奶牛乳房炎一直都被公認(rèn)為世界性難題,它不僅使牛的產(chǎn)奶量下降,還影響著牛奶的品質(zhì),嚴(yán)重的危害著奶牛的健康,而且還會(huì)給公共安全帶來(lái)隱患,嚴(yán)重威脅著人類的健康。本研究對(duì)西北地區(qū)養(yǎng)殖場(chǎng)中的乳房炎奶樣進(jìn)行了細(xì)菌的分離,然后對(duì)分離株菌株進(jìn)行13種藥物的耐藥表型及31種相關(guān)耐藥基因的檢測(cè)、毒力基因的攜帶率以及生物膜形成能力的測(cè)定,并采用多位點(diǎn)序列分型、葡萄球菌A分型、脈沖場(chǎng)凝膠電泳分型和葡萄球菌盒式染色體mec分型等方法對(duì)分離的葡萄球菌進(jìn)行克隆關(guān)系分析,以確定葡萄球菌在西北地區(qū)奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)的耐藥狀況及優(yōu)勢(shì)克隆。進(jìn)行了578份奶牛乳房炎樣品的分離鑒定。共分離出215株葡萄球菌,其中65株金黃色葡萄球菌,39株溶血葡萄球菌,38株模仿葡萄球菌,28株松鼠葡萄球菌,20株腐生葡萄球菌,產(chǎn)色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和馬胃葡萄球菌分別為10株、9株和6株。測(cè)定了臨床常用的13種藥物分別對(duì)215株葡萄球菌分離株MIC值。結(jié)果顯示幾乎所有的葡萄球菌對(duì)紅霉素、林可霉素和卡那霉素的耐藥率都超過(guò)了50%,溶血葡萄球菌對(duì)紅霉素和林可霉素的耐藥率甚至超過(guò)了90%,產(chǎn)色葡萄球菌更甚,對(duì)紅霉素和林可霉素的耐藥率達(dá)到了100%,其中... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：85 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

部分葡萄球菌16SrRNA擴(kuò)增結(jié)果

注：M：DL2000 Marker；1-9：隨機(jī)菌株；10：表皮葡萄球菌陰性對(duì)照；11：CVCC2246 陽(yáng)性對(duì)照?qǐng)D 2.2 金黃色葡萄球菌耐熱核酸酶 nuc 鑒定Fig. 2.2 Result of identification of Heat-stable nuclease nuc of S.aureus strains表 2.3 葡萄球菌的分離數(shù)與分離率Table 2.3 Staphylococcus isolates and separation rate分離株 分離數(shù) 分離率金黃色葡萄球菌 65 11.2%溶血葡萄球菌 39 6.7%模仿葡萄球菌 38 6.6%松鼠葡萄球菌 28 4.8%腐生葡萄球菌 20 3.5%產(chǎn)色葡萄球菌 10 1.7%表皮葡萄球菌 9 1.6%馬胃葡萄球菌 6 1.0%2.4 討論

congo red agar，CRA）：稱取 0.8g 培養(yǎng)基于 10mL 去離。分別稱取 BHI 培養(yǎng)基、瓊脂和蔗糖 37g、10g 和 50g拌至完全溶解，121℃滅菌 15min，冷卻至 60℃左右，等量培養(yǎng)基于滅菌培養(yǎng)皿（約 4mm 高）中。物膜定性檢測(cè)葡萄球菌接種劃線于 CRA 培養(yǎng)基上，37℃恒溫箱中顏色和菌落形態(tài)。如果菌落在 CRA 培養(yǎng)基上呈干燥表示為生物膜陽(yáng)性菌株；菌落在 CRA 培養(yǎng)基上呈濕生物膜陰性菌株。其中陰性菌株的結(jié)果表示為紅色（又分為：深黑色（vb，very black）、黑色（b，black4.1）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]河北省乳源金黃色葡萄球菌耐藥性檢測(cè)及耐藥基因的研究[D]. 杜偉偉.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
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