氟喹諾酮（fluoroquinolones, FQs）是第三代喹諾酮類藥物，也是近20年來發(fā)展最快、研究最多的一類化學合成的抗生素，因其具有抗菌譜廣、低毒、高效等特點,而廣泛應用于人類臨床與畜牧漁養(yǎng)殖業(yè)中。FQs類抗菌藥為人獸共用藥，動物體內藥物殘留通過食物鏈進入人體,對人類健康直接產生危害,可以導致細菌耐藥性產生，并誘導癌變。因此，世界各國對FQs類抗菌藥在動物源性食品中的殘留制定了最高殘留限量標準（10-1900μg/Kg）。由于FQs藥物種類繁多，建立該類藥物多殘留檢測方法有利于高效、快速的控制動物性產品質量安全，因此FQs藥物多殘留檢測方法是目前的研究熱點和趨勢�；诖�，本研究經(jīng)過大量的試驗，研制成功了FQs多殘留檢測試劑盒和膠體金免疫試紙。在分析FQs類藥物分子結構和免疫原性基礎上，采用二環(huán)己碳二亞胺（DCC）法將Nor（因Nor的結構是多種FQs類藥物的母核結構）分別與牛血清白蛋白（BSA）和卵清白蛋白（OVA）進行連接制備免疫抗原（Nor-BSA）和包被抗原（Nor-OVA）。并利用紫外掃描、SDS-PAGE電泳及動物免疫等方法進行鑒定。結果表明，動物免疫產生的多抗血清能... 

【文章來源】：河南農業(yè)大學河南省

【文章頁數(shù)】：104 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

氟喹諾酮藥物的結構分類萘啶酸類吡啶酸類喹啉酸類氟嗪酸類

圖 1-2. Nor、BSA、Nor-BSA 紫外掃描圖譜 1-2 UV scanning spectrum of Nor, BSA, Nor-描曲線變化可以看出，BSA 在 250‐300nm 之0‐360nm 之間有兩個吸收峰。偶聯(lián)使紫外吸聯(lián)后產物最大吸收峰稍微左移，說明經(jīng)過偶 果凝膠電泳結果如圖 1‐3。左邊的 Marker 標準 97.4KD，66.4KD，43.0KD，31.0K，20.0 K，水平線上，比 66.4KD 標準蛋白條帶稍微滯蛋白條帶平齊，處于同一水平線上。由圖中比 BSA 的大，可以說明偶聯(lián)成功。 測定結果馬斯亮藍法測定的結果見表 1‐1。從表 1‐1

1：Nor-BSA，2：Nor-BSA，3：BSA圖 1-3 Nor-BSA 凝膠電泳圖Fig. 1-3 SDS-PAGE electrophoresis of Nor-BSA可以看出，被兩個不同的 Nor‐BSA 劑量免疫的 6 只上，其中 10μg 劑量組的第一號小鼠的多抗血清效價劑量對抗體產生的免疫效果無必然的聯(lián)系。 表 1-2 多抗血清效價Tab.1-2 The titer of polyclonal antiserum1 2 3 4 2.683 2.451 2.262 2.474 2.42 2.2 2.028 2.356 2.205 1.753 1.667 1.477 1.963 1.417 1.371 1.202 1.549 0.797 0.811 0.903 1.004 0.46 0.431 0.492

【參考文獻】：
期刊論文
[1]氟喹諾酮類藥物殘留多元快速檢測試紙條的研制[J]. 魏東,劉英.  核農學報. 2012(09)
[2]新霉素阻斷ELISA試劑盒的研制與應用[J]. 王愛萍,李發(fā)弟,胡驍飛,曾巧英,李金錄,郭艷麗,趙啟法,陳玉梅,范璐.  畜牧獸醫(yī)學報. 2011(06)
[3]新霉素免疫膜層析檢測方法研究[J]. 王愛萍,李發(fā)弟,胡驍飛,史兆國,周景明,杜曉明,王林林,禹樂樂,劉明陽.  中國農業(yè)科學. 2011(11)
[4]赭曲霉毒素A人工抗原的合成與鑒定[J]. 孫亞寧,胡驍飛,鄧瑞廣,職愛民,劉慶堂,柴書軍,王磊,宋幸輝,侯玉澤,張改平.  食品工業(yè)科技. 2011(05)
[5]喹諾酮類藥的藥理作用及其臨床上的合理應用[J]. 田仲新.  中國當代醫(yī)藥. 2011(06)
[6]二氟沙星殘留檢測直接競爭ELISA方法的建立[J]. 李彬彬,鄧瑞廣,侯玉澤,張改平,趙東,劉慶堂,柴書軍,王自良.  農業(yè)生物技術學報. 2009(03)
[7]離子對HPLC同時測定5種氟喹諾酮類藥物[J]. 史志華,趙永新,歐陽素英.  中國現(xiàn)代應用藥學. 2009(02)
[8]HPLC法對魚肉中3種四環(huán)素類和5種氟喹諾酮類獸藥殘留的同時測定[J]. 陳輝華,戴軍,王洪新,陳尚衛(wèi),朱松,鈕偉民.  分析測試學報. 2008(09)
[9]氟喹諾酮類藥物中樞神經(jīng)系統(tǒng)不良反應及其防治[J]. 高偉波,朱繼紅.  疑難病雜志. 2008(08)
[10]高效毛細管電泳同時測定4種氟喹諾酮類抗菌藥[J]. 王艷紅,檀華蓉,祁克宗,司雄元.  中國獸藥雜志. 2007(11)

博士論文
[1]恩諾沙星殘留免疫學快速檢測技術研究[D]. 趙銀麗.西北農林科技大學 2009
[2]鏈霉素殘留免疫學快速檢測技術研究[D]. 范國英.西北農林科技大學 2007
[3]氟喹諾酮類抗菌藥物不良反應的流行病學及中樞神經(jīng)毒性研究[D]. 張莉蓉.復旦大學 2003

碩士論文
[1]環(huán)丙沙星單克隆抗體的制備及其ELISA檢測方法的建立[D]. 黃斌.浙江大學 2008
[2]動物源性食品中磺胺和氟喹諾酮類獸藥殘留分析方法研究[D]. 姜寧.河北大學 2007
[3]氧氟沙星與二氟沙星的抗體制備及ELISA方法建立[D]. 潘孝成.安徽農業(yè)大學 2006
[4]分泌抗鏈霉素單克隆抗體雜交瘤細胞株的建立及其初步應用[D]. 楊智洪.河南農業(yè)大學 2005



本文編號：2978723