本文關(guān)鍵詞：雌激素對香豬睪丸支持細(xì)胞、生殖細(xì)胞、ERs等的影響研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：雌激素是動物體內(nèi)產(chǎn)生的一類具有廣泛生物活性的類固醇化合物,在雌性和雄性動物的生殖系統(tǒng)發(fā)育及生殖活動中都具有重要作用。已有大量研究表明外源雌激素可誘發(fā)雄性生殖系統(tǒng)發(fā)育及功能異常,但其作用機理尚不清楚。雌激素發(fā)揮其生物學(xué)功能除依賴雌激素受體(ERs)外,也可能通過調(diào)節(jié)類固醇生成關(guān)鍵因子的表達(dá)進(jìn)而影響雄性的生殖功能。另外,雌激素對睪丸中NO生成的影響也可能是雌激素調(diào)控雄性生殖的一條途徑。以往研究多圍繞嚙齒類動物,不能完全代表家畜動物或其它動物。同時,雄性動物幼年時期對雌激素的作用可能更為敏感。故本論文采用免疫組化和酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA),探究了26日齡香豬睪丸中雌激素受體和內(nèi)皮型一氧化氮合酶(e NOS)表達(dá)的細(xì)胞類型,并檢測分析不同劑量雌二醇(E_2)【對照組:0 m L/(d·頭),低劑量:0.1 m L/(d·頭),中劑量:0.5 m L/(d·頭),高劑量:2.5 m L/(d·頭)】對新生香豬生精小管細(xì)胞數(shù)量、雌激素受體表達(dá)、類固醇生成關(guān)鍵因子和一氧化氮合酶(NOS)含量的影響。另外本研究還運用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)研究不同濃度E_2(10-6 mol/L,10~(-7) mol/L,10~(-8) mol/L,10~(-9) mol/L)對體外支持細(xì)胞增值的影響。通過研究得到如下結(jié)果:1、雌二醇對幼年香豬睪丸生殖細(xì)胞和支持細(xì)胞數(shù)量的影響:通過免疫組化技術(shù)研究發(fā)現(xiàn),不同劑量的雌二醇均能使香豬睪丸生殖細(xì)胞的數(shù)量顯著減少(P0.05),但劑量組之間生殖細(xì)胞的數(shù)量沒有顯著差異。相對于對照組與低劑量組,中劑量組與高劑量組中生精小管支持細(xì)胞的數(shù)量也顯著降低(P0.05)。通過對睪丸支持細(xì)胞體外培養(yǎng),研究發(fā)現(xiàn)低濃度雌二醇(10~(-7) mol/L,10~(-8) mol/L,10~(-9) mol/L)對支持細(xì)胞的增值無顯著影響,而高濃度的雌二醇(10-6 mol/L,10~(-7) mol/L)可以抑制支持細(xì)胞的增值(P0.05)。2、雌二醇對幼年香豬睪丸中ERs表達(dá)的影響:通過免疫組化技術(shù)研究發(fā)現(xiàn),幼年香豬睪丸中沒有ERα的表達(dá),ERβ僅在初級生殖細(xì)胞的胞核中表達(dá),統(tǒng)計分析顯示生精小管中ERβ陽性細(xì)胞的表達(dá)率隨E_2劑量的增大而顯著降低(P0.05)。3、雌二醇對幼年香豬睪丸中e NOS表達(dá)及NOS含量的影響:通過免疫組化方法發(fā)現(xiàn),在幼年香豬睪丸中,e NOS僅存在于生殖細(xì)胞的胞質(zhì)中,在支持細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞中均未見表達(dá)。經(jīng)數(shù)據(jù)分析高劑量組和中劑量組生精小管e NOS陽性細(xì)胞表達(dá)率顯著高于低劑量組和對照組(P0.05)。進(jìn)一步通過酶聯(lián)測定免疫吸附法測定各劑量組睪丸中NOS的含量,結(jié)果顯示三個劑量組睪丸中NOS含量均顯著高于對照組(P0.05)。4、雌二醇對幼年香豬睪丸中類固醇生成關(guān)鍵因子表達(dá)的影響:采用酶聯(lián)免疫吸附法測定各組睪丸中SF~(-1)及3β-HSD的含量,結(jié)果表明,SF~(-1)的在睪丸中的表達(dá)量隨E_2用量增加顯著升高(P0.05)。E_2也可以使3β-HSD的表達(dá)量顯著升高,其表達(dá)量在E_2用量為0.5 m L/(d·頭)時最高,在2.5 m L/(d·頭)時表達(dá)量又開始下降(P0.05)。
