豬繁殖呼吸綜合征PRRS(Porcine reproductive and respiratory syndrome,又稱(chēng)豬藍(lán)耳病)是由PRRSV感染造成的,目前在世界范圍內(nèi)廣泛流傳,主要導(dǎo)致母豬的繁殖能力差,抵抗能力弱,繼發(fā)疾病率和高死亡率較高,是現(xiàn)代養(yǎng)殖業(yè)重點(diǎn)預(yù)防的疾病,以避免給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)的災(zāi)難性損失,同時(shí)維護(hù)畜產(chǎn)品安全和環(huán)境衛(wèi)生。為及時(shí)、有效地了解地域性PRRS病的感染和流行情況,ELISA檢測(cè)抗體的方法和RT-PCR檢測(cè)抗原的方法在生產(chǎn)實(shí)踐和實(shí)驗(yàn)室得到了最經(jīng)常的使用,以及從分子生物學(xué)層面分析高致病性PRRSV的遺傳變異情況,為下一步科學(xué)的防控該病提供理論依據(jù)。本論文通過(guò)ELISA方法檢測(cè)2013、2014年綿陽(yáng)9個(gè)地區(qū)1404份血清進(jìn)行了豬藍(lán)耳病ELSA抗體檢測(cè),免疫PRRSV疫苗后血清的抗體平均陽(yáng)性率為80.8%(達(dá)到了農(nóng)業(yè)部的基本要求70%以上),未免疫豬藍(lán)耳疫苗的血清抗體陽(yáng)性率為14.3%。從不同采樣群體來(lái)看,規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)(91.8%)散養(yǎng)戶(hù)(81.7%)屠宰場(chǎng)(70.5%)；2014年的抗體平均合格率較2013年平均合格率有所下降。還通過(guò)RT-PCR方法檢測(cè)本實(shí)驗(yàn)中被檢測(cè)的綿陽(yáng)地區(qū)部分疑似發(fā)病豬場(chǎng)共采集病料78份,檢測(cè)結(jié)果平均陽(yáng)性率從大到小為高致病性PRRSV(35.90%)經(jīng)典PRRSV(17.95%)HP-PRRSV+PRRSV(11.65%);而該地區(qū)被檢測(cè)的部分屠宰樣品282份中,經(jīng)典PRRSV的陽(yáng)性率為2.84%,高致病性PRRSV陽(yáng)性率為11.70%,無(wú)HP-PRRSV+PRRSV混合感染。HP-PRRSV依然是該地區(qū)豬藍(lán)耳病感染率最高的毒株類(lèi)型。經(jīng)過(guò)抗原檢測(cè)后的病料中篩選出69個(gè)毒株,然后對(duì)目的基因Nsp2、ORF5進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增、純化、測(cè)序分析。49個(gè)Nsp2基因序列的核苷酸之間的同源性為90.2%～100%,推導(dǎo)氨基酸的同源性為73.7%～100%；與LV核苷酸同源性為49.7%～50.0%,推導(dǎo)氨基酸的同源性為31.1%～37.2%；與VR-2332、MLV核苷酸同源性為79.2%～82.6%,推導(dǎo)氨基酸的同源性為60.8%～75.0%；與國(guó)內(nèi)2006年以前BJ-4、HB-1(sh)、HN1毒核苷酸的同源性為79.0%～95.1%,推導(dǎo)氨基酸的同源性為70.9%～92.6%；與國(guó)內(nèi)2006年及以后分離的毒株JXA1、SY0608等核昔酸同源性為93.1%～98.6%,推導(dǎo)氨基酸的同源性為83.0%～98.5%。同時(shí)獲得的20個(gè)ORF5之間核苷酸同源性為91.9%～100%,推導(dǎo)其氨基酸的同源性為88.0%～100%；與LV同源性為62.6%～65.8%,推導(dǎo)其氨基酸的同源性為56.6%～59.2%；與VR-2332同源性為88.2%～90.2%,推導(dǎo)其氨基酸的同源性為86.5%～89.0%；與2006年以前毒株HN1同源性為87.1%～90.2%,氨基酸的同源性為84.5%～90.0%；與2006年及以后毒株JXA1、SXHZ01同源性為95.2%～99.2%,氨基酸的同源性為89.0%～99.0%。預(yù)測(cè)GP5的N-糖基化位點(diǎn)以4～5個(gè)為主,其誘騙表位A處存在突變,而中和表位B較為保守,準(zhǔn)種進(jìn)化是野毒株(S137)；這些說(shuō)明綿陽(yáng)地區(qū)HP-PRRSV變異情況與國(guó)內(nèi)其它流行毒株存在差異,發(fā)現(xiàn)了新的AA缺失區(qū)段和突變位點(diǎn),同源性和構(gòu)建進(jìn)化樹(shù)表明都屬于美洲基因型且與JXA1在一個(gè)亞群中,與2006年及以后發(fā)現(xiàn)的毒株親緣關(guān)系較近。
【學(xué)位單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2015
【中圖分類(lèi)】：S858.28
【文章目錄】：
中文摘要
abstract
縮略詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1. 豬繁殖與呼吸綜合征病毒
