乳酸菌作為益生菌成員,其活菌以及代謝產(chǎn)物不僅具有抑菌功能,還能夠增強(qiáng)機(jī)體免疫,且不易產(chǎn)生耐藥性,對(duì)人畜無(wú)毒副作用。乳酸菌被確認(rèn)為是健康陰道微生物菌群中的優(yōu)勢(shì)物種,缺乏乳酸菌被認(rèn)為會(huì)破壞陰道微生物菌群平衡,降低免疫屏障功能,繼而引發(fā)各種生殖道炎癥,寄生蟲(chóng)病以及真菌、衣原體的感染等。本研究從健康奶牛陰道內(nèi)分離、純化并篩選出無(wú)芽孢無(wú)莢膜且形體正常、菌體染色呈革蘭氏陽(yáng)性,菌落形態(tài)、菌體特征以及生長(zhǎng)特性具有傳代穩(wěn)定性的、同時(shí)具有益生特性的優(yōu)勢(shì)乳酸菌。在此基礎(chǔ)上,對(duì)其抗菌作用、抗菌成分進(jìn)行了研究,探討了SQ0048對(duì)TLRs介導(dǎo)的MyD88/NF-KB信號(hào)通路的影響。以期為制備治療奶牛陰道炎癥的微生態(tài)制劑提供試驗(yàn)依據(jù)和奠定理論基礎(chǔ)。具體研究?jī)?nèi)容如下:1.為了獲得能夠防治奶牛生殖道炎的益生乳酸菌菌株,采用微生物學(xué)方法,對(duì)50例健康奶牛陰道菌群進(jìn)行了初步分離;分別采用發(fā)酵工程學(xué)技術(shù)、顯微鏡檢查法、革蘭氏染色法及酸度測(cè)定方法,測(cè)定了初步分離乳酸菌的傳代穩(wěn)定性、染色特性、分類及產(chǎn)酸性能;分別采用顯微鏡檢查法、生化鑒定法和分子生物學(xué)方法,對(duì)初步篩選出的8株益生乳酸菌進(jìn)行了形態(tài)學(xué)鑒定、生理生化特性及16srD... 

【文章來(lái)源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：165 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 乳酸菌益生作用及其機(jī)制的研究進(jìn)展
        1.1.1 抑制病原菌作用及其機(jī)制
        1.1.2 抗氧化功能
        1.1.3 免疫調(diào)節(jié)功能
    1.2 乳酸菌在動(dòng)物疾病防治中的研究進(jìn)展
        1.2.1 乳酸菌在豬、雞、犬等疾病防治中的研究進(jìn)展
        1.2.2 乳酸菌在奶牛疾病防治中的研究進(jìn)展
    1.3 乳酸菌與TLR相互作用的研究進(jìn)展
        1.3.1 乳酸菌與TLR2和TLR4相關(guān)研究
        1.3.2 乳酸菌對(duì)TLRs介導(dǎo)的NF-κB信號(hào)途徑的調(diào)節(jié)研究進(jìn)展
        1.3.3 乳酸菌對(duì)TLRs介導(dǎo)的NF-κB信號(hào)途徑相關(guān)細(xì)胞因子的研究進(jìn)展
    1.4 研究目的與意義
2 奶牛陰道乳酸菌的分離鑒定及生物學(xué)特性研究
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)菌株、質(zhì)控菌株
        2.1.2 藥品與試劑
        2.1.3 培養(yǎng)基
        2.1.4 儀器與設(shè)備
        2.1.5 采集地點(diǎn)、采集時(shí)間及試驗(yàn)樣本
    2.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    2.3 研究?jī)?nèi)容與方法
        2.3.1 樣品采集
        2.3.2 乳酸菌菌株的分離與純化
        2.3.3 奶牛陰道內(nèi)優(yōu)勢(shì)乳酸菌的初步篩選
        2.3.4 奶牛陰道內(nèi)優(yōu)勢(shì)乳酸菌菌株的鑒定
        2.3.5 奶牛陰道優(yōu)勢(shì)益生乳酸菌菌株的復(fù)篩研究
    2.4 結(jié)果
        2.4.1 健康奶牛陰道內(nèi)乳酸菌的分離、純化結(jié)果
        2.4.2 健康奶牛陰道內(nèi)乳酸菌的初篩結(jié)果
        2.4.3 奶牛陰道內(nèi)乳酸菌的鑒定結(jié)果
        2.4.4 奶牛陰道益生乳酸菌菌株的復(fù)篩結(jié)果
    2.5 討論
    2.6 小結(jié)
3 分離優(yōu)勢(shì)乳酸菌抗菌成分及其抗菌作用的研究
