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中藥復(fù)方和益生素對熱應(yīng)激大鼠血液指標(biāo)和腸道菌群的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-04-10 17:38

  本文關(guān)鍵詞:中藥復(fù)方和益生素對熱應(yīng)激大鼠血液指標(biāo)和腸道菌群的影響,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:本試驗(yàn)主要研究中藥復(fù)方和益生素對熱應(yīng)激大鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)與多樣性的影響。旨在探討大鼠熱應(yīng)激與腸道菌群變化的關(guān)系,進(jìn)而為中藥復(fù)方和益生素干預(yù)熱應(yīng)激的作用機(jī)制提供理論依據(jù)。實(shí)驗(yàn)大鼠80只隨機(jī)分成四組,每組20只,分別為中藥組、益生素組、熱應(yīng)激組和適溫組。中藥組在熱應(yīng)激下按7mg/kg·BW大鼠重量灌服復(fù)方口服液,益生素組在熱應(yīng)激下灌服與中藥組等體積的0.04%益生素。在熱應(yīng)激后3h、1d、3d、7d進(jìn)行采血,測定大鼠直腸溫度、外周血白細(xì)胞濃度、血液生化指標(biāo)、血清皮質(zhì)醇濃度和HSP70含量,觀察小腸黏膜形態(tài),并采其盲腸內(nèi)容物,通過提取基因組總DNA、構(gòu)建測序文庫、Illumina MiSeq測序,得出高質(zhì)量測序數(shù)據(jù),進(jìn)行生物信息學(xué)分析中藥復(fù)方和益生素對動物熱應(yīng)激下腸道菌群結(jié)構(gòu)與多樣性的變化。試驗(yàn)結(jié)果如下:熱應(yīng)激各時(shí)間段,中藥組、益生素組和適溫組大鼠的直腸溫度顯著低于熱應(yīng)激組(P0.05);試驗(yàn)在3h、1d、7d時(shí),中藥組、益生素組和適溫組大鼠白細(xì)胞濃度均顯著低于熱應(yīng)激組(P0.05);熱應(yīng)激3h,中藥組和益生素組ALB含量顯著高于熱應(yīng)激組(P0.05),熱應(yīng)激組ALT和AST含量與適溫組相比極顯著升高(P0.01),中藥組和益生素組的大鼠血糖含量均分別與熱應(yīng)激組和適溫組相比極顯著降低(P0.01);熱應(yīng)激7d,中藥組、益生素組和適溫組TP和ALB含量極顯著高于熱應(yīng)激組(P0.01),且ALT、AST含量均極顯著低于熱應(yīng)激組(P0.01),與熱應(yīng)激組相比,中藥組、益生素組和適溫組血糖濃度極顯著下降(P0.01)。中藥組十二指腸部分腸絨毛上皮細(xì)胞變性,脫落;空腸和回腸無明顯病變。益生素組和適溫組小腸各段無明顯組織學(xué)變化。熱應(yīng)激組十二指腸部分腸絨毛嚴(yán)重變性,脫落;空腸腸絨毛上皮細(xì)胞變性,部分腸絨毛斷裂,脫落;回腸基底層部分腸絨毛斷裂,脫落。試驗(yàn)在第1d、3d、7d,中藥組、益生素組和適溫組血清皮質(zhì)醇濃度顯著(P0.05)和極顯著低于熱應(yīng)激組的血清皮質(zhì)醇濃度(P0.01);在試驗(yàn)3h和3d,中藥組、益生素組和適溫組血清HSP70濃度均極顯著低于熱應(yīng)激組(P0.01)。中藥組和益生素組腸道菌群Chao1指數(shù)和Shannon指數(shù)顯著高于熱應(yīng)激組(P0.05),熱應(yīng)激組Chao1指數(shù)和PD_whole_tree指數(shù)顯著低于適溫組(P0.05);PCA和PCoA的分析顯示,中藥組、益生素組和熱應(yīng)激組的腸道菌群開始出現(xiàn)差異性,呈分開趨勢,熱應(yīng)激7d,適溫組與其余三個(gè)組的散點(diǎn)、熱應(yīng)激組與其余三個(gè)組散點(diǎn),還有適溫組與熱應(yīng)激組散點(diǎn)完全分開,而中藥組與益生素組的散點(diǎn)基本交疊。熱應(yīng)激下腸道微生物一些優(yōu)勢菌屬發(fā)生了變化,厚壁菌和擬桿菌的菌屬相對減少(P0.05),乳酸菌屬極顯著減少(P0.01),梭菌屬增加,中藥組擬桿菌屬和益生素組的乳酸菌屬與熱應(yīng)激組相比顯著升高(P0.05)。功能基因的KEGG統(tǒng)計(jì)分析可知,熱應(yīng)激組在糖代謝、氨基酸代謝和膜轉(zhuǎn)運(yùn)的基因表達(dá)活躍,中藥組、益生素組和適溫組各生物途徑相似,且中藥組生物路徑上的基因活動最低,益生素組的生物路徑與適溫組接近。
