呋喃唑酮作為一種廣譜抗生素被廣泛地用于治療大腸埃希菌和沙門(mén)氏菌屬引起的胃腸道感染,并作為牛,豬和家禽的生長(zhǎng)促進(jìn)劑。然而,有研究表明該藥物的代謝物對(duì)人體有潛在的致癌、致畸和致突變等副作用。歐盟,美國(guó),中國(guó)等已經(jīng)先后禁止此類(lèi)藥物的使用。但是由于這種藥物抗菌譜廣,價(jià)格低廉,仍經(jīng)常被不法分子濫用。因此,建立一種靈敏度高的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)方法來(lái)監(jiān)測(cè)這種現(xiàn)象具有很重要的現(xiàn)實(shí)意義。呋喃唑酮半衰期短,在動(dòng)物體內(nèi)排泄快速,而其代謝產(chǎn)物3-氨基-2-惡唑酮（AOZ）卻可以與動(dòng)物組織中蛋白質(zhì)緊密結(jié)合而長(zhǎng)期存在于機(jī)體內(nèi),因此通過(guò)檢測(cè)AOZ來(lái)監(jiān)測(cè)其原藥的濫用。為檢測(cè)不同食品體系中AOZ的殘留,本研究以其衍生物CPAOZ為目標(biāo)物,構(gòu)建了三種免疫層析快速檢測(cè)方法,實(shí)現(xiàn)了多種食品樣品中AOZ的高靈敏檢測(cè)。本論文的研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:（1）抗CPAOZ單克隆抗體的制備及性能鑒定:采用對(duì)小鼠腹腔注射的方法制備抗CPAOZ單克隆抗體腹水,純化可得抗CPAOZ單克隆抗體,結(jié)果表明抗體純度高,效價(jià)為1:128000,與抗原親和力強(qiáng),IC₅₀為2 ng·mL^-1,靈敏度高。（2）基于納米金... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

納米金免疫層析試紙條檢測(cè)呋喃唑酮代謝物結(jié)果示意圖（Xieetal.2017）

圖 1-3 多壁碳納米管免疫層析試紙條檢測(cè) Hg2+示意圖（Yao et al. 2016）1-3 The schematic diagram of the MWCNTs based lateral flow strip biosensor for mercdetection (Yao et al. 2016) 量子點(diǎn)子點(diǎn)（Quantum dots，QDs）是一種粒徑一般小于 10 nm 的熒光半導(dǎo)體，因其具有發(fā)射光譜窄，激發(fā)范圍寬和熒光量子產(chǎn)率高等優(yōu)勢(shì)，已成為中理想的熒光標(biāo)記材料。Savin 等（2018）描述了用于檢測(cè)人心臟脂肪hFABP）的新型免疫層析試紙條的制備和驗(yàn)證。選擇水溶性 CdTe 量子記并與抗 hFABP 抗體共價(jià)連接。將標(biāo)記的抗體轉(zhuǎn)移至免疫層析試紙條原-抗體反應(yīng)，為人血清中 hFABP 的定量提供了一種快速的方法，范圍1，與基于免疫層析試紙條的其它檢測(cè)方法相比檢測(cè)限低得多，為 221 n et al. 2018）。Berlina 等（2013）開(kāi)發(fā)了一種用于檢測(cè)牛奶中氯霉素（快速（20 min）熒光免疫層析試紙條。熒光標(biāo)記材料為具有 625nm 發(fā)射子點(diǎn)。檢測(cè)過(guò)程中用磷酸鹽緩沖液將牛奶樣品稀釋 20%以消除基質(zhì)效應(yīng)

圖 1-4 以量子點(diǎn)作為標(biāo)記物的免疫層析試紙條檢測(cè)示意圖（Le et al. 2016）Fig. 1-4 Schematic diagram of the QD based lateral flow immunoassay (Le et al. 2016) 上轉(zhuǎn)換熒光納米材料轉(zhuǎn)換熒光納米材料（Up-converting phosphor nanoparticles, UCPs）是最近低能紅外光照射時(shí)可發(fā)出高能量可見(jiàn)光或紫外光的熒光發(fā)光探針（Van 001）。UCPs 由于具有高化學(xué)穩(wěn)定性，窄帶寬，可調(diào)諧發(fā)光顏色，高光胞毒性等特性，最近引起了相當(dāng)多的關(guān)注（Tu et al. 2014; Wang et al. 2 UCPs 具有相當(dāng)長(zhǎng)的熒光壽命（高達(dá)毫秒級(jí)），可以降低背景自發(fā)熒光，從而將檢測(cè)限降低一個(gè)或兩個(gè)數(shù)量級(jí)（Zhao et al. 2014）。Niedbala 等用 UCP 作為免疫層析試紙條的標(biāo)記物（Niedbala et al. 2000）。之后了廣泛應(yīng)用。Lei 等（2017）利用 UCPs 作為標(biāo)記材料檢測(cè)中性粒細(xì)胞運(yùn)載蛋白，檢測(cè)限為 7.68 ng·mL-1，與 ELISA 檢測(cè)結(jié)果保持高度一致（。檢測(cè)原理及過(guò)程如圖 1-5 所示。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]蜂蜜中硝基呋喃代謝物的超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定法[J]. 高洋洋,劉鑫,陳廣全.  職業(yè)與健康. 2018(13)
[2]呋喃唑酮代謝物單克隆抗體和膠體金免疫層析試紙條的研制[J]. 李春生,劉靜靜,杜順豐,武孝麗,曹秀梅,吳萌,張娜.  現(xiàn)代食品科技. 2017(06)
[3]呋喃唑酮代謝物間接競(jìng)爭(zhēng)化學(xué)發(fā)光酶免疫法的建立[J]. 黃登宇,高文靜,黃種乾,高麗霞,馮敏,楊秀松.  食品工業(yè)科技. 2017(09)
[4]高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定水產(chǎn)品中4種硝基呋喃原藥殘留[J]. 黃宣運(yùn),李冰,蔡友瓊,黃冬梅,史永富,于慧娟.  分析試驗(yàn)室. 2013(02)

博士論文
[1]黃曲霉毒素雜交瘤細(xì)胞株的選育及免疫層析檢測(cè)技術(shù)研究[D]. 張道宏.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2011

碩士論文
[1]牛奶中呋喃唑酮的免疫層析快速檢測(cè)方法研究[D]. 閆靈芝.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018



本文編號(hào)：2942019