蒲公英甾醇對LPS誘導(dǎo)的乳腺炎抗炎作用及調(diào)節(jié)機制研究
發(fā)布時間:2021-02-28 17:42
奶牛乳腺炎是奶牛三大重要生產(chǎn)性疾病之一,給奶業(yè)生產(chǎn)造成具大經(jīng)濟損失。該病發(fā)生范圍廣泛,幾乎世界各地的奶牛場均有發(fā)生。據(jù)世界奶業(yè)協(xié)會統(tǒng)計,目前全世界約有2.2億頭奶牛,其中約有30%的奶牛患有乳腺炎,乳腺炎給世界奶牛業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失。我國奶牛乳腺炎發(fā)病率為20%-70%,據(jù)不完全統(tǒng)計,個別牛群發(fā)病率甚至更高,每年因乳腺炎所造成的經(jīng)濟損失超過了3.16億元。誘導(dǎo)奶牛乳腺炎發(fā)生的病因有多種,涉及營養(yǎng)因素,物理因素,生物因素等。生物因素包括各種病原微生物引發(fā)的感染,有細(xì)菌、霉形體、真菌、病毒等,據(jù)報道多達80多種,臨床上引發(fā)乳腺炎的病原菌以金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和鏈球菌為主,約占總發(fā)病率的80%以上。大腸桿菌性乳腺炎,常呈最急性發(fā)病,病程短,奶牛乳房嚴(yán)重腫脹,并有毒血癥癥狀、高熱、精神委頓、食欲廢絕、拉稀、乳汁水樣黃色、迅速停止泌乳癥狀,大多預(yù)后不良,并可于數(shù)日死亡。對大腸桿菌的治病機理研究表明,其致病原因主要為構(gòu)成其細(xì)胞壁表面的脂多糖成分,即LPS。抗生素在防治乳腺炎的過程中發(fā)揮著重要作重,但是由于抗生素常伴有藥物殘留問題,并導(dǎo)致人體藥物耐受,對人體健康有害,加之人們對健康內(nèi)涵理解程度...
【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:97 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
英文縮略詞表
第一篇 文獻綜述
第1章 奶牛乳腺炎研究進展
1.1 奶牛乳腺炎的危害
1.2 奶牛乳腺炎的病因與發(fā)病機制
1.3 奶牛乳腺炎的分類
1.4 奶牛乳腺炎的診斷
1.5 奶牛乳腺炎的防治
第2章 中藥防治乳腺炎及蒲公英甾醇的藥理學(xué)功能
2.1 中藥的歷史淵源
2.2 中藥防治乳腺炎的中醫(yī)理論
2.3 中藥蒲公英的藥理學(xué)作用
2.4 蒲公英甾醇的藥理學(xué)作用
第二篇 實驗部分
第1章 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)的小鼠肺損傷抗炎效果與機制研究
1.1 材料
1.1.1 實驗動物
1.1.2 儀器和設(shè)備
1.1.3 藥品和試劑
1.1.4 試驗所需試劑配制
1.2 方法
1.2.1 急性肺損傷(ALI)模型建立
1.2.2 肺組織濕干重(W/D)比率測定
1.2.3 髓過氧化物酶(MPO)活性測定
1.2.4 支氣管肺泡灌洗液(BALF)采集和細(xì)胞計數(shù)
1.2.5 支氣管肺泡灌洗液(BALF)中細(xì)胞因子測定
1.2.6 肺組織病理學(xué)分析
1.2.7 NF-κB、MAPKs 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路變化檢測
1.2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
1.3 結(jié)果
1.3.1 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)小鼠肺組織濕干重比率影響
1.3.2 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo) ALI 小鼠肺組織 MPO 活性影響
1.3.3 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo) ALI 小鼠 BALF 中總細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞數(shù)量影響
1.3.4 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo) ALI 小鼠 BALF 中細(xì)胞因子影響
1.3.5 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo) ALI 小鼠肺組織病理學(xué)變化影響
1.3.6 蒲公英甾醇對 ALI 小鼠肺組織 NF-κB 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響
1.3.7 蒲公英甾醇對 ALI 小鼠 MAPKs 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響
1.4 討論
1.5 小結(jié)
第2章 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)的小鼠乳腺炎抗炎效果研究
2.1 材料
2.1.1 實驗動物
2.1.2 藥品和試劑
2.1.3 儀器和設(shè)備
2.1.4 實驗所需試劑配制
2.2 方法
2.2.1 實驗分組
2.2.2 給藥時間和方法
2.2.3 樣本采集
2.2.4 病理組織學(xué)分析
2.2.5 髓過氧化物酶(MPO)活性測定
2.2.6 ELISA 檢測乳腺組織中 TNF-α、IL-1β和 IL-6 水平
2.2.7 乳腺組織中蛋白提取
2.2.8 NF-κB 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路變化檢測
2.2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
2.3 結(jié)果
2.3.1 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)小鼠乳腺炎病理組織學(xué)影響
2.3.2 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)小鼠乳腺組織 MPO 活性影響
