CYP3A酶參與機(jī)體內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)的生物轉(zhuǎn)化,在調(diào)節(jié)機(jī)體與外環(huán)境的相互作用以及保持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮著重要作用。雙峰駝是國(guó)家二級(jí)保護(hù)動(dòng)物,但有關(guān)它適應(yīng)惡劣環(huán)境的獨(dú)特生物學(xué)特性,以及對(duì)外源性藥物和毒物的處置能力等相關(guān)科學(xué)研究卻相對(duì)滯后。為了探究雙峰駝CYP3A酶的體外活性和對(duì)外源性藥物代謝的影響,開(kāi)展了該項(xiàng)試驗(yàn)。首先選用Ca2-沉淀法制備雙峰駝肝微粒體,后運(yùn)用生物化學(xué)方法對(duì)細(xì)胞色素P450酶系進(jìn)行了初步檢測(cè)。結(jié)果表明,BCA法測(cè)定雙峰駝肝微粒體蛋白懸液的濃度為1.936±0.052mg/mL,C0還原差示光譜法測(cè)定的細(xì)胞色素P450總酶的含量為0.397±0.080nmol/mg,還原差示光潛法測(cè)定的細(xì)胞色素b5（Cytb5）的含量為0.248±0.070nmol/mg,通過(guò)紅霉素-N-脫甲基酶的活性來(lái)評(píng)價(jià)CYP3A酶的活性,得到紅霉素-N-脫甲基酶的活性為1.375±0.062nmol? mg-1? min-1。其次又以探針?biāo)幬镞溥_(dá)唑侖（MDZ）與雙峰駝肝微粒體共同孵育15min后,以混有內(nèi)標(biāo)地西泮（DZP）的冰冷甲醇作為反應(yīng)終止劑終止反應(yīng),并采用高效液相色譜紫外檢測(cè)（HPL... 

【文章來(lái)源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

8CA標(biāo)準(zhǔn)曲掛Fig.3Stendaed幾curve成BC人

甲酸標(biāo)準(zhǔn)曲線由甲醛濃度（nmol/mL)作為橫坐標(biāo)，OD412,?值作為縱坐標(biāo)組成，如圖4。由圖可知，隨著甲酸濃度的逐漸升高，其OD4i2?m值也在逐漸增大，呈線性關(guān)系，其回歸方程為y=0.0020x-0.0012,相關(guān)系數(shù)R2=0.9997，檢測(cè)范圍是5~90nmol/mL,最低檢測(cè)限為5 nmol/mL。4.2.2.2紅霉素-N-脫甲基酶活性的測(cè)定結(jié)果根據(jù)“4.2.2.1”得出的線性回歸方程得出相應(yīng)甲酸濃度，計(jì)算出的甲酸生成速率即表示紅霉素-N-脫甲基酶的活性，具體為1.375±0.062 nmol. mg'-min'，其活性明顯高于草負(fù)肝細(xì)胞系的紅霉素-N-脫甲酶活性_ (0.207±0.035 nmol-mg'-mm')

