通過(guò)開(kāi)展干細(xì)胞生物學(xué)特性及誘導(dǎo)分化研究不僅可以豐富以干細(xì)胞形式保存遺傳資源的內(nèi)容,而且為保存的干細(xì)胞提供新的利用方向。利用增殖能力強(qiáng)的肺間充質(zhì)干細(xì)胞（PMSCs）離體大量增殖和分化為功能性的肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞（ATⅡ）,是解決呼吸系統(tǒng)疾病的可行途徑之一。目前,傳統(tǒng)的過(guò)表達(dá)基因的方法可以調(diào)控細(xì)胞分化命運(yùn),但操作繁瑣,難以控制基因表達(dá)水平,導(dǎo)致分化后功能性細(xì)胞的臨床應(yīng)用受限,而CRISPR/Cas9技術(shù)為細(xì)胞分化提供了新思路。本研究建立了五指山小型豬、小尾寒羊、鵝胚PMSCs和胎羊軟骨干細(xì)胞（CSPCs）培養(yǎng)體系,鑒定其生物學(xué)特性和多分化潛能,并以分離的豬PMSCs為研究對(duì)象,利用CRISPR/Cas9介導(dǎo)的基因激活系統(tǒng)誘導(dǎo)其向功能性細(xì)胞ATⅡ分化,并研究分化的ATⅡ?qū)Ψ螕p傷實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的修復(fù)效果,鑒定其功能效應(yīng)及用于移植治療的可行性。主要研究?jī)?nèi)容如下:1、胎豬、胎羊、鵝胚的PMSCs和胎羊CSPCs培養(yǎng)體系的創(chuàng)建與鑒定。利用酶消化法分離的胎豬、胎羊、鵝胚的PMSCs和胎羊CSPCs,可在體外擴(kuò)增培養(yǎng),形態(tài)多呈長(zhǎng)梭形,免疫組化、RT-PCR和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果表明PMSCs表達(dá)間充質(zhì)相關(guān)的表... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：130 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

原代和傳代培養(yǎng)的PMSCs的形態(tài)（40×）

圖 2.2 PMSCs 生長(zhǎng)曲線檢測(cè)Figure 2.2 Growth curves detection of PMSCs檢測(cè)15 細(xì)胞的克隆形成能力進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，不同代次的細(xì)胞

21圖 2.3 不同代次的 PMSCs 的克隆形成率Figure 2.3 The colony forming efficiency of PMSCs at different passage檢測(cè)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]我國(guó)畜禽遺傳資源保護(hù)利用現(xiàn)狀分析[J]. 李建江,宋銳,牛葕洲,林麗果.  西北民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2015(03)
[2]我國(guó)畜禽品種資源的保護(hù)與合理利用[J]. 劉喜生,白志明,李步高.  畜牧與飼料科學(xué). 2014(10)
[3]我國(guó)畜禽遺傳資源開(kāi)發(fā)與可持續(xù)利用的思考[J]. 張桂香.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào). 2014(03)
[4]中國(guó)畜禽遺傳資源保護(hù)問(wèn)題分析[J]. 路國(guó)彬,王夏暉,呂文魁,張惠遠(yuǎn).  家畜生態(tài)學(xué)報(bào). 2014(04)
[5]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)博來(lái)霉素致大鼠肺纖維化形成的影響[J]. 崔璦,代華平,戴建武,龐寶森,牛淑潔,呂月平,王辰.  中華結(jié)核和呼吸雜志. 2007(09)

碩士論文
[1]BMSCs移植對(duì)缺血性腦卒中鼠IL-10、TGF-β1表達(dá)的影響[D]. 王芳.南華大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3046575