發(fā)布時(shí)間：2021-02-26 03:55

　　雞傳染性支氣管炎是由雞傳染性支氣管炎病毒引起的一種急性高度接觸性病毒性疾病。中國大部分地區(qū)使用Mass血清型疫苗進(jìn)行預(yù)防,但Mass型雞傳染性支氣管炎病毒在發(fā)生呼吸道病雞場的病雞中仍有較高的分離率。本研究以32株Mass型IBV分離株為研究對(duì)象,首先測定其基因組序列,并對(duì)全基因組及其各個(gè)基因片段分別進(jìn)行比較分析,構(gòu)建遺傳進(jìn)化樹,闡明中國IBV分離株與Mass型參考株之間的系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系。然后,選擇5株重組毒株進(jìn)行體外中和試驗(yàn),分析毒株的抗原性變化。最后,將5株重組毒株進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn),觀察毒株的致病性及H120疫苗對(duì)毒株的免疫保護(hù)效應(yīng)。本研究對(duì)32株IBV分離株的基因組進(jìn)行克隆、測序及拼接,比較32株IBV分離株與20株Mass型參考毒株的基因組序列,并進(jìn)行遺傳進(jìn)化分析,結(jié)果顯示其中25株分離株屬于H120樣型毒株,2株分離株屬于Mass41樣毒株,5株分離株屬于重組毒株。比較分析基因組的各個(gè)基因片段,發(fā)現(xiàn)基因的點(diǎn)突變現(xiàn)象存在于所有IBV分離株基因組不同位置,而ck/CH/LHB/111172、 ck/CH/LDL/110931、ck/CH/LHB/130573、ck/CH/LHB/1305... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

傳染性支氣管炎病毒粒子結(jié)構(gòu)模式圖

根據(jù)設(shè)計(jì)的引物，應(yīng)用RT-PCR方法共獲得16個(gè)擴(kuò)增片段，并用0.8%的瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)物，擴(kuò)增條帶大小與預(yù)期結(jié)果一致(圖3.1)。fH i IS t圖3」全基因組的RT-PCR 増產(chǎn)物電泳圖譜（M: 250bpDNA ladder maker)Fig.3.1 Electrophoresis results of RT-PCR products of complete genome sequence (M: 250bp DNA ladder maker)3.2全基因組序列的確定及系統(tǒng)進(jìn)化分析本研究將32株IBV分離株與20株Mass型參考毒株的基因組進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析，結(jié)果表明其中25株分離株屬于H12()樣型毒株，2株分離株屬于Mass4〗樣型毒株，4株分離株介于H120樣型毒株與Mass41樣型毒株之間，1株分離株與其余毒株親緣關(guān)系較遠(yuǎn)（如圖3.2)。H120樣型毒株中25株病毒株之間核苷酸同源性為99.7%-99.9%，與參考株H120比較，其核苷酸同源性為99.8%-99.9%0 Mass41 樣型毒株中 ckyCH/LHLJ/091205 與 ck/CH/LSD/1112150 的核苷酸同源性為99.7%,與同型其他毒株的核苷酸同源性為92.3%-99.9%,與Mass41株比較核苷酸同源性分別為99.9% 禾卩 99.6%。分離株 ck/CH/LHB/111172、ck/CH/LDL/110931、ck/CH/LHB/130573、ck/CH/LHB/130598介于H120樣型毒株與VIass41樣型毒株之間，其核苷酸同源性與H120樣型毒株相對(duì)較高

圖 3.5 ck/CH/LHU/091205、ck/CH/LSD/1112150 與 Mass41 的基因 1 的序列比對(duì)結(jié)果Fig.3.5 Multiple alignments of gene 1 of IBV isolate ck/CH/LHLJ/091205 and ck/CH/LSD/1112150 comparedwith Mass4 〗strain

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]雞傳染性支氣管炎病毒變異機(jī)理及疫苗研究現(xiàn)狀[J]. 王文秀,顧節(jié)清,沈志強(qiáng).  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2010(12)
[2]我國雞傳染性支氣管炎流行現(xiàn)狀及原因分析[J]. 劉勝旺.  中國家禽. 2010(16)
[3]近年來雞傳染性支氣管炎流行病學(xué)特征[J]. 唐應(yīng)華,何家惠,侯繼波.  獸醫(yī)導(dǎo)刊. 2009(11)
[4]雞傳染性支氣管炎病毒分子變異的研究進(jìn)展[J]. 蘇磊,蔡家利.  現(xiàn)代畜牧獸醫(yī). 2007(12)
[5]中國19952004年雞傳染性支氣管炎病毒地方分離株膜蛋白基因的遺傳變異分析[J]. 聶磊,張慶霞,韓宗璽,邵昱昊,榮駿弓,劉勝旺,孔憲剛.  病毒學(xué)報(bào). 2007(04)
[6]雞傳染性支氣管炎中國地方分離毒株LX4 mRNA1 ORF1的遺傳變異特征[J]. 劉勝旺,劉玉芬,孔憲剛,邵昱昊.  病毒學(xué)報(bào). 2004(04)
[7]雞傳染性支氣管炎病毒變異機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 張國慶,劉晶,李廣興.  中國病毒學(xué). 2004(02)
[8]傳染性腺胃炎病毒ZJ971株的一些生物學(xué)特性[J]. 周繼勇.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2000(03)
[9]腺胃病變型雞傳染性支氣管炎病毒的分離鑒定[J]. 榮駿弓,康麗娟,谷守林,吳東來,尹訓(xùn)南,王云峰,江國托,褚桂芳.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 1999(02)
[10]傳染性支氣管炎病毒中國地方分離株RFLP基因分型的研究[J]. 步志高,江國托,劉思國,王秀榮,康麗娟,祁賢,陳萬芳,盧景良.  中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 1997(06)



本文編號(hào)：3052022