藍(lán)氏賈第蟲是一種宿主廣泛且呈世界性分布的機(jī)會(huì)致病性人獸共患寄生蟲,可感染人和多種動(dòng)物,包括嚙齒動(dòng)物。宿主感染后可出現(xiàn)急慢性腹痛、腹瀉、脫水、消化不良和嘔吐等臨床癥狀,嚴(yán)重者可以導(dǎo)致死亡。隨著我國特種養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展,藍(lán)氏賈第蟲感染兔子、栗鼠等嚙齒動(dòng)物的報(bào)道也在逐漸增多,甚至有報(bào)道稱部分嚙齒動(dòng)物藍(lán)氏賈第蟲感染率超過90%。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),在嚙齒動(dòng)物至少存在5種藍(lán)氏賈第蟲集聚體(A、B、D、E和G),包括人獸共患集聚體A和B。由此可見,嚙齒動(dòng)物可能具有傳播藍(lán)氏賈第蟲給人類的潛在風(fēng)險(xiǎn)。中華竹鼠作為一種在我國南方廣泛養(yǎng)殖的嚙齒動(dòng)物,具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和藥用價(jià)值,但人工養(yǎng)殖的中華竹鼠易被各種病原感染,然而目前尚缺乏有關(guān)中華竹鼠感染藍(lán)氏賈第蟲的報(bào)道�；诖�,本研究首先利用基于β-賈第素(beta-giardin,bg)的分子生物學(xué)技術(shù)研究了湖南省部分地區(qū)中華竹鼠藍(lán)氏賈第蟲的感染率,并利用基于bg、磷酸丙糖異構(gòu)酶基因(triosephosphate isomerase,tpi)和谷氨酸脫氫酶基因(glutamate dehydrogenase,gdh)的多位點(diǎn)基因分型(Multilocus genotyping,MLG)的方法研究了中華竹鼠藍(lán)氏賈第蟲的遺傳多樣性,研究結(jié)果可為該地區(qū)中華竹鼠藍(lán)氏賈第蟲感染的防控提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。本研究從湖南省的武岡市、郴州市、懷化市和吉首市的6個(gè)養(yǎng)殖場共采集480份中華竹鼠新鮮糞便樣品,基于bg基因位點(diǎn)的巢式PCR擴(kuò)增發(fā)現(xiàn),52份(10.8%)糞便樣品存在藍(lán)氏賈第蟲的感染。所調(diào)查的6個(gè)養(yǎng)殖場中華竹鼠藍(lán)氏賈第蟲的感染率也存在顯著差異(?~2=59.031,df=5,P0.01),其中4個(gè)養(yǎng)殖場存在藍(lán)氏賈第蟲感染,感染率最高的為武岡市的場3(38.2%),而在郴州市的場4和吉首市的場6沒有發(fā)現(xiàn)感染;同時(shí),武岡市所調(diào)查的3個(gè)養(yǎng)殖場的感染率差異也顯著(?~2=28.876,df=2,P0.01)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),所調(diào)查的4個(gè)年齡段(6月齡、6-12月齡、12-24月齡和24月齡)中華竹鼠的感染率差異也顯著(?~2=28.298,df=3,P0.01),且感染率隨著年齡的增加呈現(xiàn)下降的趨勢,其中6月齡的感染率(22.8%)最高,而24月齡的感染率(4.6%)最低。為了分析藍(lán)氏賈第蟲的遺傳多樣性,本研究對52個(gè)bg陽性的糞便樣品分別在tpi和gdh基因位點(diǎn)進(jìn)行了巢式PCR擴(kuò)增,分別在2個(gè)位點(diǎn)擴(kuò)增出了12個(gè)和27個(gè)糞便樣品。對其序列進(jìn)行BLAST分析發(fā)現(xiàn),所有的陽性樣品均屬于人獸集聚體B。序列比對分析發(fā)現(xiàn),在bg、tpi和gdh基因位點(diǎn)分別存在6個(gè)(Ba1~Ba6)、4個(gè)(Bb1~Bb4)和6個(gè)(Bc1~Bc6)單倍型。對在3個(gè)位點(diǎn)均成功擴(kuò)增的8個(gè)樣品進(jìn)行多位點(diǎn)基因分型發(fā)現(xiàn),它們形成了7個(gè)MLGs(MLGB1~MLGB7)。綜上所述,湖南省部分地區(qū)中華竹鼠存在藍(lán)氏賈第蟲感染,其感染率與中華竹鼠年齡、地理分布等因素密切相關(guān),且存在人獸共患集聚體B和MLGs。本研究結(jié)果擴(kuò)展了藍(lán)氏賈第蟲的宿主范圍,并為采取有效防控措施防止藍(lán)氏賈第蟲在人和動(dòng)物間的傳播提供了基礎(chǔ)資料。
【學(xué)位單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：S855.9
【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
文獻(xiàn)綜述
    第一章 嚙齒動(dòng)物藍(lán)氏賈第蟲感染情況研究進(jìn)展
        1.1 形態(tài)學(xué)
        1.2 生活史
        1.3 致病特點(diǎn)
        1.4 嚙齒動(dòng)物藍(lán)氏賈第蟲病的流行病學(xué)特征
            1.4.1 嚙齒動(dòng)物藍(lán)氏賈第蟲的感染情況
            1.4.2 嚙齒動(dòng)物藍(lán)氏賈第蟲的集聚體分布情況
        1.5 診斷
            1.5.1 糞便檢查
            1.5.2 免疫學(xué)檢測
            1.5.3 分子生物學(xué)檢測
        1.6 防治
        1.7 本研究的目的和意義
試驗(yàn)研究
    第二章 湖南省部分地區(qū)中華竹鼠藍(lán)氏賈第蟲感染情況及基因分型研究
        2.1 材料與方法
            2.1.1 材料
                2.1.1.1 糞便樣品
                2.1.1.2 主要儀器設(shè)備
                2.1.1.3 主要試劑及溶液配制
            2.1.2 方法
                2.1.2.1 糞便樣品基因組DNA提取
                2.1.2.2 基因位點(diǎn)擴(kuò)增及電泳
                2.1.2.3 測序和序列分析
                2.1.2.4 統(tǒng)計(jì)分析
        2.2 結(jié)果
            2.2.1 bg位點(diǎn)PCR擴(kuò)增結(jié)果
            2.2.2 湖南省部分地區(qū)中華竹鼠藍(lán)氏賈第蟲的感染情況
            2.2.3 tpi和 gdh位點(diǎn)PCR擴(kuò)增結(jié)果
            2.2.4 湖南省部分地區(qū)中華竹鼠藍(lán)氏賈第蟲亞型分布
            2.2.5 湖南省部分地區(qū)中華竹鼠多位點(diǎn)分型結(jié)果
        2.3 討論
            2.3.1 地區(qū)和飼養(yǎng)情況對中華竹鼠藍(lán)氏賈第蟲感染的影響
            2.3.2 年齡對中華竹鼠藍(lán)氏賈第蟲感染的影響
            2.3.3 湖南省部分地區(qū)中華竹鼠藍(lán)氏賈第蟲集聚體分布
            2.3.4 湖南省部分地區(qū)中華竹鼠藍(lán)氏賈第蟲亞型分布
            2.3.5 湖南省部分地區(qū)中華竹鼠藍(lán)氏賈第蟲多位點(diǎn)基因分型情況
            2.3.6 中華竹鼠藍(lán)氏賈第蟲感染的防控策略
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡歷

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