CYP2J酶在動物機(jī)體內(nèi)源性物質(zhì)和外源性化合物代謝過程中扮演著關(guān)鍵的角色。CYP2J通過參與花生四烯酸代謝生成EETs,起到降低血壓、抗血栓、促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和抑制內(nèi)皮細(xì)胞凋亡等作用。為揭示雙峰駝CYP2J基因及其蛋白質(zhì)在體內(nèi)不同組織中的表達(dá)量與分布情況,開展了本研究。首先,根據(jù)Genebank中登錄的雙峰駝CYP2J基因序列設(shè)計(jì)一對特異性引物,以ACTB基因?yàn)閮?nèi)參,采用SYBR Green I實(shí)時熒光定量PCR法檢測雙峰駝肝臟、心臟、脾臟、肺臟、腎臟、血管、胰腺、十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結(jié)腸和胃等13種組織中CYP2J基因,從基因水平上揭示CYP2J基因在雙峰駝不同組織中的相對表達(dá)量。其次,根據(jù)雙峰駝CYP2J氨基酸序列,用分子生物學(xué)軟件(DNASTAR)篩選出合適的抗原表位氨基酸序列,并據(jù)此人工合成抗原多肽制備兔CYP2J抗體。第三,采用Western blot技術(shù)檢測雙峰駝上述13種組織中的CYP2J蛋白相對表達(dá)量,從蛋白水平揭示CYP2J酶在雙峰駝不同組織中的相對表達(dá)量。結(jié)果表明:CYP2J基因在雙峰駝胰腺組織中的表達(dá)量最高,其次是回腸、盲腸、胃、空腸、血管、心臟、腎臟、結(jié)腸、肝臟、十二指腸、肺臟和脾臟。所制備的兔抗CYP2J抗體效價(jià)高(1:50000)、特異性強(qiáng)和穩(wěn)定性好,能夠滿足Western blot檢測要求。雙峰駝CYP2J蛋白質(zhì)在肝臟的表達(dá)量最高,其次是胰腺、腎臟、胃、空腸、十二指腸、脾臟、血管、盲腸、心臟、肺臟、結(jié)腸和回腸。結(jié)論:CYP2J基因和蛋白在雙峰駝各組織中的相對表達(dá)量差異很大,CYP2J基因在雙峰駝胰腺組織中的表達(dá)量最高,而CYP2J蛋白在雙峰駝肝臟組織中的表達(dá)量最高。
【學(xué)位單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：S824
【部分圖文】：

圖１抗原片段篩選圖??Ｆｉｇ．?１?Ａｎｔｉｇｅｎ?ｆｒａｇｍｅｎｔ?ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ??

圖2雙峰駝CYPZJ杭體純化質(zhì)譜圖

圖３雙峰駝ＣＹＰ２Ｊ抗體純化ＨＰＬＣ色譜圖??Ｆｉｇ．３?ＨＰＬＣ?ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ?ｏｆ?ＣＹＰ２Ｊ?ａｎｔｉｂｏｄｙ?ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｆｒｏｍ?Ｂａｃｔｒｉａｎ?ｃａｍｅｌ??
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 沈方方;李銀萍;;CYP 2J2和MMP-9在宮頸癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[J];武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年01期

2 李偉;周樂;劉新輝;胡洪貞;;鹽敏感性高血壓發(fā)病機(jī)制再認(rèn)識[J];中華高血壓雜志;2012年10期

3 詹同運(yùn);石磊;趙樹進(jìn);;CYP2J2*7SNP與心血管疾病相關(guān)性的研究現(xiàn)狀[J];生物學(xué)雜志;2011年04期

4 詹同運(yùn);石磊;趙樹進(jìn);邱健;賀寶霞;李銳;;CYP2J2~*7與中國漢族人冠心病相關(guān)性研究[J];廣東醫(yī)學(xué);2011年12期

5 蘆玲巧;于剛剛;張冬梅;曾翔俊;王紅霞;張立克;;cyp2j3基因轉(zhuǎn)染對在體大鼠心肌缺血-再灌注損傷的影響[J];首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2011年02期

6 李長宏;;柴達(dá)木雙峰駝的發(fā)展現(xiàn)狀及前景[J];中國草食動物;2010年06期

7 徐德意;肖洪廣;高俊;;SARS冠狀病毒S蛋白RBD片段抗原多肽的合成及其多克隆抗體制備[J];熱帶醫(yī)學(xué)雜志;2010年09期

8 蔣建剛;付向?qū)?陳春蓮;汪道文;;細(xì)胞色素P450花生四烯酸表氧化酶在人腫瘤組織及腫瘤細(xì)胞系中的特異性表達(dá)[J];癌癥;2009年02期

9 高雅麗;姜達(dá);;細(xì)胞色素P450與腫瘤[J];中國癌癥雜志;2009年01期

10 李鐘玉;周宏灝;;CYP2J2的生理功能及其在心血管疾病中的作用[J];醫(yī)學(xué)綜述;2008年11期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 李瑞;細(xì)胞色素P450表氧化酶2J2基因過表達(dá)通過抑制肝臟炎癥改善小鼠2型糖尿病[D];華中科技大學(xué);2012年

2 張潔;細(xì)胞色素P450表氧化酶2J2基因過表達(dá)及與可溶性環(huán)氧化酶水解酶抑制劑共同作用治療小鼠2型糖尿病的作用及其機(jī)制[D];華中科技大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 圖門巴雅爾;公駝?wù)硐俜置谖飳π∈竺庖吖δ艿挠绊懠翱鼓[瘤作用研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

2 王初一;蘇尼特雙峰駝乳抗腫瘤免疫活性研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

本文編號：2873157