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雙峰駝CYP3A酶體外活性及其對探針藥物代謝的影響

發(fā)布時間:2021-02-18 14:43
  CYP3A酶參與機體內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)的生物轉(zhuǎn)化,在調(diào)節(jié)機體與外環(huán)境的相互作用以及保持機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮著重要作用。雙峰駝是國家二級保護動物,但有關它適應惡劣環(huán)境的獨特生物學特性,以及對外源性藥物和毒物的處置能力等相關科學研究卻相對滯后。為了探究雙峰駝CYP3A酶的體外活性和對外源性藥物代謝的影響,開展了該項試驗。首先選用Ca2-沉淀法制備雙峰駝肝微粒體,后運用生物化學方法對細胞色素P450酶系進行了初步檢測。結(jié)果表明,BCA法測定雙峰駝肝微粒體蛋白懸液的濃度為1.936±0.052mg/mL,C0還原差示光譜法測定的細胞色素P450總酶的含量為0.397±0.080nmol/mg,還原差示光潛法測定的細胞色素b5(Cytb5)的含量為0.248±0.070nmol/mg,通過紅霉素-N-脫甲基酶的活性來評價CYP3A酶的活性,得到紅霉素-N-脫甲基酶的活性為1.375±0.062nmol? mg-1? min-1。其次又以探針藥物咪達唑侖(MDZ)與雙峰駝肝微粒體共同孵育15min后,以混有內(nèi)標地西泮(DZP)的冰冷甲醇作為反應終止劑終止反應,并采用高效液相色譜紫外檢測(HPL... 

【文章來源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】:54 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

雙峰駝CYP3A酶體外活性及其對探針藥物代謝的影響


8CA標準曲掛Fig.3Stendaed幾curve成BC人

標準曲線,標準曲線,甲酸,紅霉素


甲酸標準曲線由甲醛濃度(nmol/mL)作為橫坐標,OD412,?值作為縱坐標組成,如圖4。由圖可知,隨著甲酸濃度的逐漸升高,其OD4i2?m值也在逐漸增大,呈線性關系,其回歸方程為y=0.0020x-0.0012,相關系數(shù)R2=0.9997,檢測范圍是5~90nmol/mL,最低檢測限為5 nmol/mL。4.2.2.2紅霉素-N-脫甲基酶活性的測定結(jié)果根據(jù)“4.2.2.1”得出的線性回歸方程得出相應甲酸濃度,計算出的甲酸生成速率即表示紅霉素-N-脫甲基酶的活性,具體為1.375±0.062 nmol. mg'-min',其活性明顯高于草負肝細胞系的紅霉素-N-脫甲酶活性_ (0.207±0.035 nmol-mg'-mm')

雙峰駝CYP3A酶體外活性及其對探針藥物代謝的影響


-}or}oz標準曲魏

【參考文獻】:
期刊論文
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碩士論文
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[3]“Cocktail”探針藥物法評價丹參酮ⅡA對大鼠肝微粒體細胞色素P450不同亞型體外代謝活性的影響[D]. 劉潔.天津醫(yī)科大學 2012
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[6]雙峰駝自然發(fā)酵乳對小鼠抗應激和抗氧化能力的影響[D]. 烏仁圖雅.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學 2010
[7]“Cocktail”探針底物法篩選祛瘀劑對5種細胞色素P450酶的抑制作用[D]. 崔學艷.復旦大學 2010
[8]常用中藥成分對藥物代謝酶CYP3A4活性的影響[D]. 李海云.第二軍醫(yī)大學 2009
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[10]人和鼠肝微粒體藥物代謝檢測平臺的建立及初步應用研究[D]. 楊芳.西北大學 2008



本文編號:3039697

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