為分析Nrf2基因在新西蘭兔不同組織的表達(dá)差異情況,本試驗(yàn)根據(jù)GenBank公布的穴兔Nrf2基因序列設(shè)計(jì)了特異性引物,從兔肝臟中擴(kuò)增出Nrf2基因并進(jìn)行了生物信息學(xué)分析,同時(shí)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)研究了Nrf2基因在新西蘭兔各組織中的表達(dá)差異。結(jié)果顯示,擴(kuò)增出的新西蘭兔Nrf2基因長(zhǎng)度為1 758 bp,編碼585個(gè)氨基酸。序列比對(duì)結(jié)果顯示,新西蘭兔與穴兔、人、牛、鼠、斑馬魚等各種屬動(dòng)物Nrf2基因的核苷酸一致性為50.70%～99.83%。進(jìn)化樹分析表明Nrf2在物種間具有較高的保守性。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示,Nrf2基因在新西蘭兔的心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟和腦中均有表達(dá),且腎臟中表達(dá)量最高,脾臟中表達(dá)量最低。本試驗(yàn)克隆了新西蘭兔Nrf2基因,并研究了其mRNA在兔各組織中的表達(dá)情況,為開展兔Nrf2/ARE信號(hào)通路的研究奠定了基礎(chǔ)。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2020,40(05)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

新西蘭兔Nrf2基因PCR擴(kuò)增結(jié)果

參照已報(bào)道的人Nrf2蛋白6個(gè)功能區(qū)(Neh1～Neh6)位置[15],通過(guò)氨基酸序列比對(duì),發(fā)現(xiàn)與穴兔相比,新西蘭兔Nrf2蛋白在第283位位點(diǎn)處有1個(gè)絲氨酸(Ser,S)的插入,該絲氨酸插入位點(diǎn)位于功能區(qū)Neh5和Neh6之間(圖2)。對(duì)新西蘭兔Nrf2基因編碼蛋白的進(jìn)一步分析顯示,兔Nrf2蛋白的相對(duì)分子質(zhì)量(m.w.)為65 432.69,等電點(diǎn)(pI)為4.63。以Garnier Robson法對(duì)蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)的預(yù)測(cè)結(jié)果顯示,新西蘭兔Nrf2蛋白含有23個(gè)α-螺旋、11個(gè)β-折疊、37個(gè)β-轉(zhuǎn)角、39個(gè)無(wú)規(guī)卷曲(圖3)。圖3 新西蘭兔Nrf2蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)圖

新西蘭兔Nrf2蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]草魚核因子E2相關(guān)因子2基因克隆分析及其對(duì)呼吸爆發(fā)的調(diào)控作用[J]. 馮燕,秦真東,代云佳,張玉蕾,劉小玲,周洋,蘭江風(fēng),趙麗娟,林蠡.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2018(02)

碩士論文
[1]家蠅Keap1和Nrf2基因的克隆、表達(dá)及功能分析[D]. 于雪.河北大學(xué) 2015



本文編號(hào)：2987448