食品中呋喃唑酮的免疫層析試紙條快速檢測方法研究
發(fā)布時間：2020-12-27 15:44
呋喃唑酮作為一種廣譜抗生素被廣泛地用于治療大腸埃希菌和沙門氏菌屬引起的胃腸道感染,并作為牛,豬和家禽的生長促進劑。然而,有研究表明該藥物的代謝物對人體有潛在的致癌、致畸和致突變等副作用。歐盟,美國,中國等已經先后禁止此類藥物的使用。但是由于這種藥物抗菌譜廣,價格低廉,仍經常被不法分子濫用。因此,建立一種靈敏度高的現場快速檢測方法來監(jiān)測這種現象具有很重要的現實意義。呋喃唑酮半衰期短,在動物體內排泄快速,而其代謝產物3-氨基-2-惡唑酮（AOZ）卻可以與動物組織中蛋白質緊密結合而長期存在于機體內,因此通過檢測AOZ來監(jiān)測其原藥的濫用。為檢測不同食品體系中AOZ的殘留,本研究以其衍生物CPAOZ為目標物,構建了三種免疫層析快速檢測方法,實現了多種食品樣品中AOZ的高靈敏檢測。本論文的研究內容及結果如下:（1）抗CPAOZ單克隆抗體的制備及性能鑒定:采用對小鼠腹腔注射的方法制備抗CPAOZ單克隆抗體腹水,純化可得抗CPAOZ單克隆抗體,結果表明抗體純度高,效價為1:128000,與抗原親和力強,IC50為2 ng·mL-1,靈敏度高。（2）基于納米金...
【文章來源】：西北農林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數】：77 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
納米金免疫層析試紙條檢測呋喃唑酮代謝物結果示意圖（Xieetal.2017）
圖 1-3 多壁碳納米管免疫層析試紙條檢測 Hg2+示意圖（Yao et al. 2016）1-3 The schematic diagram of the MWCNTs based lateral flow strip biosensor for mercdetection (Yao et al. 2016) 量子點子點（Quantum dots，QDs）是一種粒徑一般小于 10 nm 的熒光半導體，因其具有發(fā)射光譜窄，激發(fā)范圍寬和熒光量子產率高等優(yōu)勢，已成為中理想的熒光標記材料。Savin 等（2018）描述了用于檢測人心臟脂肪hFABP）的新型免疫層析試紙條的制備和驗證。選擇水溶性 CdTe 量子記并與抗 hFABP 抗體共價連接。將標記的抗體轉移至免疫層析試紙條原-抗體反應，為人血清中 hFABP 的定量提供了一種快速的方法，范圍1，與基于免疫層析試紙條的其它檢測方法相比檢測限低得多，為 221 n et al. 2018）。Berlina 等（2013）開發(fā)了一種用于檢測牛奶中氯霉素（快速（20 min）熒光免疫層析試紙條。熒光標記材料為具有 625nm 發(fā)射子點。檢測過程中用磷酸鹽緩沖液將牛奶樣品稀釋 20%以消除基質效應
圖 1-4 以量子點作為標記物的免疫層析試紙條檢測示意圖（Le et al. 2016）Fig. 1-4 Schematic diagram of the QD based lateral flow immunoassay (Le et al. 2016) 上轉換熒光納米材料轉換熒光納米材料（Up-converting phosphor nanoparticles, UCPs）是最近低能紅外光照射時可發(fā)出高能量可見光或紫外光的熒光發(fā)光探針（Van 001）。UCPs 由于具有高化學穩(wěn)定性，窄帶寬，可調諧發(fā)光顏色，高光胞毒性等特性，最近引起了相當多的關注（Tu et al. 2014; Wang et al. 2 UCPs 具有相當長的熒光壽命（高達毫秒級），可以降低背景自發(fā)熒光，從而將檢測限降低一個或兩個數量級（Zhao et al. 2014）。Niedbala 等用 UCP 作為免疫層析試紙條的標記物（Niedbala et al. 2000）。之后了廣泛應用。Lei 等（2017）利用 UCPs 作為標記材料檢測中性粒細胞運載蛋白，檢測限為 7.68 ng·mL-1，與 ELISA 檢測結果保持高度一致（。檢測原理及過程如圖 1-5 所示。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]蜂蜜中硝基呋喃代謝物的超高效液相色譜-串聯質譜測定法[J]. 高洋洋,劉鑫,陳廣全. 職業(yè)與健康. 2018(13)
[2]呋喃唑酮代謝物單克隆抗體和膠體金免疫層析試紙條的研制[J]. 李春生,劉靜靜,杜順豐,武孝麗,曹秀梅,吳萌,張娜. 現代食品科技. 2017(06)
