豬鏈球菌（Streptococcus suis）是一種重要的豬病原體,它能夠引起豬的多種疾病包括腦膜炎、敗血癥、關(guān)節(jié)炎、心內(nèi)膜炎,甚至導(dǎo)致死亡。在豬鏈球菌33個(gè)血清型中,豬鏈球菌2型（Streptococcus suis serotype 2,S.suis 2）是臨床分離最多的、毒力最強(qiáng)的病原菌,在給世界的養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失的同時(shí),也能通過患病的動(dòng)物或者污染的生豬肉副產(chǎn)品感染人類,威脅人類健康,嚴(yán)重的可引起人死亡。雙組分信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)（Two-component signal transduction system,TCS）廣泛存在于細(xì)菌中,調(diào)節(jié)各種重要的細(xì)菌生理和代謝過程,在細(xì)菌的毒力和致病性方面發(fā)揮重要作用,但是對(duì)于豬鏈球菌中參與逃避天然免疫反應(yīng)的雙組分調(diào)控系統(tǒng)尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)室已有ΔTCS2（ΔbceRS）、ΔTCS3（ΔnisKR）、ΔTCS4（ΔsalKR）、ΔTCS5（ΔciaRH）、ΔTCS6（ΔvicK）、ΔTCS8（Δihk/rr）、ΔTCS11（Δ1910KR）等雙組分基因缺失株。本課題利用同源重組構(gòu)建了ΔTCS1（ΔvraSR）、ΔTCS7（ΔSC84

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

細(xì)菌雙組分調(diào)控系統(tǒng)示意圖

3.1 實(shí)驗(yàn)材料3.1.1 菌株、質(zhì)粒和培養(yǎng)條件豬鏈球菌2型強(qiáng)毒力野生菌株 SC19 由本實(shí)驗(yàn)室 2005 年于四川資陽發(fā)病豬體內(nèi)分離，鑒定后保存。ΔbceRS、ΔnisKR、ΔsalKR、ΔciaRH、ΔvicK、Δihk/rr、Δ1910KR基因缺失突變株是在 SC19 菌株的基礎(chǔ)上通過同源重組的方法得到，由本實(shí)驗(yàn)保存。大腸桿菌 DH5α 感受態(tài)細(xì)胞購自北京全式金生物技術(shù)有限公司；溫敏型自殺性質(zhì)粒 pSET4S (圖 3-1)、pSET2 (圖 3-2) 均有日本國立動(dòng)物衛(wèi)生研究所 Dr.Sekizaki 惠贈(zèng)并由本實(shí)驗(yàn)室保存。豬鏈球菌菌株在含有 10%新生牛血清的 TSB 或 TSA 培養(yǎng)基，37℃條件下生長；pSET4s 質(zhì)粒和 pSET2 質(zhì)粒含有壯觀霉素標(biāo)記基因，壯觀霉素的使用濃度為100 μg/mL。

3.1 實(shí)驗(yàn)材料3.1.1 菌株、質(zhì)粒和培養(yǎng)條件豬鏈球菌2型強(qiáng)毒力野生菌株 SC19 由本實(shí)驗(yàn)室 2005 年于四川資陽發(fā)病豬體內(nèi)分離，鑒定后保存。ΔbceRS、ΔnisKR、ΔsalKR、ΔciaRH、ΔvicK、Δihk/rr、Δ1910KR基因缺失突變株是在 SC19 菌株的基礎(chǔ)上通過同源重組的方法得到，由本實(shí)驗(yàn)保存。大腸桿菌 DH5α 感受態(tài)細(xì)胞購自北京全式金生物技術(shù)有限公司；溫敏型自殺性質(zhì)粒 pSET4S (圖 3-1)、pSET2 (圖 3-2) 均有日本國立動(dòng)物衛(wèi)生研究所 Dr.Sekizaki 惠贈(zèng)并由本實(shí)驗(yàn)室保存。豬鏈球菌菌株在含有 10%新生牛血清的 TSB 或 TSA 培養(yǎng)基，37℃條件下生長；pSET4s 質(zhì)粒和 pSET2 質(zhì)粒含有壯觀霉素標(biāo)記基因，壯觀霉素的使用濃度為100 μg/mL。


本文編號(hào)：3058018