鴨疫里默氏菌（Riemerella anatipestifer,RA）是一種革蘭氏陰性菌,主要引起鴨、鵝、火雞等禽類的接觸性傳染病。本文開展了基于膜通透性增強蛋白（Imp）的肽核酸（PNA）探針檢測血清1型RA及基于拓撲異構(gòu)酶A（gyrA）的肽核酸增強諾氟沙星抗菌作用的研究,主要內(nèi)容和結(jié)果如下:1.基于Imp肽核酸探針檢測血清1型RA的研究和應用利用軟件篩選出imp基因的第134-145位點序列合成PNA-imp。在RA imp引物上添加5-FAM熒光標記,然后以血清1型RA CH-1株、血清2型RA CH-2株、ATCC 11845株及未知血清型RA各臨床分離株為模板進行PCR擴增,將PNA-imp與擴增產(chǎn)物進行雜交,熒光顯微鏡下PNA-imp與靶位點特異性結(jié)合后會呈現(xiàn)綠色熒光亮斑。結(jié)果表明:在PNA-imp 6.2μM、60°C條件下可以特異檢測到血清1型RA;對2和6型RA、大腸桿菌、鼠傷寒沙門氏菌、多殺性巴氏桿菌等檢測結(jié)果均為陰性。2.基于gyrA肽核酸增強抗菌作用的研究和應用利用軟件篩選出gyrA基因的第1591-1604位點序列合成PNA-gyrA。對比PNA-gyrA與喹... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

γPNA與DNA雜交復合體結(jié)構(gòu)

γPNA調(diào)控翻譯[78]

RNAstructure 5.8軟件繪制 imp mRNA 的二潛在的反義作用靶區(qū)域，如發(fā)卡、膨脹環(huán)、內(nèi)件分析靶區(qū)域 RNA 與 PNA 結(jié)合的各項參數(shù)：凈能量（overall△G）、PNA 與直鏈靶序列結(jié)合因雙鏈解開所需要的能量（Break-targΔG）、Po-self△G）、PNA 分子間結(jié)合所需要的能量（o溫度（Tm），然后根據(jù)最低自由能原則篩選出結(jié)成 PNA-imp 序列遞交至 panagene 公司進行合成，得到 PNA-imp 結(jié)構(gòu)示意圖。如圖 3 所示，其中CTCTTGCGA。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2983099