發(fā)布時間：2021-01-16 06:38

　　現(xiàn)在的養(yǎng)豬業(yè)規(guī)模巨大,相關(guān)動物產(chǎn)品的使用和食用人群眾多,耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（Methicillin-Resistantst Staphylococcus aureus,MRSA）的發(fā)現(xiàn)引發(fā)了各界對養(yǎng)豬業(yè)及其產(chǎn)品的普遍關(guān)注。到目前為止,由MRSA引起的人畜感染所占的比例呈逐年上升的趨勢,并且常引起感染的爆發(fā)和流行、影響甚大。mecA基因是MRSA特有的耐藥基因,femA功能基因是MRSA耐藥性的輔助因子,兩者在其耐藥性中都起到了一定的作用。因此本試驗采用mecA、femA基因檢測,結(jié)果陽性則診斷為MRSA。本文旨在對從四川豬場采集120份樣品中分離的豬源金黃色葡萄球菌進行PCR、擴增mecA和femA基因。對鑒定出的豬源MRSA進行耐藥性檢測與SCCmec分型。本試驗主要研究結(jié)果如下：1.金黃色葡萄球菌的分離純化：2013年3月至年2013年12月期間,在四川地區(qū)12個規(guī)模化豬場采集豬鼻腔拭子、糞便樣品共計120份。采樣后接種血清瓊脂、37℃培養(yǎng)18h,在平板上挑取金黃、檸檬黃或灰白色、邊緣整齊而且表面光滑的圓形菌落。革蘭氏染色、鏡檢后,接種于卵黃甘露醇高鹽瓊脂培養(yǎng)基。在35℃、培... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
符號說明
第一章 文獻綜述
    1 MRSA的起源
    2 MRSA的傳染途徑及危害
    3 MRSA的形態(tài)結(jié)構(gòu)及培養(yǎng)特性
    4 MRSA的耐藥性
        4.1 甲氧西林的藥理特性
        4.2 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的耐藥特點
        4.3 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的耐藥機理
        4.4 MRSA菌株的致病因子
    5 MRSA的常規(guī)實驗室檢測方法
        5.1 卵黃甘露醇高鹽瓊脂培養(yǎng)基對MRSA的初步分離
        5.2 MRSA的K-B檢測方法
        5.3 最低抑菌濃度法
        5.4 E試驗法
        5.5 乳膠凝集法
    6 MRSA的耐藥基因檢測
        6.1 β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥基因的檢測
        6.2 氨基糖苷類藥物耐藥基因
        6.3 大環(huán)內(nèi)酯類-林可霉素-鏈陽菌素B-耐藥基因
        6.4 四環(huán)素類藥物耐藥基因
        6.5 喹諾酮類藥物耐藥基因
        6.6 萬古霉素耐藥基因
        6.7 細(xì)菌生物被膜與耐藥及其檢測
    7 MRSA的分子生物學(xué)基因分型方法
        7.1 葡萄球菌染色體mec盒分型（staphylococcal hromosomalcassette（SCC）mec,SCCmec）
        7.2 脈沖場凝膠電泳分型
        7.3 多位點序列分型
        7.4 可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)分型（variable number tandem repea,tVNTR）
        7.5 金葡菌蛋白A基因多態(tài)性分型
    8 MRSA的治療及預(yù)防
        8.1 防治MRSA的常見藥物
        8.2 防治MRSA的有效新藥（已上市或在研發(fā)階段的藥物）
        8.3 防治MRSA的用藥方法及其他措施
    9 本實驗的研究目的和意義
第二章 四川地區(qū)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的分離鑒定
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 試驗方法
    2 結(jié)果
        2.1 四川各地區(qū)豬場的SA、MRSA檢測結(jié)果
        2.2 豬源金黃色葡萄球菌mecA-fem耐藥基因的PCR檢測結(jié)果
        2.3 SCCmec基因的分型結(jié)果
        2.4 MRSA的測序結(jié)果
        2.5 MRSA的耐藥試驗結(jié)果
        2.6 豬源MRSA的基因型和多重耐藥性的關(guān)系
    3 討論
        3.1 四川省各地區(qū)豬源SA菌株的初步分離
        3.2 MRSA菌株的檢測、分型情況
        3.3 MRSA菌株的耐藥性分析
        3.4 MRSA菌株的耐藥性、基因型和環(huán)境的相互關(guān)系
第四章 結(jié)論
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]耐甲氧西林金黃色葡萄球菌基因診斷及多重PCR SCCmec基因分型方法的建立[J]. 程建平,曾浩,鄒全明,毛旭虎,郭鷹,肖斌,丁紅雷.  中華醫(yī)院感染學(xué)雜志. 2012(11)
[2]金黃色葡萄球菌臨床分離株的耐藥譜變遷[J]. 周勇,楊樂和,林雪峰,李云雷,鄭隆,方超,李繼法,徐顯,余方友,王良興.  中華醫(yī)院感染學(xué)雜志. 2012(11)
[3]耐甲氧西林金黃色葡萄球菌三種檢測方法的評價[J]. 畢麗鳳,徐倩,李洪志,陳洋.  中國誤診學(xué)雜志. 2011(23)
[4]耐甲氧西林金黃色葡萄球菌分子流行病學(xué)研究[J]. 師志云,趙志軍,賈偉,李剛,楊曉燕,張楠,魏軍.  中華醫(yī)院感染學(xué)雜志. 2011(14)
[5]頭孢西丁紙片法檢測MRSA的評價[J]. 王燕,范琳,彭慧平.  中國醫(yī)療前沿. 2011(06)
[6]臨床分離耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的耐藥性及分子流行病學(xué)研究[J]. 趙彩蕓,肖永紅,王珊,李耘,劉健,楊維維,郝鳳蘭.  中國臨床藥理學(xué)雜志. 2011(02)
[7]動物及其制品中的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌[J]. 沈定樹,周雪艷.  中國衛(wèi)生檢驗雜志. 2011(01)
[8]豬源耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的耐藥性及其SCCmec基因分型研究[J]. 王新,黃山,周婷,劉俊寧,楊保偉,席美麗,申進玲,只帥,孟江洪.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2010(12)
[9]耐甲氧西林金黃色葡萄球菌在動物流行病學(xué)中的研究進展[J]. 戴方偉,柯賢福,周莎桑,宋曉明,薩曉嬰.  中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2010(07)
[10]金黃色葡萄球菌耐鹽生長的形態(tài)觀察及機理的初步研究[J]. 陳俊,張惠萍,朱希貴,黎瓊艷,陳培富.  云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2010(04)



本文編號：2980338