【關(guān)鍵詞】：雌二醇 香豬睪丸 支持細(xì)胞 生殖細(xì)胞 雌激素受體 一氧化氮合酶 類固醇生成關(guān)鍵因子
【學(xué)位授予單位】：貴州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S828
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• SUMMARY7-9
• 縮略詞9-10
• 第一章 文獻(xiàn)綜述10-22
• 1 雌激素在雄性體內(nèi)的合成及其對睪丸細(xì)胞的作用11-14
• 1.1 雄性體內(nèi)雌激素的合成及其作用方式11-12
• 1.2 雌激素對睪丸細(xì)胞的作用12-14
• 2 雌激素受體在雄性生殖系統(tǒng)的分布及作用14-18
• 2.1 雄性生殖系統(tǒng)中雌激素受體的分布14-17
• 2.2 雌激素受體在雄性生殖系統(tǒng)中的作用17-18
• 3 雌激素與雄性生殖系統(tǒng)中的一氧化氮合酶18-20
• 3.1 一氧化氮在雄性生殖系統(tǒng)的分布及作用18-20
• 3.2 雌激素對雄性生殖系統(tǒng)一氧化氮合酶的影響20
• 4 類固醇生成關(guān)鍵因子SF-1、3β-HSD在雄性生殖系統(tǒng)中的作用20-22
• 第二章 雌二醇對新生香豬睪丸細(xì)胞的影響22-33
• 1 材料與方法22-28
• 1.1 實驗動物與分組22-23
• 1.2 試驗試劑23-24
• 1.3 主要實驗儀器24-25
• 1.4 體內(nèi)實驗方法（免疫組化）25-27
• 1.5 體外實驗方法（支持細(xì)胞培養(yǎng)）27-28
• 1.6 統(tǒng)計分析28
• 2 結(jié)果與分析28-30
• 2.1 26日齡香豬睪丸組織的鏡下觀察28-29
• 2.2 雌二醇對新生香豬睪丸支持細(xì)胞和生殖細(xì)胞的影響29
• 2.3 雌二醇對體外香豬睪丸支持細(xì)胞增殖的影響29-30
• 3 討論30-33
• 第三章 雌二醇對新生香豬睪丸ERs和eNOS表達(dá)、分布及NOS合成的影響33-44
• 1 材料與方法34-37
• 1.1 實驗動物與分組34
• 1.2 試驗試劑34
• 1.3 主要實驗儀器34
• 1.4 藥物注射34
• 1.5 組織處理34-35
• 1.6 免疫組織化學(xué)染色（ERs）35
• 1.7 NOS的測定35-37
• 1.8 ERα、ERβ 和eNOS陽性細(xì)胞計數(shù)37
• 1.9 數(shù)據(jù)處理37
• 2 結(jié)果與分析37-39
• 2.1 幼年香豬睪丸中ERα、ERβ 和eNOS表達(dá)定位37
• 2.2 雌二醇對生精小管ERβ 表達(dá)率的影響37-38
• 2.3 雌二醇對生精小管eNOS表達(dá)率的影響38
• 2.4 雌二醇對幼年香豬睪丸中NOS表達(dá)量的影響38-39
• 3 討論39-44
• 第四章 雌二醇對新生香豬睪丸類固醇生成關(guān)鍵因子的作用44-48
• 1 材料與方法44-45
• 1.1 實驗動物與分組44
• 1.2 試驗試劑44-45
• 1.3 主要實驗儀器45
• 1.4 藥物注射45
• 1.5 組織處理45
• 1.6 SF-1 與 3β-HSD的測定45
• 1.7 數(shù)據(jù)處理45
• 2 結(jié)果與分析45-46
• 3 討論46-48
• 小結(jié)48-49
• 參考文獻(xiàn)49-55
• 致謝55-56
• 附錄Ⅰ56-57
• 附錄Ⅱ57-58

