發(fā)布時(shí)間：2020-11-01 11:43

　　 凍精的生產(chǎn)和應(yīng)用可實(shí)現(xiàn)優(yōu)秀家畜種質(zhì)資源的長期保存和充分利用,并提高雜交改良的效率。綿羊精子對(duì)低溫敏感,綿羊精液冷凍技術(shù)的進(jìn)展緩慢,目前還無法支撐其產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用。戴瑞羊(Dairy Meade)是新西蘭培育的新型專門化乳用綿羊品種。本研究以三只戴瑞羊(N_1、N_2和N_3)的精液為研究材料,基于OptiXcell(IMV)商品化稀釋液,在冷凍程序的-10℃~-100℃危險(xiǎn)溫度區(qū)間內(nèi)設(shè)置了8個(gè)降溫速率(30℃/min,40℃/min,50℃/min,60℃/min,70℃/min,80℃/min,90℃/min,100℃/min)以生產(chǎn)細(xì)管凍精,并以凍后精子的活率、運(yùn)動(dòng)能力、頂體完整性、質(zhì)膜完整性、線粒體膜完整性、未凋亡精子比例和體外受精后胚胎的卵裂率為評(píng)價(jià)指標(biāo),篩選適合戴瑞羊的冷凍程序。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:1)N_1、N_2和N_3三只戴瑞種公羊的原精質(zhì)量無顯著差異,30℃/min和100℃/min組的凍精解凍后活力顯著低于其他組;2)60℃/min組的精子VCL、VAP和快速運(yùn)動(dòng)精子比例顯著高于其他組;3)60℃/min和70℃/min兩組的頂體完整率顯著高于其他組(N_2和N_3)或與80℃/min組差異不顯著但顯著高于其他組(N_1);4)60℃/min組的質(zhì)膜完整率與70℃/min和80℃/min組差異不顯著但顯著高于其他組(N_1),或與80℃/min組差異不顯著但顯著高于其他組(N_2和N_3);5)60℃/min和70℃/min兩組的線粒體膜完整性顯著好于其他組;6)60℃/min組的未凋亡精子比例顯著高于其他組(N_1)或與70℃/min組差異不顯著但顯著高于其他組(N_2和N_3);7)60℃/min組的精子用于IVF實(shí)驗(yàn)的卵裂率與40℃/min組差異不顯著,但顯著高于30℃/min和80℃/min組。綜合3只戴瑞種公羊8組降溫速率下7個(gè)指標(biāo)的結(jié)果,-10℃~-100℃危險(xiǎn)溫度區(qū)間內(nèi)60℃/min的降溫速率是最適合戴瑞羊精液冷凍的程序。本研究為戴瑞奶綿羊細(xì)管凍精的生產(chǎn)提供了理論依據(jù)。
【學(xué)位單位】：內(nèi)蒙古大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：S826
【部分圖文】：

內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文一 引言子發(fā)生與形態(tài)結(jié)構(gòu)子發(fā)生是由精原細(xì)胞經(jīng)過變態(tài)分化形成（圖 1.1）。精原細(xì)胞位于生精上皮的基底的形態(tài)和致密度等特征大致分為 A 型和 B 型。A 型精原細(xì)胞作為精子的基，核呈卵圓形且內(nèi)部含有染色質(zhì)顆粒。通常情況下，經(jīng)有絲分裂后形成 A4 型[1]。A4 型精原細(xì)胞進(jìn)一步分裂形成 B 型精原細(xì)胞，該精原細(xì)胞的主要特且染色質(zhì)呈顆粒狀。B 型精原細(xì)胞經(jīng)分裂形成多個(gè)初級(jí)精母細(xì)胞。

子必須經(jīng)過附睪的成熟階段才能具備受精能力[1-3]。哺上基本相同，由頭、頸、尾三部分構(gòu)成（圖 1.2）。精體是雙層膜組成的帽狀結(jié)構(gòu)，覆蓋在細(xì)胞核的前 2/3 酶、堿性磷酸酶、乳酸脫氫酶、透明質(zhì)酸酶、芳基硫酸卵母細(xì)胞相遇后，頂體釋放出頂體蛋白酶和透明質(zhì)酸子與卵母細(xì)胞更好的發(fā)生融合。精子頸部又稱連接段和尾部。精子尾是一種特殊類型的纖毛（亦稱鞭毛）中段是由軸絲和線粒體鞘組成，其中軸絲由遠(yuǎn)端中心成上構(gòu)成 9+2 型結(jié)構(gòu)。線粒體鞘則是精子形成時(shí)線粒結(jié)構(gòu)，線粒體的主要作用是為精子運(yùn)動(dòng)提供所需要的部分，由軸絲和筒狀纖維鞘組成，當(dāng)?shù)竭_(dá)精子末端時(shí)

會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的水分發(fā)生重結(jié)晶而加重凍害。2℃、65℃的溫度梯度進(jìn)行綿羊精子解凍實(shí)驗(yàn)，結(jié)果子活力最高，為 45%[28]。理和冷凍曲線的研究精液經(jīng)稀釋、平衡和分裝后，用干冰（-79℃）或細(xì)胞代謝完全停止，從而達(dá)到長期保存精液的目的冷凍保護(hù)劑，采用快速冷凍和解凍的方式使精子通傷[29,30]。1972 年 Mazur 等人針對(duì)冷凍損傷機(jī)制提出和溶液損傷）（圖 1.3）[32,33]。目前精子細(xì)胞在冷凍構(gòu)變化的機(jī)理尚不明確，需要更加深入的探討細(xì)胞
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本文編號(hào)：2865483