目的：洛克沙腫（Rox）即3-硝基-4-羥基苯胂酸,是一種在世界范圍內(nèi)被廣泛使用的有機(jī)胂畜禽飼料添加劑。洛克沙腫在體內(nèi)吸收很少,絕大多數(shù)隨糞便排泄。畜禽糞便作為有機(jī)肥使用后,增加了環(huán)境中砷水平及人類(lèi)砷污染的風(fēng)險(xiǎn)。目前,國(guó)內(nèi)外關(guān)于洛克沙胂促血管生成的研究較少,洛克沙胂促血管生成的機(jī)制尚不明確。本文通過(guò)大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)、遷移及管形成體外試驗(yàn),以及小鼠B16F10黑色素移植瘤模型,研究洛克沙胂體內(nèi)外促血管生長(zhǎng)中PI3K/Akt信號(hào)機(jī)制。方法：大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)不同處理后,通過(guò)MTT試驗(yàn)、BrdU增殖試驗(yàn)、劃痕試驗(yàn)、管形成試驗(yàn),分別檢測(cè)血管內(nèi)皮細(xì)胞的活力、增殖、遷移和體外管形成能力；通過(guò)Western Blot檢測(cè)細(xì)胞中PI3K/Akt信號(hào)蛋白和VEGF的表達(dá)。不同處理分組如下：空白對(duì)照組（PBS）、陽(yáng)性對(duì)照組（10 ng/mL VEGF）,洛克沙胂處理組（0.1 μmol/L、1.0 μmol/L和10.0 μmol/L Rox）,P13K抑制劑處理組（20.0 μmol/L LY294002）和共處理組（20.0 μmol/L LY294002+1.0μmol/L Rox）。在小鼠黑色... 

【文章來(lái)源】：揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖３?Ａｋｔ信號(hào)的調(diào)控ＰＩ??細(xì)胞接受刺激或ＰＩＰ３生成之后，Ａｋｔ的ＰＨ結(jié)構(gòu)域與ＰＩＰ３相互作用，易位于細(xì)胞膜

?接種于９６孔板內(nèi)６?ｈ后可Ｗ完全貼壁，Ｗ該時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞活力作為對(duì)照。１．０叫ｌｏｌ／Ｌ洛克??沙腫處理不同時(shí)間，對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞活為的影響見(jiàn)圖４Ａ。１２?ｈ、２４?ｈ和３６?ｈ這王個(gè)時(shí)間點(diǎn)的??細(xì)胞活力均顯著高于６ｈ的細(xì)胞活力（戶(hù)；?１２?ｈ的細(xì)胞活力與２４?ｈ的細(xì)胞活力無(wú)??顯著性差異（Ｆ＞０．Ｍ）；而３６ｈ的細(xì)胞活力顯著大于２４ｈ的細(xì)胞活為（戶(hù)＜０．０／）。??內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)過(guò)不同藥物或試劑處理２４?ｈ，ＭＴＴ法檢測(cè)細(xì)胞活力見(jiàn)圖４Ｂ。相對(duì)于空白??對(duì)照組，ＶＥＧＦ作為陽(yáng)性對(duì)照，能夠顯著增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞的活力）?！?１．０叫ｌｏｌ／Ｌ??洛克沙腫處理也表現(xiàn)出增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞活力的作用（尸＜０．０５?）；?０．１?｜１〇１〇１／１＾和１０．０?＾ｔｍｏｌ??洛克沙腫處理組相對(duì)ＯＤ值均高于對(duì)照組，但差異不顯著。ＬＹ２９４００２處理組相對(duì)ＯＤ值??比空白對(duì)照組低，差異思著（），而共處理組相對(duì)〇〇值與１．０?＾〇１１〇１／１＾各克沙胖??處理組相比，呈現(xiàn)極顯著的降低）。??Ａ?Ｂ?，??２。１?Ｔ?１４－?＊?Ｔ?王??§?１．５．?早?ＩＩ?麗?§?Ｔ?南?王??１?院霞３圍?１?．難緩圍?Ｊ?Ｘ患??ｏＪｉ?Ｉ?ｉｉｉｉｌ?ｉｌｌ?ｉｌｌ?ｐ－ｓｊＭ?ｙ?擊?ｉｌ．ｉｌ?闡?Ｂ?擊．??於辦廬魯?於、決＼冷＼／、放、炎、次、??Ｒｏｘａｒｓｏｎｃ?ＬＹ２９４００２??圖４不同處理對(duì)大鼠內(nèi)皮細(xì)胞活力的影響??各組ＯＤ值數(shù)據(jù)均先與對(duì)照組的平均值相比，數(shù)據(jù)最終Ｗ比值的ｍｅａｎｉＳＤ表示。Ａ為ｌ．Ｏｎｍｏｌ／ＬＲｏｘ??處理不同時(shí)間血管內(nèi)皮細(xì)胞的巧對(duì)活力

＊?？?＜＂０．?Ｍ?ＶＳ?Ｃｏｎ仕〇！；?＃＃?尸?＜０．?口／?ＶＳ?１．０?｜ｉｍｏｌ／Ｌ?Ｒｏｘ。??２．２對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞増殖能力的影響??圖５Ａ所示為血管內(nèi)皮細(xì)胞ＢｒｄＵ英光染色圖像，ＢｒｄＵ陽(yáng)性細(xì)胞核呈現(xiàn)綠色蒙光。陽(yáng)??性細(xì)胞核計(jì)數(shù)結(jié)果見(jiàn)圖５Ｂ。與空白對(duì)照組相比，陽(yáng)性對(duì)照組血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖活為極顯??著増強(qiáng)（）?；?ｌ－Ｏ＾ｍｏｌ／Ｌ洛克沙腫處理提高了血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖能力，與空白??對(duì)照組相比，差異具有顯著性），０．１?＾ｍｏｌ／Ｌ洛克沙腫處理后陽(yáng)性細(xì)胞核數(shù)目??多于空白對(duì)照組，但差異不顯著（），１０．０叫ｎｏｌ／Ｌ洛克沙腫處理后陽(yáng)性細(xì)胞核??數(shù)目低于空白對(duì)照組，但差異無(wú)顯著性（Ｐ＞０．Ｍ）。與空白對(duì)照組相比，抑制組血管內(nèi)??

【參考文獻(xiàn)】：
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