        1.1 病毒的形態(tài)和分類(lèi)
        1.2 PRRSV的致病機(jī)理
    2. 豬繁殖與呼吸綜合征病檢測(cè)研究進(jìn)展
        2.1 PRRSV的分離鑒定
        2.2 PRRSV血清學(xué)檢測(cè)研究進(jìn)展
        2.3 分子生物學(xué)檢測(cè)PRRSV技術(shù)的研究進(jìn)展
    3. 豬繁殖與呼吸綜合征分子流行病學(xué)研究進(jìn)展
        3.1 PRRSV傳染特性和流行情況
        3.2 PRRSV基因組機(jī)構(gòu)
        3.3 高致病性藍(lán)耳�。℉P-PRRSV）的遺傳變異規(guī)律
    4. 本研究的目的和意義
    5. 研究?jī)?nèi)容
    6. 研究路線
第二章 四川綿陽(yáng)地區(qū)豬藍(lán)耳病檢測(cè)及其分子流行病學(xué)分析
    1. 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        1.1 綿陽(yáng)地區(qū)（2013～2014）部分豬群藍(lán)耳病免疫抗體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)材料與方法
        1.2 綿陽(yáng)地區(qū)（2013～2014）豬藍(lán)耳病抗原測(cè)實(shí)驗(yàn)材料與方法
        1.3. HP-PRRSV的Nsp2、ORF5的遺傳變異研究實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        2.1 不同地方豬藍(lán)耳病抗體檢測(cè)情況
        2.2 不同采樣群體豬藍(lán)耳病抗體檢測(cè)情況
        2.3 PCR電泳結(jié)果
        2.4 綿陽(yáng)疑似發(fā)病豬場(chǎng)的PRRSV感染情況
        2.5 綿陽(yáng)各縣屠宰場(chǎng)送檢樣品檢測(cè)結(jié)果
        2.6 綿陽(yáng)地區(qū)不同時(shí)間的PRRSV感染情況
        2.7 Nsp2、ORF5基因的擴(kuò)增和序列測(cè)定
        2.8 Nsp2基因核苷酸序列和推導(dǎo)氨基酸的同源性分析
        2.9 Nsp2基因遺傳進(jìn)化樹(shù)分析
        2.10 Nsp2基因推導(dǎo)氨基酸的變異分析
        2.11 ORF5基因核苷酸序列和翻譯氨基酸的同源性分析
        2.12 GP5蛋白糖基化位點(diǎn)和抗原表位分析
        2.13 ORF基因構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹(shù)分析
    3. 討論
        3.1 豬藍(lán)耳病抗體檢測(cè)分析
        3.2 豬藍(lán)耳病抗原檢測(cè)分析
        3.3 Nsp2和ORF5遺傳變異分析
    4. 結(jié)論
        4.1 抗體檢測(cè)
        4.2 抗原檢測(cè)
        4.3 Nsp2、ORF5基因的遺傳變異
參考文獻(xiàn)
致謝

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5 李玉娥;;豬藍(lán)耳病防治[J];畜牧獸醫(yī)科技信息;2006年05期

6 王景成;林文耀;劉玉梅;宋慶慶;;豬藍(lán)耳病在我國(guó)的流行現(xiàn)狀及防控新進(jìn)展[J];獸醫(yī)導(dǎo)刊;2019年17期

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8 ;豬場(chǎng)藍(lán)耳病的防控應(yīng)該具體問(wèn)題具體分析[J];北方牧業(yè);2017年16期

9 殷麗霞;;豬藍(lán)耳病的防制[J];當(dāng)代畜禽養(yǎng)殖業(yè);2017年09期

10 費(fèi)文濤;;2013—2015年藍(lán)耳病傳入智利的流行病學(xué)調(diào)查[J];今日養(yǎng)豬業(yè);2017年06期

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2 康樺華;規(guī)�；N豬場(chǎng)豬藍(lán)耳病和豬瘟抗體變化規(guī)律研究及在健康流程管理中的應(yīng)用[D];華南農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

3 周建國(guó);口蹄疫、豬瘟和藍(lán)耳病三種疫苗同步分點(diǎn)免疫技術(shù)研究與推廣應(yīng)用[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

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本文編號(hào)：2862570