圍產(chǎn)期奶牛在產(chǎn)后體內(nèi)易出現(xiàn)能量負(fù)平衡,從而使得血漿中非脂化脂肪酸的濃度大大升高。最新的研究證實(shí)高濃度的非脂化脂肪酸可以導(dǎo)致圍產(chǎn)期亞急性炎癥尤其是代謝性炎癥。同時(shí),棕櫚酸是非脂化脂肪酸毒性最大且變化最大的脂肪酸,有可能參與炎癥與免疫抑制,但進(jìn)一步的機(jī)制并不明確。中性粒細(xì)胞作為動物機(jī)體先天免疫系統(tǒng)的主要效應(yīng)細(xì)胞,較新的機(jī)制發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)的形成是免疫機(jī)制之一。為明確中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)的形成是否為棕櫚酸誘導(dǎo)炎癥和免疫應(yīng)答的機(jī)制,本研究將探討奶牛圍產(chǎn)期對中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)形成的影響和機(jī)制。研究采用紅細(xì)胞裂解法分離了圍產(chǎn)期產(chǎn)后奶牛（DIM:7-12）的外周血中性粒細(xì)胞培養(yǎng),使用熒光顯微鏡（SYTOX Orange染料）、掃描電子顯微鏡觀察中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)的形態(tài),使用Picogreen熒光染料對雙鏈DNA進(jìn)行定量測定,TMB法測定髓過氧化物酶（MPO）的水平,來明確棕櫚酸是否能引起中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)的形成。其次,使用比色法檢測乳酸脫氫酶活性,使用DHCF法檢測活性氧水平,辣根過氧化物酶比色法檢測過氧化氫的活性水平,Western blot技術(shù)檢測PI3K/Akt通路相關(guān)蛋白Akt... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
主要符號對照表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 棕櫚酸與圍產(chǎn)期奶牛亞急性炎癥
        1.1.1 圍產(chǎn)期奶牛生理狀況
        1.1.2 圍產(chǎn)期奶牛普遍存在亞急性炎癥與免疫抑制
        1.1.3 圍產(chǎn)期奶牛棕櫚酸的來源
        1.1.4 棕櫚酸與亞急性炎癥和免疫的關(guān)系
    1.2 中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)及其形成機(jī)制
        1.2.1 中性粒細(xì)胞的功能
        1.2.2 中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)形成及發(fā)展
        1.2.3 中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)的功能
        1.2.4 中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)形成機(jī)制
    研究假設(shè)
第二章 棕櫚酸對中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)形成的影響
    2.1 材料和方法
        2.1.1 試驗(yàn)材料
        2.1.2 試驗(yàn)方法
    2.2 試驗(yàn)結(jié)果
        2.2.1 中性粒細(xì)胞活率鑒定結(jié)果
        2.2.2 中性粒細(xì)胞的提取純度
        2.2.3 PA對中性粒細(xì)胞乳酸脫氫酶活力的影響
        2.2.4 NETs生成鑒定
        2.2.5 PA對中性粒細(xì)胞MPO活性水平的影響
        2.2.6 NETs定量結(jié)果
        2.2.7 蛋白濃度定量結(jié)果
        2.2.8 PA對 NETs形成相關(guān)蛋白表達(dá)水平的影響
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
第三章 棕櫚酸通過PI3K/Akt信號通路調(diào)節(jié)奶牛NETs的機(jī)制
    3.1 材料和方法
        3.1.1 試驗(yàn)材料
        3.1.2 試驗(yàn)方法
    3.2 試驗(yàn)結(jié)果
        3.2.1 PA對中性粒細(xì)胞超氧化物水平的影響
        3.2.2 PA對Nox2蛋白表達(dá)水平的影響
        3.2.3 PA對PI3K/Akt通路主要蛋白表達(dá)水平的影響
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
第四章 結(jié)論
附錄
參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]西紅花對皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞損傷的保護(hù)作用研究[J]. 李萌,馬致潔,章從恩,章前,于衛(wèi)東,陳熹,趙奎君.  世界中醫(yī)藥. 2019(04)
[2]圍產(chǎn)期奶牛炎性反應(yīng)與代謝紊亂[J]. 張凡建,李丹,孫健,關(guān)文怡,侯引緒,王九峰.  中國獸醫(yī)雜志. 2018(09)
[3]中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)研究進(jìn)展和啟示[J]. 夏杰,占玲,張丹,雷琴,王蓉.  黃岡職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào). 2018(02)
[4]NEFAs在酮病奶牛脂肪動員以及氧化應(yīng)激中的作用[J]. 鄒蘇萍,郝寧,陶煥青,明鵬飛,徐怡鐘,梁婷,馮士彬,王希春,吳金節(jié),李玉.  生物學(xué)雜志. 2018(03)
[5]中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)研究最新進(jìn)展[J]. 崔蕊,方玲,謝風(fēng).  中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué). 2018(01)
[6]影響中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)(NETs)發(fā)揮作用的因素分析[J]. 梁俏美,馬仁舒,李春妹,沈佳程,梁妍雯,劉偉.  轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)電子雜志. 2017(10)
[7]中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)的臨床研究進(jìn)展[J]. 王哲元,柳鵬程,張亞武.  現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2017(10)
[8]棕櫚酸刺激的巨噬細(xì)胞對HepG2細(xì)胞侵襲和遷移的影響[J]. 王燕,晏勇,鐘珊,阮雄中,陳壓西,趙蕾.  中國病理生理雜志. 2017(03)
[9]圍產(chǎn)期奶牛炎癥反應(yīng)及其與免疫和能量代謝的關(guān)系[J]. 弓劍,曉敏.  動物營養(yǎng)學(xué)報(bào). 2016(09)
[10]Occurrence of retained placenta is preceded by an inflammatory state and alterations of energy metabolism in transition dairy cows[J]. Elda Dervishi,Guanshi Zhang,Dagnachew Hailemariam,Suzana M.Dunn,Burim N.Ametaj.  Journal of Animal Science and Biotechnology. 2016(03)

博士論文
[1]β-羥丁酸通過GPR109A-mTOR信號通路調(diào)節(jié)奶牛NETs的機(jī)制[D]. 張玉明.吉林大學(xué) 2018
[2]葡萄籽原花青素分離提純、組分鑒定及抗氧化性研究[D]. 吳朝霞.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005

碩士論文
[1]棕櫚酸誘導(dǎo)奶牛氧化應(yīng)激及其機(jī)制的研究[D]. 代少華.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018
[2]IGF-1緩解高酮血癥奶牛中性粒細(xì)胞免疫抑制的機(jī)制[D]. 趙志波.吉林大學(xué) 2017
[3]NEFAs通過線粒體功能紊亂誘導(dǎo)奶牛肝細(xì)胞胰島素抵抗的信號機(jī)制[D]. 高文文.吉林大學(xué) 2016
[4]奶牛圍產(chǎn)期酮病和乳熱的早期預(yù)警體系的研究[D]. 王博.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2014



本文編號：2916129