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抗磺胺二甲基嘧啶單克隆抗體的制備與鑒定

發(fā)布時間:2020-12-31 00:25
  磺胺二甲基嘧啶(Sulfamethazine,SM2),屬于磺胺類藥物中應用相對廣泛的一種,具有氨基苯磺酰胺的特殊結構,它是一種廣譜抗菌藥物,由于其見效快,成本低,易獲得,被廣泛應用于預防和治療動物原蟲病和細菌性疾病。SM2能夠促進動物生長,故常被當作飼料添加劑在動物飼養(yǎng)中長期使用。若不合理使用SM2,易殘留在畜產品中,人食用后危害人體健康。世界各國對相關食品中磺胺類藥物的殘留均做出了相應的規(guī)定,歐盟國家規(guī)定磺胺類藥物殘留總量不得超出100μg/kg,單個藥物不得超過25μg/kg。日本規(guī)定在食品中不得檢出磺胺類藥物。我國農業(yè)部于2002年12月在第235號文件中規(guī)定,在所有動物的脂肪、肌肉、肝臟和腎臟中磺胺類藥物的殘留限量不得超出100μg/kg,并且將磺胺二甲基嘧啶列為獸藥殘留監(jiān)控的重點。目前,用微生物學、儀器和酶聯(lián)免疫等方法來檢測SM2。其中微生物法檢測速率高,但靈敏度低,特殊的選擇性差,儀器檢測方法準備樣品的時候浪費時間、繁瑣、儀器太貴而且需要專業(yè)人員操作才能完成。而酶聯(lián)免疫檢測法靈敏度高、速度快、可批量篩選,無需大型儀器設備,比較適用于大量樣本的初次篩選。本實驗用重氮化法合成... 

【文章來源】:天津農學院天津市

【文章頁數】:48 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

抗磺胺二甲基嘧啶單克隆抗體的制備與鑒定


SM2與BSA偶聯(lián)物的紫外掃描鑒定Fig2-1UltravioletscanningforconjugatebetweenSM2andBSA注:圖中A為SM2,B為BSA,C為SM2-BSA

合成抗原,完全抗原,抗體蛋白,免疫分析


圖 2-2 SDS-PAGE 檢測抗原偶聯(lián)物結果g 2-2 SDS-PAGE detection of antigen conjugate 1 為偶聯(lián)物,泳道 2 為 BSA。合成抗原 SM2-BSA 的條帶與載體蛋白本實驗結果與紫外光譜掃描結果吻合,子量為 250.28,不具備誘導機體產生抗體蛋白偶聯(lián)成人工完全抗原,才能誘導,是制備出特異性和靈敏度高的抗 SM免疫分析檢測的重要環(huán)節(jié)。

小鼠,血清效價,天津農學院,包被抗原


天津農學院專業(yè)碩士學位論文進行免疫,SM2-BSA 作為包被抗原,通過間接非競爭 ELISA 檢測四血清效價,對 4 只小鼠進行間接非競爭 ELISA 檢測,結果顯示四只價均達到了 1:20w,其中 Mice 1 的血清效價最高為 1:819200。表明 4 以用于細胞融合。

【參考文獻】:
期刊論文
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本文編號:2948582

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