2.3.3 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)小鼠乳腺炎 TNF-α、IL-1β和 IL-6 水平影響
2.3.4 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)小鼠乳腺炎 NF-κB 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響
2.4 討論
2.5 小結(jié)
第3章 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)的小鼠乳腺上皮細(xì)胞炎性因子影響
3.1 材料
3.1.1 實驗動物
3.1.2 藥品和試劑
3.1.3 儀器和設(shè)備
3.1.4 實驗所需試劑配制
3.2 方法
3.2.1 小鼠乳腺上皮細(xì)胞分離培養(yǎng)
3.2.2 小鼠乳腺上皮細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
3.2.3 小鼠乳腺上皮細(xì)胞生物學(xué)鑒定
3.2.4 MTT 方法檢測蒲公英甾醇對小鼠乳腺上皮細(xì)胞毒性作用
3.2.5 ELISA 方法檢測 TNF-α、IL-6 水平
3.2.6 NF-κB、MAPKs 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路變化檢測
3.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
3.3 結(jié)果
3.3.1 蒲公英甾醇對小鼠乳腺上皮細(xì)胞毒性影響
3.3.2 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)小鼠乳腺上皮細(xì)胞 TNF-α、IL-6 分泌影響
3.3.3 蒲公英甾醇對小鼠乳腺上皮細(xì)胞 NF-κB 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響
3.3.4 蒲公英甾醇對小鼠乳腺上皮細(xì)胞 MAPKs 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響
3.4 討論
3.5 小結(jié)
第4章 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)的奶牛乳腺上皮細(xì)胞炎性因子影響
4.1 材料
4.1.1 實驗細(xì)胞
4.1.2 藥品和試劑
4.1.3 儀器和設(shè)備
4.1.4 實驗所需試劑配制
4.2 方法
4.2.1 MTT 方法檢測蒲公英甾醇對奶牛乳腺上皮細(xì)胞毒性作用
4.2.2 qPCR 檢測 TNF-α、IL-1β和 IL-6 基因表達水平
4.2.3 Western blot 檢測 NF-κB 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路變化
4.2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
4.3 結(jié)果
4.3.1 蒲公英甾醇對奶牛乳腺上皮細(xì)胞毒性影響
4.3.2 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)奶牛乳腺上皮細(xì)胞 TNF-α、IL-1β和 IL-6 分泌影響
4.3.3 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)奶牛乳腺上皮細(xì)胞 NF-κB 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響
4.4 討論
4.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
導(dǎo)師簡介
作者簡介及在學(xué)期間所取得的科研成果
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]奶牛乳房炎及其綜合治療措施[J]. 方磊,郭玉江. 中國畜牧獸醫(yī)文摘. 2012(08)
[2]8味中藥對奶牛乳房炎病原菌的體外抑菌試驗[J]. 郭慶,朱偉,易瓊,何炳坤,徐賓朋,王魯. 中國獸醫(yī)雜志. 2012(05)
[3]中草藥提取物與酶復(fù)合物對牛乳房炎病原菌的抑菌效果[J]. 呂平,韋麗君,黃強,黃惠芳. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2012(03)
[4]自制中草藥制劑治療奶牛乳房炎[J]. 黃遠(yuǎn)全,吳建英,陳橙,代長云,華娟,李杰,黃海軍. 中國畜牧獸醫(yī)文摘. 2012(02)
[5]動物免疫應(yīng)激反應(yīng)的危害和防治[J]. 陳永,劉永忠,常定發(fā). 山東畜牧獸醫(yī). 2011(12)
[6]蒲公英屬植物研究進展[J]. 李景華,劉玉芹,王黎明. 吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報. 2011(03)
[7]中草藥防治奶牛乳房炎的研究[J]. 郭旭東,刁其玉,汪新建. 中國飼料. 2011(08)
[8]奶牛乳房炎疫苗防治的研究進展[J]. 高宇,馮新,李林溪,趙紅蕾,刁昱文,劉珊珊,顧敬敏,韓文瑜,雷連成. 河北科技師范學(xué)院學(xué)報. 2011(01)
[9]中藥治療奶牛乳腺炎的效果觀察[J]. 朱永平. 中國畜牧獸醫(yī)文摘. 2011(01)
[10]預(yù)防奶牛隱性乳房炎的功能性奶牛飼料添加劑試驗研究[J]. 王;,楊帆. 中國乳業(yè). 2011(02)
博士論文
[1]視黃醇對脂多糖誘導(dǎo)的大鼠乳腺炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)及機制研究[D]. 顧蓓蓓.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[2]抗奶牛乳腺炎特異性卵黃抗體的制備及活性研究[D]. 甄宇紅.大連理工大學(xué) 2008