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 付光棟,劉楊,劉培瓊;劍白香豬的臟器測定[J];貴州農(nóng)業(yè)科學(xué);2004年06期

2 尹公鵬;;提高藏香豬經(jīng)濟(jì)效益措施初探[J];畜禽業(yè);2006年21期

3 鄧仕剛;李祖平;;香豬特殊的生物學(xué)及行為特征[J];畜牧獸醫(yī)科技信息;2007年02期

4 李文明;;香豬資源特點和利用現(xiàn)狀[J];豬業(yè)科學(xué);2011年11期

5 姜天團(tuán);滾雙寶;張昌吉;李峰松;俞惠萍;王璐;寇永謀;;香豬生長發(fā)育性能的研究[J];甘肅畜牧獸醫(yī);2012年05期

6 劉培瓊,張啟林,劉若余,劉江良;貴州劍河白香豬Ⅱ系選育初報[J];山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報;2000年06期

7 俞沛初,華修國,徐建雄,周新初,陳克強,陳魯勇;香豬生長發(fā)育和育肥性能測定[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(農(nóng)業(yè)科學(xué)版);2002年03期

8 張?zhí)祜w,蔣登金,左艷芳,陳丙波;貴州小型香豬在手術(shù)中的意外與對策[J];四川動物;2003年04期

9 曾瓊,張啟林,劉培瓊,劉楊;劍白香豬5世代肉質(zhì)的常規(guī)指標(biāo)測定[J];貴州農(nóng)業(yè)科學(xué);2004年03期

10 謝愛純,陳文超,艾曉杰,朱淑文,華修國;溫度刺激對香豬甲狀腺激素和皮質(zhì)醇水平的影響[J];西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2004年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 俞沛初;華修國;徐建雄;陳克強;周新初;許金友;;香豬的生長和繁殖特性測定研究[A];動物學(xué)專輯——上海市動物學(xué)會2001年年會論文集[C];2001年

2 俞沛初;陳克強;華修國;徐建雄;周新初;楊麗娥;;兩個世代香豬的生理和生化指標(biāo)測定分析[A];動物學(xué)專輯——上海市動物學(xué)會2002年年會論文集[C];2002年

3 劉楊;張勤;劉培瓊;張依裕;;貴州劍河香豬血清蛋白多態(tài)性研究[A];第一屆中國養(yǎng)豬生產(chǎn)和疾病控制技術(shù)大會——2005中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會學(xué)術(shù)年會論文集[C];2005年

4 謝愛純;艾曉杰;朱淑文;華修國;趙恩軍;陳軍;;溫度刺激對香豬血液生理指標(biāo)的影響[A];動物學(xué)專輯——上海市動物學(xué)會2002年年會論文集[C];2002年

5 李麗立;范覺鑫;袁曉雪;張彬;耿梅梅;羅佳捷;印遇龍;;大豆異黃酮對香豬雄性發(fā)育的影響[A];“生泰爾”杯全國養(yǎng)豬技術(shù)征文大賽——中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會養(yǎng)豬學(xué)分會五屆三次理事會暨生豬產(chǎn)業(yè)科技創(chuàng)新發(fā)展論壇論文集[C];2012年

6 辜雪冬;陳祖明;肖嵐;辛松林;;藏香豬特色菜肴的開發(fā)[A];第五屆中國畜牧科技論壇論文集[C];2011年

7 鄒艷冶;林羽;李洪忠;;巴馬小型香豬在人體經(jīng)皮給藥系統(tǒng)體內(nèi)評價中的應(yīng)用前景[A];實驗動物與藥理學(xué)、毒理學(xué)研究學(xué)術(shù)交流會論文匯編[C];2009年

8 朱秋勁;賀承淵;任瓊;;新型臘香豬的加工[A];2001年肉類科技交流會暨中國畜產(chǎn)品加工研究會第三屆肉類科技大會論文集[C];2001年

9 俞沛初;喬中東;郭傳甲;華修國;艾曉杰;;3個品種豬的PIT-1基因外顯子多態(tài)性[A];2005年上海市動物學(xué)會學(xué)術(shù)會議論文集[C];2005年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 俞沛初;香豬的特性及PIT—1基因多態(tài)性的研究[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉霞;重慶地區(qū)香豬養(yǎng)殖現(xiàn)狀及存在問題分析調(diào)研報告[D];重慶師范大學(xué);2011年

2 李蓉蓉;香豬的7個拷貝數(shù)變異檢測及其功能研究[D];貴州大學(xué);2016年

3 王洋;香豬8個SNP的群體分型及其與繁殖性狀的關(guān)聯(lián)研究[D];貴州大學(xué);2016年

4 牛秋錦;香豬繁殖性狀相關(guān)SNPs的多態(tài)性研究[D];貴州大學(xué);2016年

5 鐘壘;雌激素對香豬睪丸支持細(xì)胞、生殖細(xì)胞、ERs等的影響研究[D];貴州大學(xué);2016年

6 謝玲玲;香豬生長性狀相關(guān)SNPs的多態(tài)性研究[D];貴州大學(xué);2016年

7 曾瓊;劍白香豬染色體核型及生產(chǎn)性能研究[D];貴州大學(xué);2006年

8 胡俊西;巴馬小型香豬皮膚比較生物學(xué)研究[D];西南大學(xué);2006年

9 陳偉;劍白香豬血液生理生化指標(biāo)常值測定及肥大細(xì)胞觀察[D];貴州大學(xué);2007年

10 戴q

本文編號：301834