野禽H9N2亞型流感病毒遺傳變異分析及疫苗免疫保護(hù)效果評(píng)價(jià)
發(fā)布時(shí)間：2021-01-16 06:54
禽流感（AI）是由禽流感病毒（AIV）引起的多種禽類（野禽和家禽）及鳥(niǎo)類呈現(xiàn)出輕度的呼吸道癥狀或者急性敗血癥特征的疾病。在禽流感的眾多亞型中,世界上主要以H9N2亞型流感為主。該病毒的宿主范圍較廣,主要感染家禽、野禽、人等,其中野禽被作為H9N2AIV的天然儲(chǔ)存庫(kù)。由于H9N2亞型流感病毒屬于低致病性禽流感,野禽感染該病毒后,往往表現(xiàn)出無(wú)癥狀或僅表現(xiàn)出輕微癥狀,但肉眼觀察不到。隨著野鳥(niǎo)的遷徙,把病毒傳遞到不同地區(qū)和不同的動(dòng)物體內(nèi),導(dǎo)致該亞型流感病毒的暴發(fā)。因此對(duì)野禽尤其是野鳥(niǎo)的H9N2亞型流感病毒的監(jiān)控和防治就顯得尤為重要。本研究在2016-2017年間的野禽流感病毒進(jìn)行分子流行病學(xué)調(diào)查,不僅對(duì)分離鑒定的22株H9N2亞型流感病毒進(jìn)行全基因組擴(kuò)增和序列測(cè)定,同時(shí)對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析,了解了H9N2亞型流感病毒在野禽體內(nèi)的遺傳變異規(guī)律;對(duì)其中分離的8株H9N2亞型野禽流感病毒的HA基因進(jìn)行受體親和特性鑒定,分析其受體的結(jié)合特性;同時(shí),選擇現(xiàn)行的兩種商品化H9N2亞型流感滅活疫苗進(jìn)行免疫及攻毒試驗(yàn),了解現(xiàn)行疫苗對(duì)流行毒株的免疫保護(hù)能力,為H9N2亞型流感病毒的防控提供參考依據(jù)。1、在...
【文章來(lái)源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
圖1.1分離株8基因擴(kuò)增結(jié)果
圖1.3 HA氨基酸序列比對(duì)注：藍(lán)色表示潛在糖基化位點(diǎn)；綠色表示裂解位點(diǎn)；紫色表示抗原性位點(diǎn)；紅色下劃線表示主要的受體結(jié)合位點(diǎn)Figure 1.3 Comparison of HA amino acid sequencesNote: Blue indicates potential glycosylation sites; green indicates cleavage sites; purple denotes antigenic sites; Redunderline denotes main receptor binding sites1.4 討論H9N2 亞型流感病毒自發(fā)生以來(lái)就已經(jīng)在世界范圍內(nèi)廣泛流行，不僅給養(yǎng)禽業(yè)帶來(lái)巨大損失，且給人類的健康也帶來(lái)潛在的威脅。我國(guó)獨(dú)特的位置和地理環(huán)境及大量的養(yǎng)殖業(yè)是 H9N2 亞型流感病毒發(fā)生和傳播的首選，而野禽作為 H9N2 亞型流感毒株的天然宿主，對(duì)野禽流感病毒流行病學(xué)調(diào)查及基因分析進(jìn)行研究，為預(yù)防流感的發(fā)生和傳播提供便利條件。近年來(lái)，鞠勇、王海明等人均在各地區(qū)對(duì)野禽的 H9N2 亞型流感病毒進(jìn)行調(diào)查和監(jiān)測(cè)[6,22]。本研究對(duì) 2016-2017 年間采集到的野禽糞便及棉拭子進(jìn)行了流感病毒的分離鑒定，結(jié)果表明，從樣品中分離的禽流感病毒主要是以 H9N2 亞型為主，分離率為 2.18 %，與蔣文明等[7]在 2015-2016 年鄱陽(yáng)湖和青海湖分離的陽(yáng)性率相比較高，這可能由于調(diào)查的時(shí)間、地區(qū)、環(huán)境等的不同導(dǎo)致的。從分離信息中，可以看出野鴨中得到的 H9N2 亞型流感病毒