[3]呋喃唑酮代謝物間接競爭化學發(fā)光酶免疫法的建立[J]. 黃登宇,高文靜,黃種乾,高麗霞,馮敏,楊秀松. 食品工業(yè)科技. 2017(09)
[4]高效液相色譜法同時測定水產品中4種硝基呋喃原藥殘留[J]. 黃宣運,李冰,蔡友瓊,黃冬梅,史永富,于慧娟. 分析試驗室. 2013(02)
博士論文
[1]黃曲霉毒素雜交瘤細胞株的選育及免疫層析檢測技術研究[D]. 張道宏.中國農業(yè)科學院 2011
碩士論文
[1]牛奶中呋喃唑酮的免疫層析快速檢測方法研究[D]. 閆靈芝.西北農林科技大學 2018
本文編號：2942019
【文章來源】：西北農林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數】：77 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
納米金免疫層析試紙條檢測呋喃唑酮代謝物結果示意圖（Xieetal.2017）
圖 1-3 多壁碳納米管免疫層析試紙條檢測 Hg2+示意圖（Yao et al. 2016）1-3 The schematic diagram of the MWCNTs based lateral flow strip biosensor for mercdetection (Yao et al. 2016) 量子點子點（Quantum dots，QDs）是一種粒徑一般小于 10 nm 的熒光半導體，因其具有發(fā)射光譜窄，激發(fā)范圍寬和熒光量子產率高等優(yōu)勢，已成為中理想的熒光標記材料。Savin 等（2018）描述了用于檢測人心臟脂肪hFABP）的新型免疫層析試紙條的制備和驗證。選擇水溶性 CdTe 量子記并與抗 hFABP 抗體共價連接。將標記的抗體轉移至免疫層析試紙條原-抗體反應，為人血清中 hFABP 的定量提供了一種快速的方法，范圍1，與基于免疫層析試紙條的其它檢測方法相比檢測限低得多，為 221 n et al. 2018）。Berlina 等（2013）開發(fā)了一種用于檢測牛奶中氯霉素（快速（20 min）熒光免疫層析試紙條。熒光標記材料為具有 625nm 發(fā)射子點。檢測過程中用磷酸鹽緩沖液將牛奶樣品稀釋 20%以消除基質效應
圖 1-4 以量子點作為標記物的免疫層析試紙條檢測示意圖（Le et al. 2016）Fig. 1-4 Schematic diagram of the QD based lateral flow immunoassay (Le et al. 2016) 上轉換熒光納米材料轉換熒光納米材料（Up-converting phosphor nanoparticles, UCPs）是最近低能紅外光照射時可發(fā)出高能量可見光或紫外光的熒光發(fā)光探針（Van 001）。UCPs 由于具有高化學穩(wěn)定性，窄帶寬，可調諧發(fā)光顏色，高光胞毒性等特性，最近引起了相當多的關注（Tu et al. 2014; Wang et al. 2 UCPs 具有相當長的熒光壽命（高達毫秒級），可以降低背景自發(fā)熒光，從而將檢測限降低一個或兩個數量級（Zhao et al. 2014）。Niedbala 等用 UCP 作為免疫層析試紙條的標記物（Niedbala et al. 2000）。之后了廣泛應用。Lei 等（2017）利用 UCPs 作為標記材料檢測中性粒細胞運載蛋白，檢測限為 7.68 ng·mL-1，與 ELISA 檢測結果保持高度一致（。檢測原理及過程如圖 1-5 所示。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]蜂蜜中硝基呋喃代謝物的超高效液相色譜-串聯質譜測定法[J]. 高洋洋,劉鑫,陳廣全. 職業(yè)與健康. 2018(13)
[2]呋喃唑酮代謝物單克隆抗體和膠體金免疫層析試紙條的研制[J]. 李春生,劉靜靜,杜順豐,武孝麗,曹秀梅,吳萌,張娜. 現代食品科技. 2017(06)
[3]呋喃唑酮代謝物間接競爭化學發(fā)光酶免疫法的建立[J]. 黃登宇,高文靜,黃種乾,高麗霞,馮敏,楊秀松. 食品工業(yè)科技. 2017(09)
[4]高效液相色譜法同時測定水產品中4種硝基呋喃原藥殘留[J]. 黃宣運,李冰,蔡友瓊,黃冬梅,史永富,于慧娟. 分析試驗室. 2013(02)
博士論文
[1]黃曲霉毒素雜交瘤細胞株的選育及免疫層析檢測技術研究[D]. 張道宏.中國農業(yè)科學院 2011
碩士論文
[1]牛奶中呋喃唑酮的免疫層析快速檢測方法研究[D]. 閆靈芝.西北農林科技大學 2018
本文編號：2942019
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