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豬腎上腺和肝臟3β-HSD基因表達(dá)的品種和性別差異及其分子機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2021-02-24 17:49
  類固醇激素的穩(wěn)態(tài)是維持動(dòng)物機(jī)體正常生命活動(dòng)的保障。腎上腺是類固醇激素的主要合成場(chǎng)所,而肝臟則是主要的代謝部位。3p-羥類固醇脫氫酶/△5-Δ4-異構(gòu)酶(3β-hydroxysteroid dehydrogenase/A5-A4 isomerase,3β-HSD)在類固醇激素的生物合成和降解中發(fā)揮重要作用。研究發(fā)現(xiàn),3β-HSD功能的喪失將阻斷腎上腺和性腺糖皮質(zhì)激素、鹽皮質(zhì)激素和性激素的生成,肝臟類固醇激素的代謝也受到抑制。3β-HSD的表達(dá)及活性受多種因素的影響,包括類固醇激素對(duì)其反饋?zhàn)饔眉案鞣N轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控,然而這些研究主要集中在人的腎上腺細(xì)胞系,豬3β-HSD表達(dá)調(diào)控的研究還很少。因此,本研究的目的是探索雄性斷奶仔豬和出欄豬腎上腺和肝臟3β-HSD基因表達(dá)的品種和性別差異及其分子調(diào)控機(jī)制。1雄性斷奶仔豬腎上腺3β-HSD基因表達(dá)的品種差異選取25日齡的雄性斷奶大白豬5頭,二花臉豬6頭,屠宰,收集血清,采集腎上腺樣品,比較兩品種豬腎上腺3β-HSD的表達(dá),探討品種差異表達(dá)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制。結(jié)果顯示,二花臉豬血清皮質(zhì)醇(P<0.01)和睪酮(P<0.01)水平均顯著高于大白豬... 

【文章來(lái)源】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:120 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略語(yǔ)
引言
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    第一章 3β-HSD結(jié)構(gòu)與功能概述
        1 3β-HSD基因結(jié)構(gòu)、定位和單核苷酸多態(tài)性(SNP)
            1.1 3β-HSD的基因結(jié)構(gòu)
            1.2 3β-HSD基因的定位分析
            1.3 3β-HSD的同源性分析
            1.4 3β-HSD基因的單核苷酸多態(tài)性分析
        2 3β-HSD蛋白結(jié)構(gòu)
        3 3β-HSD的功能
            3.1 腎上腺3β-HSD的功能
            3.2 性腺3β-HSD的功能
            3.3 胎盤3β-HSD的功能
            3.4 外周組織3β-HSD的功能
    第二章 3β-HSD表達(dá)的生理調(diào)控
        1 3β-HSD表達(dá)的時(shí)空特異性
            1.1 腎上腺3β-HSD表達(dá)的發(fā)育性變化
            1.2 睪丸3β-HSD表達(dá)的發(fā)育性變化
            1.3 卵巢3β-HSD表達(dá)的發(fā)育性變化
            1.4 肝臟3β-HSD表達(dá)的發(fā)育性變化
        2 3β-HSD表達(dá)的性別差異
        3 3β-HSD表達(dá)的品種特異性
        4 激素對(duì)3β-HSD表達(dá)的調(diào)節(jié)
            4.1 促腎上腺皮質(zhì)激素
            4.2 血管緊張素Ⅱ
            4.3 糖皮質(zhì)激素
            4.4 性激素
        5 營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境因素對(duì)3β-HSD表達(dá)的調(diào)控
            5.1 營(yíng)養(yǎng)對(duì)3β-HSD表達(dá)的影響
            5.2 環(huán)境對(duì)3β-HSD表達(dá)的影響
            5.3 應(yīng)激對(duì)3β-HSD表達(dá)的影響
        6 疾病與3β-HSD表達(dá)的關(guān)系
    第三章 3β-HSD表達(dá)調(diào)控的分子機(jī)制
        1 3β-HSD的轉(zhuǎn)錄調(diào)控
            1.1 孤兒核受體
            1.2 GATA家族
            1.3 Stat蛋白家族
            1.4 法尼酯X受體
            1.5 CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白β
            1.6 雄激素受體
            1.7 糖皮質(zhì)激素受體
        2 3β-HSD的表遺傳調(diào)控
第二部分 實(shí)驗(yàn)研究
    第四章 雄性斷奶仔豬腎上腺3β-HSD基因表達(dá)調(diào)控的品種差異
        1 材料與方法
            1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及樣品采集
