細管凍精技術(shù)在牛的人工授精繁育中已經(jīng)運用廣泛，但目前馬的細管凍精技術(shù)尚處于試驗階段，離推廣運用還有很大一段距離。為獲取一種適合大中型馬場人工授精應(yīng)用的細管凍精方法。本文進行了馬細管凍精稀釋液和制作方法優(yōu)化的探討。實驗獲得的細管凍精方法簡單，成本較低，便于長期儲存和長途運輸。實驗從改進采精方法做起，采用開放式采精方法，采取公馬射精中段富含精子的精液，提高了凍精制作的效率。在篩選稀釋液方面，實驗參考動物精液稀釋液配方，設(shè)計10種基礎(chǔ)稀釋液配方和添加4%，5%，6%，7%，8%甘油濃度的冷凍稀釋液配方，依據(jù)保存精子的活率和頂體完整率對配方進行篩選，最終得到添加脫脂奶，乳糖等的配方1的基礎(chǔ)稀釋液配方和甘油添加濃度為5%冷凍稀釋液配方精液保存效果較好。在凍精制作方面，實驗采用逐步降溫的方法，最后對細管精液進行液氮凍存。制作過程中對離心和平衡方案進行優(yōu)化，篩選標準也是以精子的活率和頂體完整率為準。篩選離心速度為1500r/min,平衡方案20℃平衡10min后離心，第二次稀釋在20℃進行并4℃平衡2h的效果較優(yōu)最后用獲得的細管凍精解凍后精子的活率達到43%。 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：32 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 馬精液保存技術(shù)研究概況
    1.1 馬精液的保存技術(shù)
    1.2 馬精液保存技術(shù)研究現(xiàn)狀
        1.2.1 采精后精液預(yù)處理
        1.2.2 馬精液的稀釋液
        1.2.3 馬精液冷凍保存方法
        1.2.4 馬精液的稀釋液
    1.3 冷凍造成的精子損傷
        1.3.1 精液冷凍的細胞學基礎(chǔ)
        1.3.2 冷卻和冷休克
        1.3.3 結(jié)冰和精子損傷
    1.4 精液評定方法
        1.4.1 精液評定意義
        1.4.2 常規(guī)評定方法
        1.4.3 新精液品質(zhì)評定法
第二章 一種馬細管凍精制作方法研究
    2.1 材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 方法
        2.2.1 實驗動物的飼養(yǎng)管理
        2.2.2 精液采集
        2.2.3 精液品質(zhì)檢查
        2.2.4 稀釋液的配制及篩選
        2.2.5 冷凍稀釋液中甘油濃度的篩選
        2.2.6 凍精制作
        2.2.7 細管凍精的解凍及質(zhì)量檢測
        2.2.8 凍精制作程序的優(yōu)化
        2.2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 稀釋液的配制及篩選
        2.3.2 冷凍稀釋液中甘油濃度的篩選
        2.3.3 凍精制作過程的優(yōu)化
討論
結(jié)論
參考文獻
致謝
作者簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]變溫過程中二甲基亞砜與水之間氫鍵行為的拉曼光譜研究[J]. 歐陽順利,李正強,吳楠楠,里佐威,孫成林,范麗梅.  光譜學與光譜分析. 2013(09)
[2]長雙歧桿菌BBMN68冷凍保護劑篩選與優(yōu)化[J]. 劉松玲,蔣菁莉,劉愛萍,郭慧媛,冷小京,任發(fā)政.  農(nóng)業(yè)機械學報. 2010(04)
[3]卵黃對精子保護作用的機制[J]. 趙連真,李孝娟.  黑龍江動物繁殖. 2006(04)
[4]精子凍存損傷[J]. 侯明佳,劉睿智.  中國優(yōu)生與遺傳雜志. 2005(04)
[5]豬精液冷凍技術(shù)研究進展[J]. 江中良,李青旺,王立強,胡建宏,王軍,于永生.  家畜生態(tài). 2003(04)
[6]309對早期自然流產(chǎn)夫婦的染色體分析——附4例世界首報核型[J]. 張曉云,李永全,周汝濱,潘超仁,廖霞,陳小萍.  現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展. 2002(04)
[7]哺乳動物精子質(zhì)量的評價方法[J]. 霍立軍,楊增明.  動物學雜志. 2002(02)
[8]低溫冷凍保存技術(shù)與精子庫、卵細胞庫和胚胎庫[J]. 張樹成,王弘毅,王介東.  生物學通報. 2001(09)
[9]波爾山羊凍精解凍方法效果的分析[J]. 吳廣安,薛建華,海龍,于蔚.  中國畜牧雜志. 2001(01)
[10]動物種質(zhì)細胞的超低溫冷凍保存[J]. 李喜龍,季維智.  動物學研究. 2000(05)

碩士論文
[1]馬精液保存的研究[D]. 耿娟.新疆農(nóng)業(yè)大學 2007
[2]“牛細管凍精人工授精技術(shù)在新疆五地州的推廣”項目設(shè)計[D]. 許斌.甘肅農(nóng)業(yè)大學 2004



本文編號：3003483