[3]治療奶牛乳房炎的復(fù)方中藥制劑的開發(fā)研究[D]. 李成應(yīng).內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
碩士論文
[1]中藥復(fù)方灌注劑對奶牛乳房炎的防治效果及作用機理的研究[D]. 孟慶娟.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[2]中藥乳頭灌注劑治療臨床型奶牛乳腺炎的研究[D]. 張振國.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[3]小鼠乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系的建立及初步應(yīng)用[D]. 張以濤.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
本文編號:3056212
【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:97 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
英文縮略詞表
第一篇 文獻綜述
第1章 奶牛乳腺炎研究進展
1.1 奶牛乳腺炎的危害
1.2 奶牛乳腺炎的病因與發(fā)病機制
1.3 奶牛乳腺炎的分類
1.4 奶牛乳腺炎的診斷
1.5 奶牛乳腺炎的防治
第2章 中藥防治乳腺炎及蒲公英甾醇的藥理學(xué)功能
2.1 中藥的歷史淵源
2.2 中藥防治乳腺炎的中醫(yī)理論
2.3 中藥蒲公英的藥理學(xué)作用
2.4 蒲公英甾醇的藥理學(xué)作用
第二篇 實驗部分
第1章 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)的小鼠肺損傷抗炎效果與機制研究
1.1 材料
1.1.1 實驗動物
1.1.2 儀器和設(shè)備
1.1.3 藥品和試劑
1.1.4 試驗所需試劑配制
1.2 方法
1.2.1 急性肺損傷(ALI)模型建立
1.2.2 肺組織濕干重(W/D)比率測定
1.2.3 髓過氧化物酶(MPO)活性測定
1.2.4 支氣管肺泡灌洗液(BALF)采集和細(xì)胞計數(shù)
1.2.5 支氣管肺泡灌洗液(BALF)中細(xì)胞因子測定
1.2.6 肺組織病理學(xué)分析
1.2.7 NF-κB、MAPKs 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路變化檢測
1.2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
1.3 結(jié)果
1.3.1 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)小鼠肺組織濕干重比率影響
1.3.2 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo) ALI 小鼠肺組織 MPO 活性影響
1.3.3 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo) ALI 小鼠 BALF 中總細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞數(shù)量影響
1.3.4 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo) ALI 小鼠 BALF 中細(xì)胞因子影響
1.3.5 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo) ALI 小鼠肺組織病理學(xué)變化影響
1.3.6 蒲公英甾醇對 ALI 小鼠肺組織 NF-κB 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響
1.3.7 蒲公英甾醇對 ALI 小鼠 MAPKs 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響
1.4 討論
1.5 小結(jié)
第2章 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)的小鼠乳腺炎抗炎效果研究
2.1 材料
2.1.1 實驗動物
2.1.2 藥品和試劑
2.1.3 儀器和設(shè)備
2.1.4 實驗所需試劑配制
2.2 方法
2.2.1 實驗分組
2.2.2 給藥時間和方法
2.2.3 樣本采集
2.2.4 病理組織學(xué)分析
2.2.5 髓過氧化物酶(MPO)活性測定
2.2.6 ELISA 檢測乳腺組織中 TNF-α、IL-1β和 IL-6 水平
2.2.7 乳腺組織中蛋白提取
2.2.8 NF-κB 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路變化檢測
2.2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
2.3 結(jié)果
2.3.1 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)小鼠乳腺炎病理組織學(xué)影響
2.3.2 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)小鼠乳腺組織 MPO 活性影響
2.3.3 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)小鼠乳腺炎 TNF-α、IL-1β和 IL-6 水平影響
2.3.4 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)小鼠乳腺炎 NF-κB 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響
2.4 討論
2.5 小結(jié)
第3章 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)的小鼠乳腺上皮細(xì)胞炎性因子影響
3.1 材料
3.1.1 實驗動物
3.1.2 藥品和試劑
3.1.3 儀器和設(shè)備
3.1.4 實驗所需試劑配制
3.2 方法
3.2.1 小鼠乳腺上皮細(xì)胞分離培養(yǎng)
