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基于c-Myc/CLIC4通路探究脂多糖致大鼠海馬損傷的致病機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2021-02-07 09:59
  在獸醫(yī)學(xué)領(lǐng)域內(nèi)毒素血癥主要繼發(fā)于動(dòng)物子宮蓄膿、膿皮癥及嚴(yán)重外科感染等過(guò)程中。內(nèi)毒素血癥常導(dǎo)致海馬損傷,其臨床發(fā)病率約為70%,能夠引起腦萎縮,認(rèn)知障礙甚至導(dǎo)致死亡。海馬組織損傷后,病患常預(yù)后不良且病死率極高。但到目前為止內(nèi)毒素血癥致海馬損傷的發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)制尚不清楚,導(dǎo)致臨床上缺乏相應(yīng)診治方案及有效治療藥物,因此探究?jī)?nèi)毒素血癥致海馬損傷的發(fā)病機(jī)制已經(jīng)成為獸醫(yī)臨床的熱點(diǎn)及難點(diǎn)。本試驗(yàn)通過(guò)建立內(nèi)毒素血癥模型,從組織水平、細(xì)胞水平及分子水平三個(gè)層次探究LPS致海馬損傷的發(fā)生發(fā)展機(jī)制。應(yīng)用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)對(duì)PC12細(xì)胞進(jìn)行基因編輯,從而驗(yàn)證c-Myc/CLIC4通路在LPS誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡中的作用機(jī)制。為L(zhǎng)PS致海馬損傷的發(fā)病機(jī)制提供新思路,并為今后臨床開展內(nèi)毒素血癥致海馬損傷的治療及進(jìn)行相關(guān)的機(jī)制研究提供理論依據(jù)及試驗(yàn)基礎(chǔ)。在體試驗(yàn)選取36只健康雄性SD大鼠,隨機(jī)均分為CON組和LPS組。LPS組腹腔注射1 mL/kg LPS(10 mg/mL),CON組腹腔注射1 mL/kg生理鹽水。造模4 h后經(jīng)心臟采血并處死大鼠,開顱,分離大腦皮層后取海馬備用。通過(guò)檢測(cè)大鼠血... 

【文章來(lái)源】:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

基于c-Myc/CLIC4通路探究脂多糖致大鼠海馬損傷的致病機(jī)制


大鼠血清炎癥因子檢測(cè)結(jié)果

相關(guān)蛋白,線粒體,檢測(cè)結(jié)果,檢測(cè)線


東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)碩士學(xué)位論文3.4 海馬組織線粒體凋亡途徑相關(guān)蛋白檢測(cè)結(jié)果為探究 LPS 致海馬神經(jīng)元損傷的機(jī)制,本試驗(yàn)檢測(cè)線粒體凋亡途徑相關(guān)蛋白表達(dá)量Western blot 檢測(cè)結(jié)果表明,與 CON 組相比,LPS 組中 Cyt C、cleaved caspase-3 和 Bax/B2 表達(dá)量顯著升高,且差異極顯著(p < 0.01),cleaved caspase-9 的表達(dá)量顯著升高,差顯著(p < 0.05)。具體結(jié)果見圖 3-4。

毒性作用,PC12細(xì)胞,基因敲除,驗(yàn)證結(jié)果


圖 3-7 LPS 對(duì) PC12 細(xì)胞的毒性作用Fig. 3-7 Toxic effects of LPS on PC12 cells 及 c-Myc 基因敲除蛋白驗(yàn)證結(jié)果yc/CLIC4 通路在 LPS 致海馬損傷中的作用,本試驗(yàn)分別敲除 P4 基因,建立單克隆細(xì)胞系,在蛋白水平上檢驗(yàn)敲除是否成功,以便后續(xù)試驗(yàn)研究。敲除結(jié)果見圖 3-8。圖 3-8 CLIC4 及 c-Myc 基因敲除蛋白驗(yàn)證結(jié)果ig. 3-8 Protein validation results of CLIC4 and c-Myc gene knockou胞術(shù)檢測(cè) PC12 細(xì)胞凋亡結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]原花青素對(duì)脂多糖所致內(nèi)毒素血癥小鼠的保護(hù)作用研究[J]. 付坤,魏夢(mèng)圓,李雪萌,丁文文,夏鴻.  現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2019(06)
[2]基于脂多糖-Toll樣受體4信號(hào)通路抗內(nèi)毒素血癥機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 杜成成,尹婷,任如靜,李曉強(qiáng),沈建英,譚余慶.  國(guó)際藥學(xué)研究雜志. 2017(12)
[3]CLIC4在饑餓誘導(dǎo)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞自噬中的作用[J]. 袁兆新,高寒,池明,張宏宇,計(jì)國(guó)義.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué). 2015(05)
[4]尿中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白和IL-18對(duì)膿毒血癥患者伴急性腎損傷的早期診斷意義[J]. 嚴(yán)潔,許紅陽(yáng),臧芝棟,梁鋒鳴,楊挺.  蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2011(05)



本文編號(hào):3022056

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