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中藥復方和益生素對熱應激大鼠血液指標和腸道菌群的影響

發(fā)布時間:2017-04-10 17:38

  本文關鍵詞:中藥復方和益生素對熱應激大鼠血液指標和腸道菌群的影響,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:本試驗主要研究中藥復方和益生素對熱應激大鼠腸道菌群結構與多樣性的影響。旨在探討大鼠熱應激與腸道菌群變化的關系,進而為中藥復方和益生素干預熱應激的作用機制提供理論依據(jù)。實驗大鼠80只隨機分成四組,每組20只,分別為中藥組、益生素組、熱應激組和適溫組。中藥組在熱應激下按7mg/kg·BW大鼠重量灌服復方口服液,益生素組在熱應激下灌服與中藥組等體積的0.04%益生素。在熱應激后3h、1d、3d、7d進行采血,測定大鼠直腸溫度、外周血白細胞濃度、血液生化指標、血清皮質(zhì)醇濃度和HSP70含量,觀察小腸黏膜形態(tài),并采其盲腸內(nèi)容物,通過提取基因組總DNA、構建測序文庫、Illumina MiSeq測序,得出高質(zhì)量測序數(shù)據(jù),進行生物信息學分析中藥復方和益生素對動物熱應激下腸道菌群結構與多樣性的變化。試驗結果如下:熱應激各時間段,中藥組、益生素組和適溫組大鼠的直腸溫度顯著低于熱應激組(P0.05);試驗在3h、1d、7d時,中藥組、益生素組和適溫組大鼠白細胞濃度均顯著低于熱應激組(P0.05);熱應激3h,中藥組和益生素組ALB含量顯著高于熱應激組(P0.05),熱應激組ALT和AST含量與適溫組相比極顯著升高(P0.01),中藥組和益生素組的大鼠血糖含量均分別與熱應激組和適溫組相比極顯著降低(P0.01);熱應激7d,中藥組、益生素組和適溫組TP和ALB含量極顯著高于熱應激組(P0.01),且ALT、AST含量均極顯著低于熱應激組(P0.01),與熱應激組相比,中藥組、益生素組和適溫組血糖濃度極顯著下降(P0.01)。中藥組十二指腸部分腸絨毛上皮細胞變性,脫落;空腸和回腸無明顯病變。益生素組和適溫組小腸各段無明顯組織學變化。熱應激組十二指腸部分腸絨毛嚴重變性,脫落;空腸腸絨毛上皮細胞變性,部分腸絨毛斷裂,脫落;回腸基底層部分腸絨毛斷裂,脫落。試驗在第1d、3d、7d,中藥組、益生素組和適溫組血清皮質(zhì)醇濃度顯著(P0.05)和極顯著低于熱應激組的血清皮質(zhì)醇濃度(P0.01);在試驗3h和3d,中藥組、益生素組和適溫組血清HSP70濃度均極顯著低于熱應激組(P0.01)。中藥組和益生素組腸道菌群Chao1指數(shù)和Shannon指數(shù)顯著高于熱應激組(P0.05),熱應激組Chao1指數(shù)和PD_whole_tree指數(shù)顯著低于適溫組(P0.05);PCA和PCoA的分析顯示,中藥組、益生素組和熱應激組的腸道菌群開始出現(xiàn)差異性,呈分開趨勢,熱應激7d,適溫組與其余三個組的散點、熱應激組與其余三個組散點,還有適溫組與熱應激組散點完全分開,而中藥組與益生素組的散點基本交疊。熱應激下腸道微生物一些優(yōu)勢菌屬發(fā)生了變化,厚壁菌和擬桿菌的菌屬相對減少(P0.05),乳酸菌屬極顯著減少(P0.01),梭菌屬增加,中藥組擬桿菌屬和益生素組的乳酸菌屬與熱應激組相比顯著升高(P0.05)。功能基因的KEGG統(tǒng)計分析可知,熱應激組在糖代謝、氨基酸代謝和膜轉(zhuǎn)運的基因表達活躍,中藥組、益生素組和適溫組各生物途徑相似,且中藥組生物路徑上的基因活動最低,益生素組的生物路徑與適溫組接近。
【關鍵詞】:熱應激 中藥復方 益生素 血液指標 腸道菌群
【學位授予單位】:華南農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:S816
【目錄】:
  • 摘要3-5
  • Abstract5-11
  • 1 前言11-16
  • 1.1 熱應激損傷11-12
  • 1.1.1 熱應激與溫熱病11
  • 1.1.2 熱應激對機體腸道的損傷11-12
  • 1.2 腸道菌群與應激的關系12-13
  • 1.2.1 腸道菌群生理作用12-13
  • 1.2.2 熱應激狀態(tài)對畜禽腸道菌群的影響13
  • 1.3 中藥對腸道菌群的作用13-15
  • 1.3.1 中藥對腸道菌群的調(diào)節(jié)作用14
  • 1.3.2 腸道菌群對中藥的代謝作用14-15
  • 1.3.3 中藥對腸道菌群調(diào)節(jié)作用的研究方法15
  • 1.4 研究的主要內(nèi)容和意義15-16
  • 2 材料與方法16-23
  • 2.1 材料16-17
  • 2.1.1 試驗動物16
  • 2.1.2 主要儀器和設備16-17
  • 2.1.3 試驗藥品與試劑17
  • 2.2 方法17-18
  • 2.2.1 試驗分組及處理17-18
  • 2.2.2 中藥復方制備18
  • 2.2.3 樣品采集與保存18
  • 2.3 測定指標及檢測方法18-23
  • 2.3.1 直腸溫度、血液生化與外周血白細胞的檢測18-19
  • 2.3.2 血清皮質(zhì)醇濃度的檢測19
  • 2.3.3 血清HSP70濃度的檢測19
  • 2.3.4 小腸組織石蠟切片的形態(tài)觀察和測定方法19
  • 2.3.5 盲腸腸道菌群多樣性檢測19-21
  • 2.3.6 16s rDNA測序流程21
  • 2.3.7 生物信息學處理及統(tǒng)計、分析方法、分析流程21-23
  • 3 結果與分析23-45
  • 3.1 大鼠直腸溫度的變化23-24
  • 3.2 大鼠外周血白細胞濃度的變化24-25
  • 3.3 大鼠血液生化指標的影響25-26
  • 3.4 大鼠小腸的組織形態(tài)學變化26-29
  • 3.5 大鼠血清皮質(zhì)醇濃度的變化29
  • 3.6 大鼠血清HSP70濃度的變化29-30
  • 3.7 大鼠盲腸腸道菌群序列及多樣性分析30-39
  • 3.7.1 總DNA質(zhì)檢結果及OTU數(shù)目30-32
  • 3.7.2 Alpha多樣性分析32-35
  • 3.7.3 Beta多樣性分析35-39
  • 3.8 物種豐度統(tǒng)計及群落組成分析39-44
  • 3.8.1 門水平上的物種豐度差異39-41
  • 3.8.2 屬水平上的物種豐度差異41-44
  • 3.9 KEGG群落功能預測注釋44-45
  • 4 討論45-52
  • 4.1 大鼠直腸溫度和血液指標的變化45-47
  • 4.2 大鼠小腸的組織形態(tài)學變化47-48
  • 4.3 大鼠血清皮質(zhì)醇水平變化48
  • 4.4 大鼠血清HSP70水平變化48-49
  • 4.5 大鼠腸道菌群的影響49-52
  • 5 結論52-53
  • 致謝53-54
  • 參考文獻54-63
  • 附錄63

【參考文獻】

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本文編號:297225

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