞系統(tǒng)中的應(yīng)用研究現(xiàn)狀[J]. 吳迪,梁娟娟,丁婭,張燦.  藥學(xué)進(jìn)展. 2012(10)
[7]納米給藥系統(tǒng)在難溶性藥物制劑研究中的應(yīng)用[J]. 連建豪,陳建明.  中國(guó)新藥與臨床雜志. 2012(08)
[8]蛋白多肽類口服給藥微粒載體研究進(jìn)展[J]. 王婷.  藥物生物技術(shù). 2012(04)
[9]提純雞卵黃免疫球蛋白IgY方法的研究[J]. 謝國(guó)文,張永宏,許春杏,楊杰,張維森,張健.  貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2012(02)
[10]藥物微膠囊壁材研究進(jìn)展[J]. 孟銳,李曉剛,周小毛,高必達(dá),柏連陽(yáng).  高分子通報(bào). 2012(03)

博士論文
[1]單增李斯特菌雞卵黃抗體的抑菌性能及其機(jī)理研究[D]. 隋建新.中國(guó)海洋大學(xué) 2010
[2]口服微囊化卵黃免疫球蛋白（IgY）的制備及性能研究[D]. 李曉宇.大連理工大學(xué) 2008
[3]天然多糖及其衍生物納米載藥體系的研究[D]. 劉宗華.暨南大學(xué) 2007

碩士論文
[1]LY294002白蛋白結(jié)合納米粒注射劑的制備與評(píng)價(jià)[D]. 戴杰.蘇州大學(xué) 2013
[2]抗豬鏈球菌卵黃抗體的性質(zhì)和殼聚糖納米微粒制備研究[D]. 韓芳.陜西科技大學(xué) 2013
[3]卵黃免疫球蛋白的分離純化研究[D]. 楊娟.中國(guó)石油大學(xué) 2009
[4]抗仔豬大腸桿菌病原性腹瀉IgY抗體微膠囊的初步制備及緩釋效果評(píng)價(jià)[D]. 梁安莉.廣西大學(xué) 2008
[5]致奶牛乳腺炎金黃色葡萄球菌特異性卵黃抗體的制備及活性研究[D]. 郭潔.大連理工大學(xué) 2007
[6]抗大腸桿菌內(nèi)毒素卵黃抗體的制備及生物活性測(cè)定[D]. 張霞.石河子大學(xué) 2006



本文編號(hào)：3061581