為進(jìn)一步完善中國大腸桿菌菌體微量凝集試驗定型血清庫,改良微量凝集試驗用大腸桿菌O抗原定型血清的制備工藝,本試驗選取大腸桿菌O50、O60、O117、O131血清型進(jìn)行定型血清制備方法的探究。首先用大腸桿菌不同血清型的參考菌株制備滅活抗原,而后多次免疫家兔以采血獲得粗血清,用微量凝集試驗的方法確定不同粗血清的交叉凝集素及凝集效價,再通過交叉凝集素吸收法結(jié)合血清稀釋法消除非特異性凝集,最終研制出特異性良好的微量凝集試驗用大腸桿菌O抗原定型血清。本研究確定了大腸桿菌O50、O60、O117、O131定型粗血清的主要交叉凝集素,最終成功研制出特異性良好的微量凝集試驗用大腸桿菌O50、O60、O117、O131定型血清共4種,凝集效價在1∶256至1∶2 048之間,其中微量凝集試驗用大腸桿菌O50、O60定型血清無交叉凝集素,為單因子定型血清,微量凝集試驗用大腸桿菌O117、O131定型血清存在1～2種非特異性的交叉凝集素O14和O107。本研究作為大腸桿菌O抗原定型血清制備工藝摸索過程中的重要部分,為完善中國大腸桿菌菌體微量凝集試驗定型血清庫,進(jìn)一步改良微量凝集試驗用大腸桿菌O抗原定型血清的... 

【文章來源】：中國畜牧獸醫(yī). 2020,47(08)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 菌株
        1.1.2 試驗動物
        1.1.3 培養(yǎng)基及試劑
        1.1.4 主要儀器設(shè)備
    1.2 方法
        1.2.1 菌種的制備
        1.2.2 免疫抗原的制備
        1.2.3 定型粗血清的制備
        1.2.4 定型粗血清交叉凝集素的測定
        1.2.5 定型粗血清交叉凝集效價的測定
        1.2.6 吸收抗原的制備
        1.2.7 定型粗血清的吸收
        1.2.8 定型血清凝集效價測定及效果評價
2 結(jié) 果
    2.1 定型粗血清的微量凝集試驗
    2.2 吸收后血清的微量凝集試驗
    2.3 定型血清的效果評價
3 討 論
4 結(jié) 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]臨床腹瀉肉羊源大腸桿菌流行病學(xué)調(diào)查及耐藥性分析[J]. 宋曉莉,成大榮,劉曉明,熊靜禹,黃亞奇,沈達(dá),林征宇.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2019(23)
[2]大腸埃希氏菌的分型方法及其研究進(jìn)展[J]. 黃濤,山珊,黃艷梅,劉道峰,劉成偉,黃運紅,黃昭鴻,龍中兒.  微生物學(xué)通報. 2020(03)
[3]5種大腸桿菌O抗原定型血清的制備[J]. 辛凌翔,魏財文,張媛,李建,王秀麗,彭國瑞,張一幟,彭小兵,蔣玉文.  中國獸醫(yī)雜志. 2019(05)
[4]不同地區(qū)動物源致病性大腸桿菌的分子特性與表型分析[J]. 高玉斌,趙格,鄒明,王君瑋.  中國動物檢疫. 2018(09)
[5]四川阿壩州牦牛源溶血性大腸桿菌血清型鑒定及毒力相關(guān)基因檢測[J]. 諸明欣,張煥容,湯承,李嘉英.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2018(01)
[6]犢牛腹瀉大腸埃希菌O-抗原血清型鑒定[J]. 藺旭光,馬德慧,康桂英,李佳怡,牛天明,劉鍇.  中國生物制品學(xué)雜志. 2018(01)
[7]山東省雞源致病性大腸桿菌O-抗原混合血清型分析[J]. 馮敏燕,林樹乾,房玉波,李桂明,楊世發(fā),趙增成,黃中利,傅劍,商晶,宋敏訓(xùn).  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2017(09)
[8]成簇的規(guī)律間隔短回文重復(fù)序列在致病菌中分型研究及應(yīng)用[J]. 申進(jìn)玲,吳瑜凡,崔思宇,邵景東.  生物技術(shù). 2017(02)
[9]大腸桿菌O抗原定型血清標(biāo)定用抗原的制備[J]. 張媛,王秀麗,劉博,張磊,李建,彭國瑞,辛凌翔,蔣玉文.  中國獸藥雜志. 2016(12)
[10]大腸桿菌菌體O抗原單因子定型血清的制備[J]. 張媛,劉博,王秀麗,張磊,李建,彭國瑞,辛凌翔,蔣玉文.  中國獸藥雜志. 2016(11)

碩士論文
[1]哈爾濱地區(qū)豬源致病性大腸桿菌耐藥性分析及基因分型研究[D]. 王磊杰.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013



本文編號：3018666