-}or}oz標(biāo)準(zhǔn)曲魏

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人肝臟組織CYP3A4酶活性的高效液相色譜法測(cè)定[J]. 張海朋,趙杰,張莉蓉,王曉飛,薛文華.  鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2013(04)
[2]雌性大鼠細(xì)胞色素P4503A酶誘導(dǎo)模型建立與驗(yàn)證[J]. 夏宗玲,陳榮,王明麗.  中國(guó)藥學(xué)雜志. 2013(12)
[3]川阿格雷對(duì)大鼠肝微粒體CYP1A2、CYP3A4和CYP2E1活性的影響[J]. 吳吉洋,唐原君,禮嵩,范國(guó)榮.  藥學(xué)服務(wù)與研究. 2013(01)
[4]高效液相色譜法測(cè)定大鼠肝微粒體CYP3A酶的活性[J]. 邱相君,王哲,徐濤,羅順斌,胡國(guó)新.  中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志. 2012(11)
[5]淫羊藿苷對(duì)不同月齡大鼠肝微粒體細(xì)胞色素P450的影響[J]. 李利生,陳瀾,王安斌,陸遠(yuǎn)富,劉杰,石京山.  華西藥學(xué)雜志. 2012(04)
[6]阿帕替尼對(duì)大鼠肝微粒體細(xì)胞色素P4503A1酶活性的影響研究[J]. 梁蔚婷,劉韜,黃紅兵,廖海,馮崑堯,潘瑩,魏雪,周望,周文菁,陳倩超.  中國(guó)藥房. 2012(09)
[7]建立用大鼠肝微粒體快速考察藥物體外CYP3A1活性抑制的方法[J]. 梁蔚婷,黃紅兵,劉韜.  今日藥學(xué). 2012(01)
[8]3種方法測(cè)定大鼠肝微粒體蛋白含量的比較[J]. 簡(jiǎn)暾昱,徐帆,廖春龍,徐貴麗.  中國(guó)藥師. 2011(03)
[9]大鼠肝細(xì)胞色素P4503A活性測(cè)定及其孵育條件的優(yōu)化[J]. 任秀華,曹磊,斯陸勤,薛柯雯,裘軍,李高.  中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志. 2010(10)
[10]HPLC法測(cè)定人肝微粒體6β-羥基睪酮和1-羥基咪達(dá)唑侖濃度[J]. 裘福榮,張榮,孫建國(guó),王廣基,蔣健,馬越鳴.  中國(guó)臨床藥學(xué)雜志. 2010(03)

博士論文
[1]鹽酸雙苯氟嗪在大鼠肝微粒體內(nèi)的代謝特征研究[D]. 郭煒.河北醫(yī)科大學(xué) 2011
[2]狼毒乙素和新狼毒素A的藥物代謝及動(dòng)力學(xué)研究[D]. 張霞.浙江大學(xué) 2011
[3]戊己丸提取物不同配伍組方對(duì)大鼠CYP450酶的影響研究[D]. 翁小剛.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院 2010

碩士論文
[1]公駝?wù)硐俜置谖飳?duì)小鼠免疫功能的影響及抗腫瘤作用研究[D]. 圖門巴雅爾.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[2]黃芪甲苷對(duì)大鼠CYP1A2酶活性影響的研究[D]. 張艷輝.重慶醫(yī)科大學(xué) 2012
[3]“Cocktail”探針?biāo)幬锓ㄔu(píng)價(jià)丹參酮ⅡA對(duì)大鼠肝微粒體細(xì)胞色素P450不同亞型體外代謝活性的影響[D]. 劉潔.天津醫(yī)科大學(xué) 2012
[4]細(xì)胞色素P450酶的抑制、時(shí)間依賴性抑制和誘導(dǎo)模型[D]. 翁燕.復(fù)旦大學(xué) 2012
[5]細(xì)胞色素P450酶活性分析及抑制機(jī)理研究[D]. 段俊敏.湖南師范大學(xué) 2011
[6]雙峰駝自然發(fā)酵乳對(duì)小鼠抗應(yīng)激和抗氧化能力的影響[D]. 烏仁圖雅.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[7]“Cocktail”探針底物法篩選祛瘀劑對(duì)5種細(xì)胞色素P450酶的抑制作用[D]. 崔學(xué)艷.復(fù)旦大學(xué) 2010
[8]常用中藥成分對(duì)藥物代謝酶CYP3A4活性的影響[D]. 李海云.第二軍醫(yī)大學(xué) 2009
[9]蘇尼特雙峰駝乳抗腫瘤免疫活性研究[D]. 王初一.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[10]人和鼠肝微粒體藥物代謝檢測(cè)平臺(tái)的建立及初步應(yīng)用研究[D]. 楊芳.西北大學(xué) 2008



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