在獸醫(yī)學(xué)領(lǐng)域內(nèi)毒素血癥主要繼發(fā)于動(dòng)物子宮蓄膿、膿皮癥及嚴(yán)重外科感染等過(guò)程中。內(nèi)毒素血癥常導(dǎo)致海馬損傷,其臨床發(fā)病率約為70%,能夠引起腦萎縮,認(rèn)知障礙甚至導(dǎo)致死亡。海馬組織損傷后,病患常預(yù)后不良且病死率極高。但到目前為止內(nèi)毒素血癥致海馬損傷的發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)制尚不清楚,導(dǎo)致臨床上缺乏相應(yīng)診治方案及有效治療藥物,因此探究?jī)?nèi)毒素血癥致海馬損傷的發(fā)病機(jī)制已經(jīng)成為獸醫(yī)臨床的熱點(diǎn)及難點(diǎn)。本試驗(yàn)通過(guò)建立內(nèi)毒素血癥模型,從組織水平、細(xì)胞水平及分子水平三個(gè)層次探究LPS致海馬損傷的發(fā)生發(fā)展機(jī)制。應(yīng)用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)對(duì)PC12細(xì)胞進(jìn)行基因編輯,從而驗(yàn)證c-Myc/CLIC4通路在LPS誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡中的作用機(jī)制。為L(zhǎng)PS致海馬損傷的發(fā)病機(jī)制提供新思路,并為今后臨床開展內(nèi)毒素血癥致海馬損傷的治療及進(jìn)行相關(guān)的機(jī)制研究提供理論依據(jù)及試驗(yàn)基礎(chǔ)。在體試驗(yàn)選取36只健康雄性SD大鼠,隨機(jī)均分為CON組和LPS組。LPS組腹腔注射1 mL/kg LPS（10 mg/mL）,CON組腹腔注射1 mL/kg生理鹽水。造模4 h后經(jīng)心臟采血并處死大鼠,開顱,分離大腦皮層后取海馬備用。通過(guò)檢測(cè)大鼠血... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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大鼠血清炎癥因子檢測(cè)結(jié)果

東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)碩士學(xué)位論文3.4 海馬組織線粒體凋亡途徑相關(guān)蛋白檢測(cè)結(jié)果為探究 LPS 致海馬神經(jīng)元損傷的機(jī)制，本試驗(yàn)檢測(cè)線粒體凋亡途徑相關(guān)蛋白表達(dá)量Western blot 檢測(cè)結(jié)果表明，與 CON 組相比，LPS 組中 Cyt C、cleaved caspase-3 和 Bax/B2 表達(dá)量顯著升高，且差異極顯著（p ＜ 0.01），cleaved caspase-9 的表達(dá)量顯著升高，差顯著（p ＜ 0.05）。具體結(jié)果見圖 3-4。

圖 3-7 LPS 對(duì) PC12 細(xì)胞的毒性作用Fig. 3-7 Toxic effects of LPS on PC12 cells 及 c-Myc 基因敲除蛋白驗(yàn)證結(jié)果yc/CLIC4 通路在 LPS 致海馬損傷中的作用，本試驗(yàn)分別敲除 P4 基因，建立單克隆細(xì)胞系，在蛋白水平上檢驗(yàn)敲除是否成功，以便后續(xù)試驗(yàn)研究。敲除結(jié)果見圖 3-8。圖 3-8 CLIC4 及 c-Myc 基因敲除蛋白驗(yàn)證結(jié)果ig. 3-8 Protein validation results of CLIC4 and c-Myc gene knockou胞術(shù)檢測(cè) PC12 細(xì)胞凋亡結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]原花青素對(duì)脂多糖所致內(nèi)毒素血癥小鼠的保護(hù)作用研究[J]. 付坤,魏夢(mèng)圓,李雪萌,丁文文,夏鴻.  現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2019(06)
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