J亞群禽白血病是由J亞群禽白血病病毒（Avian Leukosis Virus, ALV-J）引起的一類禽腫瘤性疾病。ALV-J于1988年首次從肉用型雞中分離鑒定出,主要引起肉雞的骨髓細(xì)胞瘤（Myelocytoma）和多種細(xì)胞類型的惡性腫瘤。我國自1999年從肉用型雞中首次分離出ALV-J以來,ALV-J在我國呈蔓延的趨勢。2004年開始我國商品蛋雞感染ALV-J的報告不斷增加,并且ALV-J的感染能夠引起商品蛋雞產(chǎn)生多種類型的腫瘤。ALV-J致病性的增強導(dǎo)致ALV-J在我國蛋雞群中的高發(fā)病率和高死亡率,使我國蛋雞業(yè)生產(chǎn)遭受了巨大的沖擊。有研究顯示,我國部分ALV-J蛋雞流行毒株同ALV-J原型毒株相比其基因組發(fā)生規(guī)律性變異,且某些變異與ALV-J致病力增強相關(guān)。因此從ALV-J基因組進化的角度闡明ALV-J的分子致病機制變得刻不容緩。結(jié)合近年來本實驗室對我國部分地區(qū)ALV-J蛋雞毒株進行的分子流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果和國內(nèi)外多篇已發(fā)表的文獻,顯示我國40%的ALV-J蛋雞分離株基因組5’端非編碼區(qū)（5’untranslated region,5’UTR）的前導(dǎo)區(qū)序列中出現(xiàn)一個連續(xù)19nt的... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

ALV-J原型參考株HPRS-103前病毒基因組結(jié)構(gòu)簡圖

圖2.1 rSD1009和rSD1009Al9感染性克隆的構(gòu)建最上面為rSD1009前病毒基因組,其包括LTR,gag/poUnv(gp85andgp37)，部分rTM，部分DR-丨和E元件。（A)構(gòu)建rSD1009前病毒DNA的過程，將由PCR擴增得到的3個片段按照I，n和11丨的順序，依次連接到pBlueScript 11 KS (+)載體中，黑色箭頭代表引物的位置》(B)前導(dǎo)序列19nt的插入構(gòu)建成rSD1009Al9前病毒DNA。Figure 2.1 Schematic diagrams showing the construction of the rSD1009 and rSD1009A19 proviral DNA

以SD1009前病毒cDNA為模板進行PCR擴增，分別得到片段I 3620 bp,片段113068 bp,片段mi216bp，與預(yù)期大小相符（圖2.2)。I 2 J 2 1 23000.P —一 3叫 EE-3000.P BE 丨2丨_■ ■ _■ ■ ■ABC圖2.2片段I、n和m PCR彳廣增結(jié)果(A) 1： MIOOOO： 2：片段 I (B) 1：片段II; 2： MIOOOO (C)丨：M2000： 2：片段IIIFig 2,2 The PCR results of fragment 1，II and III(A) 1: MIOOOO； 2: fragment I (B) 1: fragmentII ； 2： MIOOOO (C) 1: M2000； 2: fragmentlll2.6.1.2 pBlu-SD1009重組質(zhì)粒的鑒定構(gòu)建好的SD1009分離株前病毒cDNA重組質(zhì)粒pBlu-SD1009，Eagl在pBlu-SD〗009中為單一酶切位點，以Eagl進行酶切鑒定，獲得大小為10733bp的片段，與預(yù)期大小相符（圖2.3)。1 2■3bp IL-J Im11

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2987505