受體結(jié)合位點(diǎn)分析的受體結(jié)合特性與其受體結(jié)合位點(diǎn)（RBS）密切相關(guān)。0-loop 和 190-helix 3 個(gè)結(jié)構(gòu)域組成，這 3 個(gè)結(jié)構(gòu)域的氨通過(guò) H9N2 亞型流感病毒的 HA 氨基酸序列比對(duì)結(jié)果表明其他位點(diǎn)相對(duì)比較保守。本實(shí)驗(yàn)測(cè)定的 H9N2 亞型流感病有 98、134、136、153、183、190、194、195、226 和 酸依次為 G、V、Y、W、N、V、L、Y 和 G，且有 3 株 5 株病毒 HA 基因的 226 位為 Q，具體情況見(jiàn)表 2-2。圖2.1 HA基因擴(kuò)增結(jié)果Fig. 2.1 PCR results of HA genesM：DL2000Marker；1：W94；2：M10-5；3：G10；4：M10-4；5：J146：M10-1；7：M171；8：G6；9：陰性對(duì)照M1：DL2000Marker；1：W94；2：M10-5；3：G10；4：M10-4；5：J16：M10-1；7：M171；8：G6；9：Negative control
本文編號(hào)：2980363
【文章來(lái)源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
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【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
圖1.1分離株8基因擴(kuò)增結(jié)果
圖1.3 HA氨基酸序列比對(duì)注：藍(lán)色表示潛在糖基化位點(diǎn)；綠色表示裂解位點(diǎn)；紫色表示抗原性位點(diǎn)；紅色下劃線表示主要的受體結(jié)合位點(diǎn)Figure 1.3 Comparison of HA amino acid sequencesNote: Blue indicates potential glycosylation sites; green indicates cleavage sites; purple denotes antigenic sites; Redunderline denotes main receptor binding sites1.4 討論H9N2 亞型流感病毒自發(fā)生以來(lái)就已經(jīng)在世界范圍內(nèi)廣泛流行，不僅給養(yǎng)禽業(yè)帶來(lái)巨大損失，且給人類的健康也帶來(lái)潛在的威脅。我國(guó)獨(dú)特的位置和地理環(huán)境及大量的養(yǎng)殖業(yè)是 H9N2 亞型流感病毒發(fā)生和傳播的首選，而野禽作為 H9N2 亞型流感毒株的天然宿主，對(duì)野禽流感病毒流行病學(xué)調(diào)查及基因分析進(jìn)行研究，為預(yù)防流感的發(fā)生和傳播提供便利條件。近年來(lái)，鞠勇、王海明等人均在各地區(qū)對(duì)野禽的 H9N2 亞型流感病毒進(jìn)行調(diào)查和監(jiān)測(cè)[6,22]。本研究對(duì) 2016-2017 年間采集到的野禽糞便及棉拭子進(jìn)行了流感病毒的分離鑒定，結(jié)果表明，從樣品中分離的禽流感病毒主要是以 H9N2 亞型為主，分離率為 2.18 %，與蔣文明等[7]在 2015-2016 年鄱陽(yáng)湖和青海湖分離的陽(yáng)性率相比較高，這可能由于調(diào)查的時(shí)間、地區(qū)、環(huán)境等的不同導(dǎo)致的。從分離信息中，可以看出野鴨中得到的 H9N2 亞型流感病毒
受體結(jié)合位點(diǎn)分析的受體結(jié)合特性與其受體結(jié)合位點(diǎn)（RBS）密切相關(guān)。0-loop 和 190-helix 3 個(gè)結(jié)構(gòu)域組成，這 3 個(gè)結(jié)構(gòu)域的氨通過(guò) H9N2 亞型流感病毒的 HA 氨基酸序列比對(duì)結(jié)果表明其他位點(diǎn)相對(duì)比較保守。本實(shí)驗(yàn)測(cè)定的 H9N2 亞型流感病有 98、134、136、153、183、190、194、195、226 和 酸依次為 G、V、Y、W、N、V、L、Y 和 G，且有 3 株 5 株病毒 HA 基因的 226 位為 Q，具體情況見(jiàn)表 2-2。圖2.1 HA基因擴(kuò)增結(jié)果Fig. 2.1 PCR results of HA genesM：DL2000Marker；1：W94；2：M10-5；3：G10；4：M10-4；5：J146：M10-1；7：M171；8：G6；9：陰性對(duì)照M1：DL2000Marker；1：W94；2：M10-5；3：G10；4：M10-4；5：J16：M10-1；7：M171；8：G6；9：Negative control
本文編號(hào)：2980363
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