發(fā)布時間：2021-01-17 02:29

　　亮氨酸作為一種功能性氨基酸,在生物體內(nèi)有眾多的生理學功能,本研究擬通過體外細胞實驗探究亮氨酸調(diào)控細胞抗病毒天然免疫的作用及其分子機制。本課題研究以豬的腸上皮細胞（IPEC-J2）為試驗對象研究亮氨酸調(diào)控天然免疫的分子機制,我們發(fā)現(xiàn)亮氨酸在豬腸上皮細胞中可以誘導IFN-β、RIG-I等PRRs基因的表達,并正向調(diào)節(jié)宿主抗病毒反應。為了研究Sestrin2-mTORC1、IRF3是否參與亮氨酸調(diào)控抗病毒天然免疫過程,我們通過shRNA干擾技術敲低IRF3、Sestrin2、mTORC1的表達。我們發(fā)現(xiàn)亮氨酸激活IRF3通路,正向調(diào)節(jié)IFN-β和PRRs基因的表達;同時,Sestrin2參與亮氨酸誘導的腸上皮細胞mTORC1活化,抑制宿主腸上皮細胞抗病毒反應,并且抑制亮氨酸誘導的先天免疫相關基因的表達。這表明mTORC1可能參與亮氨酸調(diào)控抗病毒天然免疫應答。我們敲低mTORC1后,發(fā)現(xiàn)IFN-β、RIG-I、MDA-5和TLR-3基因表達量下降,同時,在添加rapamycin處理組結果發(fā)現(xiàn)IRF3的活化也收到抑制,這些結果表明mTORC1對亮氨酸誘導的IRF3活化至關重要。綜上所述,在豬腸上... 

【文章來源】：湖南師范大學湖南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

RLRs成員的分子結構（劉洋等，2017）

亮氨酸調(diào)控豬腸道抗病毒天然免疫的分子機制研究于氨基酸激活 mTOR 的信號通路有多種比較重要的有：第一類是氨基酸作用于調(diào)控雜二聚體ras相關GTP結合(Rag)鳥苷三磷酸酶(GTPases)的核苷酸結合狀態(tài)，從而促進 mTORC1 定位到其活化位點，即溶酶體。在氨基酸上游通路中，相關氨基酸通過細胞膜上的 SLC7A5（L 型氨基酸轉(zhuǎn)運載體）與 SLC3A2（溶質(zhì)載體家族 3）間接激活 mTORC1 的激活物 RagA/B 與 RagC/D，從而激活 mTORC1。另一類是氨基酸感知體，例如 2016 年 Sabatini 實驗室證明了 Sestrin2 為亮氨酸激活 mTOR 信號通路的感知體， 其中涉及 RagGTPases、GATOR1、GATOR2 和Ragulator 等多種信號蛋白，基本解析了亮氨酸和精氨酸的信號感知通路[94, 95]。近年來，其他氨基酸的的 mTOR 感知體也相繼被報道出來。如圖 1-3[96]。

4EBP1 己被證明在多種腫瘤細胞中表達，可作腫瘤治療的靶標。n2 是 mTORC1 信號通路中亮氨酸的感知3 是一類高度保守的應激誘導蛋白，在維持代謝病中發(fā)揮著重要作用[103, 104]。除了氧化還原調(diào)性 mTORC1 調(diào)節(jié)。此前有報道稱，Sestrins 通進 TSC2 的活化，從而抑制 mTORC1[105, 106]。的胞漿傳感器，介導亮氨酸誘導的 mTORC1 trin2 直接與 GATOR2 復合物相互作用并抑制 G是 mTORC1 通路的正調(diào)控因子。亮氨酸與 Se，使 GATOR2 激活下游 mTORC1。如圖 1-2。1 信號是否參與調(diào)節(jié)抗病毒先天免疫。

【參考文獻】：
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博士論文
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本文編號：2982013