3.2.2 小鼠乳腺上皮細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
3.2.3 小鼠乳腺上皮細(xì)胞生物學(xué)鑒定
3.2.4 MTT 方法檢測蒲公英甾醇對小鼠乳腺上皮細(xì)胞毒性作用
3.2.5 ELISA 方法檢測 TNF-α、IL-6 水平
3.2.6 NF-κB、MAPKs 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路變化檢測
3.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
3.3 結(jié)果
3.3.1 蒲公英甾醇對小鼠乳腺上皮細(xì)胞毒性影響
3.3.2 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)小鼠乳腺上皮細(xì)胞 TNF-α、IL-6 分泌影響
3.3.3 蒲公英甾醇對小鼠乳腺上皮細(xì)胞 NF-κB 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響
3.3.4 蒲公英甾醇對小鼠乳腺上皮細(xì)胞 MAPKs 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響
3.4 討論
3.5 小結(jié)
第4章 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)的奶牛乳腺上皮細(xì)胞炎性因子影響
4.1 材料
4.1.1 實驗細(xì)胞
4.1.2 藥品和試劑
4.1.3 儀器和設(shè)備
4.1.4 實驗所需試劑配制
4.2 方法
4.2.1 MTT 方法檢測蒲公英甾醇對奶牛乳腺上皮細(xì)胞毒性作用
4.2.2 qPCR 檢測 TNF-α、IL-1β和 IL-6 基因表達水平
4.2.3 Western blot 檢測 NF-κB 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路變化
4.2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
4.3 結(jié)果
4.3.1 蒲公英甾醇對奶牛乳腺上皮細(xì)胞毒性影響
4.3.2 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)奶牛乳腺上皮細(xì)胞 TNF-α、IL-1β和 IL-6 分泌影響
4.3.3 蒲公英甾醇對 LPS 誘導(dǎo)奶牛乳腺上皮細(xì)胞 NF-κB 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響
4.4 討論
4.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
導(dǎo)師簡介
作者簡介及在學(xué)期間所取得的科研成果
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]奶牛乳房炎及其綜合治療措施[J]. 方磊,郭玉江. 中國畜牧獸醫(yī)文摘. 2012(08)
[2]8味中藥對奶牛乳房炎病原菌的體外抑菌試驗[J]. 郭慶,朱偉,易瓊,何炳坤,徐賓朋,王魯. 中國獸醫(yī)雜志. 2012(05)
[3]中草藥提取物與酶復(fù)合物對牛乳房炎病原菌的抑菌效果[J]. 呂平,韋麗君,黃強,黃惠芳. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2012(03)
[4]自制中草藥制劑治療奶牛乳房炎[J]. 黃遠(yuǎn)全,吳建英,陳橙,代長云,華娟,李杰,黃海軍. 中國畜牧獸醫(yī)文摘. 2012(02)
[5]動物免疫應(yīng)激反應(yīng)的危害和防治[J]. 陳永,劉永忠,常定發(fā). 山東畜牧獸醫(yī). 2011(12)
[6]蒲公英屬植物研究進展[J]. 李景華,劉玉芹,王黎明. 吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報. 2011(03)
[7]中草藥防治奶牛乳房炎的研究[J]. 郭旭東,刁其玉,汪新建. 中國飼料. 2011(08)
[8]奶牛乳房炎疫苗防治的研究進展[J]. 高宇,馮新,李林溪,趙紅蕾,刁昱文,劉珊珊,顧敬敏,韓文瑜,雷連成. 河北科技師范學(xué)院學(xué)報. 2011(01)
[9]中藥治療奶牛乳腺炎的效果觀察[J]. 朱永平. 中國畜牧獸醫(yī)文摘. 2011(01)
[10]預(yù)防奶牛隱性乳房炎的功能性奶牛飼料添加劑試驗研究[J]. 王;,楊帆. 中國乳業(yè). 2011(02)
博士論文
[1]視黃醇對脂多糖誘導(dǎo)的大鼠乳腺炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)及機制研究[D]. 顧蓓蓓.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[2]抗奶牛乳腺炎特異性卵黃抗體的制備及活性研究[D]. 甄宇紅.大連理工大學(xué) 2008
[3]治療奶牛乳房炎的復(fù)方中藥制劑的開發(fā)研究[D]. 李成應(yīng).內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
碩士論文
[1]中藥復(fù)方灌注劑對奶牛乳房炎的防治效果及作用機理的研究[D]. 孟慶娟.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[2]中藥乳頭灌注劑治療臨床型奶牛乳腺炎的研究[D]. 張振國.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[3]小鼠乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系的建立及初步應(yīng)用[D]. 張以濤.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
本文編號:3056212
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