圍產(chǎn)期奶牛在產(chǎn)后體內(nèi)易出現(xiàn)能量負平衡,從而使得血漿中非脂化脂肪酸的濃度大大升高。最新的研究證實高濃度的非脂化脂肪酸可以導致圍產(chǎn)期亞急性炎癥尤其是代謝性炎癥。同時,棕櫚酸是非脂化脂肪酸毒性最大且變化最大的脂肪酸,有可能參與炎癥與免疫抑制,但進一步的機制并不明確。中性粒細胞作為動物機體先天免疫系統(tǒng)的主要效應細胞,較新的機制發(fā)現(xiàn)中性粒細胞胞外誘捕網(wǎng)的形成是免疫機制之一。為明確中性粒細胞胞外誘捕網(wǎng)的形成是否為棕櫚酸誘導炎癥和免疫應答的機制,本研究將探討奶牛圍產(chǎn)期對中性粒細胞胞外誘捕網(wǎng)形成的影響和機制。研究采用紅細胞裂解法分離了圍產(chǎn)期產(chǎn)后奶牛（DIM:7-12）的外周血中性粒細胞培養(yǎng),使用熒光顯微鏡（SYTOX Orange染料）、掃描電子顯微鏡觀察中性粒細胞胞外誘捕網(wǎng)的形態(tài),使用Picogreen熒光染料對雙鏈DNA進行定量測定,TMB法測定髓過氧化物酶（MPO）的水平,來明確棕櫚酸是否能引起中性粒細胞胞外誘捕網(wǎng)的形成。其次,使用比色法檢測乳酸脫氫酶活性,使用DHCF法檢測活性氧水平,辣根過氧化物酶比色法檢測過氧化氫的活性水平,Western blot技術檢測PI3K/Akt通路相關蛋白Akt... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
主要符號對照表
第一章 文獻綜述
    1.1 棕櫚酸與圍產(chǎn)期奶牛亞急性炎癥
        1.1.1 圍產(chǎn)期奶牛生理狀況
        1.1.2 圍產(chǎn)期奶牛普遍存在亞急性炎癥與免疫抑制
        1.1.3 圍產(chǎn)期奶牛棕櫚酸的來源
        1.1.4 棕櫚酸與亞急性炎癥和免疫的關系
    1.2 中性粒細胞胞外誘捕網(wǎng)及其形成機制
        1.2.1 中性粒細胞的功能
        1.2.2 中性粒細胞胞外誘捕網(wǎng)形成及發(fā)展
        1.2.3 中性粒細胞胞外誘捕網(wǎng)的功能
        1.2.4 中性粒細胞胞外誘捕網(wǎng)形成機制
    研究假設
第二章 棕櫚酸對中性粒細胞胞外誘捕網(wǎng)形成的影響
    2.1 材料和方法
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 試驗方法
    2.2 試驗結(jié)果
        2.2.1 中性粒細胞活率鑒定結(jié)果
        2.2.2 中性粒細胞的提取純度
        2.2.3 PA對中性粒細胞乳酸脫氫酶活力的影響
        2.2.4 NETs生成鑒定
        2.2.5 PA對中性粒細胞MPO活性水平的影響
        2.2.6 NETs定量結(jié)果
        2.2.7 蛋白濃度定量結(jié)果
        2.2.8 PA對 NETs形成相關蛋白表達水平的影響
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
第三章 棕櫚酸通過PI3K/Akt信號通路調(diào)節(jié)奶牛NETs的機制
    3.1 材料和方法
        3.1.1 試驗材料
        3.1.2 試驗方法
    3.2 試驗結(jié)果
        3.2.1 PA對中性粒細胞超氧化物水平的影響
        3.2.2 PA對Nox2蛋白表達水平的影響
        3.2.3 PA對PI3K/Akt通路主要蛋白表達水平的影響
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
第四章 結(jié)論
附錄
參考文獻
致謝
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
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