            1.2 主要試劑和儀器
            1.3 主要溶液
            1.4 血清激素水平測(cè)定
            1.5 RT-PCR檢測(cè)相關(guān)基因表達(dá)
            1.6 3β-HSD啟動(dòng)子序列擴(kuò)增及活性檢測(cè)
            1.7 免疫印跡(Western blot,WB)檢測(cè)相關(guān)蛋白表達(dá)
            1.8 染色質(zhì)免疫沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)
            1.9 免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)
            1.10 數(shù)據(jù)分析和統(tǒng)計(jì)
        2 結(jié)果與分析
            2.1 大白豬和二花臉豬血清激素水平
            2.2 大白豬和二花臉豬腎上腺3β-HSD表達(dá)
            2.3 大白豬和二花臉豬3β-HSD基因啟動(dòng)子區(qū)多態(tài)性和活性分析
            2.4 大白豬和二花臉豬腎上腺轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)
            2.5 大白豬和二花臉豬腎上腺3β-HSD基因啟動(dòng)子區(qū)C/EBPβ的結(jié)合
            2.6 大白豬和二花臉豬腎上腺3β-HSD基因啟動(dòng)子區(qū)組蛋白乙酰化水平
            2.7 免疫共沉淀檢測(cè)GR、AR與C/EBPβ的互作關(guān)系
        3 討論
    第五章 雄性斷奶仔豬肝臟3β-HSD基因表達(dá)調(diào)控的品種差異
        1 材料與方法
            1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及樣品采集
            1.2 主要試劑和儀器
            1.3 主要溶液
            1.4 PCR檢測(cè)相關(guān)基因表達(dá)
            1.5 肝臟3β-HSD啟動(dòng)子活性檢測(cè)
            1.6 免疫印跡(Western blot,WB)檢測(cè)肝臟核蛋白表達(dá)
            1.7 染色質(zhì)免疫沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)
            1.8 數(shù)據(jù)分析和統(tǒng)計(jì)
        2 結(jié)果與分析
            2.1 大白豬和二花臉豬肝臟3β-HSD表達(dá)
            2.2 大白豬和二花臉豬肝臟3β-HSD基因啟動(dòng)子活性分析
            2.3 大白豬和二花臉豬肝臟轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)
            2.4 大白豬和二花臉豬肝臟3β-HSD基因啟動(dòng)子區(qū)GR、AR和C/EB鄧的結(jié)合
            2.5 免疫共沉淀檢測(cè)GR與AR、C/EBPβ的互作關(guān)系
        3 討論
    第六章 出欄豬腎上腺3β-HSD基因表達(dá)調(diào)控的性別差異
        1 材料與方法
            1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及樣品采集
        2 結(jié)果與分析
            2.1 不同性別豬血清激素水平
            2.2 不同性別豬腎上腺3β-HSD表達(dá)
            2.3 不同性別豬腎上腺轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)
            2.4 不同性別豬腎上腺3β-HSD基因啟動(dòng)子區(qū)C/EBPβ的結(jié)合
            2.4 不同性別豬腎上腺C/EBPβ和AR、GR結(jié)合的檢測(cè)
        3 討論
    第七章 出欄豬肝臟3β-HSD基因表達(dá)調(diào)控的性別差異
        1 材料與方法
            1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及樣品采集
        2 結(jié)果與分析
            2.1 不同性別豬肝臟3-HSD表達(dá)
            2.2 不同性別豬肝臟轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)
            2.3 不同性別豬肝臟3β-HSD基因啟動(dòng)子區(qū)GR和C/EBPβ的結(jié)合水平
            2.4 不同性別豬肝臟3β-HSD基因啟動(dòng)子區(qū)組蛋白乙;
            2.5 不同性別豬肝臟AR和GR結(jié)合的檢測(cè)
        3 討論
總體討論
結(jié)論
本文創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào):3049734

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