本研究以山羊?qū)ρ蚨蝗醵疽呙缑庖叻磻?yīng)性為模型,研究基因雜合度對(duì)體液免疫應(yīng)答能力的影響,以此尋求烏骨山羊個(gè)體基因雜合度與體液免疫應(yīng)答能力的關(guān)系,并探尋山羊INHβA基因?qū)w液免疫應(yīng)答的遺傳效應(yīng),期望為今后山羊的抗病育種提供借鑒。選取186只健康的烏骨山羊接種羊痘弱毒疫苗,采用山羊尾巴內(nèi)側(cè)皮內(nèi)接種,每只山羊接種0.5ml。使用羊痘抗體酶聯(lián)免疫分析試劑盒（試劑盒檢測(cè)范圍：3.5ng/L-120ng/L）測(cè)定免疫前和免疫后28天血清中羊痘病毒抗體；提取所有樣本的全基因組DNA,選取PGR、GnRHR、FSH/β、LHβ、 MclR、Agouti、INHβA、Myf5、AA-NAT, IGF-1、NPY-Y1R基因的13個(gè)SNP位點(diǎn),用PCR-SSCP和PCR-RFLP法對(duì)樣本進(jìn)行基因分型。以PGR、GnRHR、FSHβ、LHβ、Mc1R、Agouti、Myf5、AA-NAT、IGF-1、NPY-Y1R基因的12位點(diǎn)來計(jì)算每個(gè)個(gè)體的基因雜合度,分析比較羊痘抗體水平在各雜合度水平間的差異和雜合度與抗體水平的相關(guān)性；并且分析INHfβA各基因型間血清中羊痘病毒抗體濃度間的差異、基因的加性效應(yīng)和顯性效應(yīng)... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
目錄
摘要
Abstract
縮略詞表
1 前言
    1.1 基因雜合度及其與家畜生產(chǎn)性能的相關(guān)性研究
    1.2 體液免疫應(yīng)答及其與疫苗免疫的相關(guān)性研究
    1.3 基因雜合度與體液免疫應(yīng)答的相互關(guān)系
    1.4 本試驗(yàn)的研究目的和意義
2 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 主要試劑及來源
        2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備及來源
        2.1.4 主要溶液及試劑的配制
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 試驗(yàn)動(dòng)物羊痘疫苗的免疫
        2.2.2 血清分離和DNA提取
        2.2.3 血清中羊痘抗體檢測(cè)
        2.2.4 基因組DNA的檢測(cè)
            2.2.4.1 3%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)
            2.2.4.2 分光光度法檢測(cè)DNA
        2.2.5 SNP的篩選
        2.2.6 PCR反應(yīng)
            2.2.6.1 引物PCR反應(yīng)體系
            2.2.6.2 PCR反應(yīng)條件
        2.2.7 PCR產(chǎn)物的檢測(cè)
        2.2.8 聚丙烯酰胺凝膠電泳
            2.2.8.1 聚丙烯酰胺凝膠的制備
            2.2.8.2 PCR產(chǎn)物變性及電泳
            2.2.8.3 灌膠及銀染
        2.2.9 多態(tài)位點(diǎn)的PCR-RFLP分析
    2.3 統(tǒng)計(jì)與分析方法
        2.3.1 羊痘抗體數(shù)據(jù)分析
        2.3.2 等位基因頻率（Allele frequency）
        2.3.3 雜合度（heterozygosity）
3 結(jié)果
    3.1 山羊血清中羊痘抗體檢測(cè)結(jié)果
    3.2 基因組DNA的提取及檢測(cè)結(jié)果
    3.3 13個(gè)基因多態(tài)性位點(diǎn)片段檢測(cè)及分型結(jié)果
    3.4 13個(gè)基因多態(tài)性位點(diǎn)下各基因型間羊痘抗體濃度的比較
    3.5 不同雜合度水平對(duì)山羊羊痘抗體濃度的影響
    3.6 個(gè)體基因雜合度與羊痘抗體水平相關(guān)分析
    3.7 INHβA基因的遺傳分析
    3.8 INHβA基因多態(tài)性對(duì)山羊血清中羊痘抗體的影響
4 討論
    4.1 INHβA基因遺傳變異分析
    4.2 INHβA基因與山羊體液免疫應(yīng)答的關(guān)系
    4.3 基因雜合度對(duì)山羊體液免疫應(yīng)答能力的影響
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
在讀期間發(fā)表論文情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]山羊抑制素βA基因多態(tài)性的分析[J]. 祝鐵鋼,高彥華,王鋒,萬永杰,王子玉,劉源.  畜牧與獸醫(yī). 2009(06)
[3]抑制素βA基因多態(tài)性及其與濟(jì)寧青山羊高繁殖力關(guān)系[J]. 彭志蘭,儲(chǔ)明星,陳宏權(quán),方麗,葉素成.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2007(05)
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[10]珍稀特養(yǎng)新秀——鳳凰山烏骨羊[J]. 張繼躍.  安徽農(nóng)業(yè). 2003(01)



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