自2010年以來,新發(fā)鴨坦布蘇病毒（TMUV）病在我國廣泛流行,給我國鴨養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。鴨TMUV同其它蚊媒黃病毒屬病毒,如日本乙型腦炎病毒（JEV）和西尼羅病毒（WNV）一樣,能夠不以蚊蟲作為媒介直接在動物間傳播。但是,到目前為止,這些病毒脫離蚊媒直接在動物間傳播的分子基礎(chǔ)尚不清楚。當(dāng)前流行的鴨坦布蘇病毒FX2010能夠在鴨子各臟器組織中復(fù)制,并且能在鴨間高效傳播;而早期蚊源坦布蘇病毒MM1775可以在鴨子部分臟器中復(fù)制,但不能在鴨間傳播。為了了解黃病毒屬病毒直接在動物間傳播的分子基礎(chǔ),本研究利用坦布蘇病毒反向遺傳技術(shù)對FX2010和MM1775的E蛋白進(jìn)行相互替換,拯救得到兩株E蛋白嵌合病毒:FX/MME和MM/FXE。將嵌合病毒和各自的親本毒分別接種DF-1細(xì)胞,每隔12h測定接種細(xì)胞上清的病毒滴度,發(fā)現(xiàn)E蛋白替換后,并不影響病毒在DF-1細(xì)胞上的復(fù)制能力。將病毒經(jīng)肌肉接種鴨子后第3天,與FX2010相比,FX/MME仍然可以在接種鴨的脾臟、腎臟和卵巢中檢測到,但是沒有在肺臟中檢測到;與MM1775相比,MM/FXE可以在接種鴨腎臟、肺臟中檢測到,說明E蛋白影響TMU... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：106 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

坦布蘇病毒基因組結(jié)構(gòu)

圖 1. 2 黃病毒生命周期(Mukhopadhyay et al., 2005a)Fig. 1.2 Flavivirus life cycleUV 各蛋白分子量分別為：C 蛋白 13kDa、PrM 蛋白蛋白 25kDa、NS2B 蛋白 15kDa、NS3 蛋白 68 kD 28kDa、NS5 蛋白 100kDa，也對鴨 TMUV 潛在的黃病毒進(jìn)行了分析，鴨 TMUV 和其他黃病毒屬病 蛋白的絲氨酸催化三聯(lián)體結(jié)構(gòu)基序、底物結(jié)合基t al., 2017)。參與病毒核酸的組裝，與核酸結(jié)合，避免被 RNA酶作用后，形成具有生物功能的 M 蛋白，而 M 蛋要成分，對于維持病毒的形態(tài)有重要作用，還與病病毒的增殖 (Zhang et al., 2006) 等。E 蛋白是病毒作用，包括與宿主的受體蛋白結(jié)合、介導(dǎo)病毒與宿y et al., 1995)。與其他黃病毒相似，TMUV 的 E 蛋DI），呈手指樣的結(jié)構(gòu)域 II（DII）和呈免疫球蛋白膜螺旋區(qū)（Th）(Bressanelli et al., 2004，Yu et al., 2E 蛋白中心位置的結(jié)構(gòu)域 I 主要起到連接結(jié)構(gòu)域 I

13圖 2. 1 病毒拯救示意圖；以構(gòu)建 FX2010 和 MM1775 為例Fig. 2.1 Construction and rescue of viruses; Take FX2010 and MM1775 as examples2.1.7.2 突變質(zhì)粒構(gòu)建

【參考文獻(xiàn)】：
碩士論文
[1]坦布蘇病毒MM1775株反向遺傳操作系統(tǒng)的建立及拯救病毒的生物學(xué)特性研究[D]. 閆大為.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2015
[2]H7亞型和H10亞型禽流感病毒的遺傳進(jìn)化分析及鴨坦布蘇病毒的生物學(xué)特性研究[D]. 張月娥.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2013



本文編號：3014110