在獸醫(yī)學領域內毒素血癥主要繼發(fā)于動物子宮蓄膿、膿皮癥及嚴重外科感染等過程中。內毒素血癥常導致海馬損傷,其臨床發(fā)病率約為70%,能夠引起腦萎縮,認知障礙甚至導致死亡。海馬組織損傷后,病患常預后不良且病死率極高。但到目前為止內毒素血癥致海馬損傷的發(fā)生、發(fā)展的分子機制尚不清楚,導致臨床上缺乏相應診治方案及有效治療藥物,因此探究內毒素血癥致海馬損傷的發(fā)病機制已經成為獸醫(yī)臨床的熱點及難點。本試驗通過建立內毒素血癥模型,從組織水平、細胞水平及分子水平三個層次探究LPS致海馬損傷的發(fā)生發(fā)展機制。應用CRISPR/Cas9基因編輯技術對PC12細胞進行基因編輯,從而驗證c-Myc/CLIC4通路在LPS誘導PC12細胞凋亡中的作用機制。為LPS致海馬損傷的發(fā)病機制提供新思路,并為今后臨床開展內毒素血癥致海馬損傷的治療及進行相關的機制研究提供理論依據及試驗基礎。在體試驗選取36只健康雄性SD大鼠,隨機均分為CON組和LPS組。LPS組腹腔注射1 mL/kg LPS（10 mg/mL）,CON組腹腔注射1 mL/kg生理鹽水。造模4 h后經心臟采血并處死大鼠,開顱,分離大腦皮層后取海馬備用。通過檢測大鼠血... 

【文章來源】：東北農業(yè)大學黑龍江省 211工程院校

【文章頁數】：60 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

大鼠血清炎癥因子檢測結果

東北農業(yè)大學農學碩士學位論文3.4 海馬組織線粒體凋亡途徑相關蛋白檢測結果為探究 LPS 致海馬神經元損傷的機制，本試驗檢測線粒體凋亡途徑相關蛋白表達量Western blot 檢測結果表明，與 CON 組相比，LPS 組中 Cyt C、cleaved caspase-3 和 Bax/B2 表達量顯著升高，且差異極顯著（p ＜ 0.01），cleaved caspase-9 的表達量顯著升高，差顯著（p ＜ 0.05）。具體結果見圖 3-4。

圖 3-7 LPS 對 PC12 細胞的毒性作用Fig. 3-7 Toxic effects of LPS on PC12 cells 及 c-Myc 基因敲除蛋白驗證結果yc/CLIC4 通路在 LPS 致海馬損傷中的作用，本試驗分別敲除 P4 基因，建立單克隆細胞系，在蛋白水平上檢驗敲除是否成功，以便后續(xù)試驗研究。敲除結果見圖 3-8。圖 3-8 CLIC4 及 c-Myc 基因敲除蛋白驗證結果ig. 3-8 Protein validation results of CLIC4 and c-Myc gene knockou胞術檢測 PC12 細胞凋亡結果

【參考文獻】：
期刊論文
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[4]尿中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白和IL-18對膿毒血癥患者伴急性腎損傷的早期診斷意義[J]. 嚴潔,許紅陽,臧芝棟,梁鋒鳴,楊挺.  蘇州大學學報(醫(yī)學版). 2011(05)



本文編號：3022056