【關(guān)鍵詞】:熱應(yīng)激 中藥復(fù)方 益生素 血液指標(biāo) 腸道菌群
【學(xué)位授予單位】:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:S816
【目錄】:
  • 摘要3-5
  • Abstract5-11
  • 1 前言11-16
  • 1.1 熱應(yīng)激損傷11-12
  • 1.1.1 熱應(yīng)激與溫?zé)岵?/span>11
  • 1.1.2 熱應(yīng)激對機(jī)體腸道的損傷11-12
  • 1.2 腸道菌群與應(yīng)激的關(guān)系12-13
  • 1.2.1 腸道菌群生理作用12-13
  • 1.2.2 熱應(yīng)激狀態(tài)對畜禽腸道菌群的影響13
  • 1.3 中藥對腸道菌群的作用13-15
  • 1.3.1 中藥對腸道菌群的調(diào)節(jié)作用14
  • 1.3.2 腸道菌群對中藥的代謝作用14-15
  • 1.3.3 中藥對腸道菌群調(diào)節(jié)作用的研究方法15
  • 1.4 研究的主要內(nèi)容和意義15-16
  • 2 材料與方法16-23
  • 2.1 材料16-17
  • 2.1.1 試驗(yàn)動物16
  • 2.1.2 主要儀器和設(shè)備16-17
  • 2.1.3 試驗(yàn)藥品與試劑17
  • 2.2 方法17-18
  • 2.2.1 試驗(yàn)分組及處理17-18
  • 2.2.2 中藥復(fù)方制備18
  • 2.2.3 樣品采集與保存18
  • 2.3 測定指標(biāo)及檢測方法18-23
  • 2.3.1 直腸溫度、血液生化與外周血白細(xì)胞的檢測18-19
  • 2.3.2 血清皮質(zhì)醇濃度的檢測19
  • 2.3.3 血清HSP70濃度的檢測19
  • 2.3.4 小腸組織石蠟切片的形態(tài)觀察和測定方法19
  • 2.3.5 盲腸腸道菌群多樣性檢測19-21
  • 2.3.6 16s rDNA測序流程21
  • 2.3.7 生物信息學(xué)處理及統(tǒng)計(jì)、分析方法、分析流程21-23
  • 3 結(jié)果與分析23-45
  • 3.1 大鼠直腸溫度的變化23-24
  • 3.2 大鼠外周血白細(xì)胞濃度的變化24-25
  • 3.3 大鼠血液生化指標(biāo)的影響25-26
  • 3.4 大鼠小腸的組織形態(tài)學(xué)變化26-29
  • 3.5 大鼠血清皮質(zhì)醇濃度的變化29
  • 3.6 大鼠血清HSP70濃度的變化29-30
  • 3.7 大鼠盲腸腸道菌群序列及多樣性分析30-39
  • 3.7.1 總DNA質(zhì)檢結(jié)果及OTU數(shù)目30-32
  • 3.7.2 Alpha多樣性分析32-35
  • 3.7.3 Beta多樣性分析35-39
  • 3.8 物種豐度統(tǒng)計(jì)及群落組成分析39-44
  • 3.8.1 門水平上的物種豐度差異39-41
  • 3.8.2 屬水平上的物種豐度差異41-44
  • 3.9 KEGG群落功能預(yù)測注釋44-45
  • 4 討論45-52
  • 4.1 大鼠直腸溫度和血液指標(biāo)的變化45-47
  • 4.2 大鼠小腸的組織形態(tài)學(xué)變化47-48
  • 4.3 大鼠血清皮質(zhì)醇水平變化48
  • 4.4 大鼠血清HSP70水平變化48-49
  • 4.5 大鼠腸道菌群的影響49-52
  • 5 結(jié)論52-53
  • 致謝53-54
  • 參考文獻(xiàn)54-63
  • 附錄63

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號:297225

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