    3.1 試驗(yàn)材料
        3.1.1 菌種
        3.1.2 藥品與試劑
        3.1.3 培養(yǎng)基
        3.1.4 主要儀器設(shè)備
    3.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    3.3 研究?jī)?nèi)容與方法
        3.3.1 SQ0048及SQ0054菌株抗菌成分抗菌肽的制備
        3.3.2 分離優(yōu)勢(shì)乳酸菌抗菌成分表達(dá)物的檢測(cè)
        3.3.3 SQ0048及SQ0054菌株與其抗菌肽基因表達(dá)物的抗菌活性比較研究
    3.4 試驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1 SQ0048及SQ0054菌株抗菌成分的研究
        3.4.2 抗菌肽基因表達(dá)物的檢測(cè)
        3.4.3 SQ0048及SQ0054菌株與其抗菌肽基因表達(dá)物的抗菌活性比較研究結(jié)果
    3.5 討論
    3.6 小結(jié)
4 SQ0048乳酸菌對(duì)TLRs介導(dǎo)的MyD88-NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響
    4.1 試驗(yàn)材料
        4.1.1 試驗(yàn)用菌種
        4.1.2 陰道組織樣本
        4.1.3 藥品與試劑
        4.1.4 主要儀器設(shè)備
    4.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    4.3 研究?jī)?nèi)容與方法
        4.3.1 奶牛陰道上皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)鑒定
        4.3.2 奶牛陰道上皮細(xì)胞的生物學(xué)特性研究
        4.3.3 SQ0048影響奶牛陰道上皮細(xì)胞IL-1β表達(dá)的量效及時(shí)效關(guān)系測(cè)定
        4.3.4 TLRs-MyD88/NF-κB信號(hào)通路中各抑制劑抑制效應(yīng)的時(shí)效、量效關(guān)系分析
        4.3.5 TLRs-MyD88/NF-κB信號(hào)通路中各種抑制劑及SQ0048菌株對(duì)奶牛陰道上皮細(xì)胞的毒性試驗(yàn)
        4.3.6 SQ0048菌株對(duì)奶牛陰道上皮細(xì)胞中TLRs-MyD88/NF-κB信號(hào)通路的影響
    4.4 試驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 奶牛陰道上皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及純化研究
        4.4.2 奶牛陰道上皮細(xì)胞的鑒定
        4.4.3 奶牛陰道上皮細(xì)胞純度測(cè)定結(jié)果
        4.4.4 奶牛陰道上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)特性研究
        4.4.5 SQ0048菌株影響奶牛陰道上皮細(xì)胞IL-1β表達(dá)的量效及時(shí)效關(guān)系測(cè)定結(jié)果
        4.4.6 TLRs-MyD88/NF-κB信號(hào)通路中各抑制劑抑制效應(yīng)的時(shí)效、量效關(guān)系分析結(jié)果
        4.4.7 SQ0048菌株及各抑制劑對(duì)奶牛陰道上皮細(xì)胞的毒性試驗(yàn)結(jié)果
        4.4.8 SQ0048菌株對(duì)奶牛陰道上皮細(xì)胞中TLRs-MyD88/NF-KB信號(hào)通路的影響結(jié)果
    4.5 討論
    4.6 小結(jié)
5 全文討論
6 全文結(jié)論
7 創(chuàng)新點(diǎn)
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[4]產(chǎn)過(guò)氧化氫酶的乳酸菌的篩選和產(chǎn)酶條件的研究[J]. 唐丹玲,唐文勝.  食品與發(fā)酵工業(yè). 1992(06)



本文編號(hào)：2954108