本研究選擇泌乳后期、胎次相同的中國荷斯坦奶牛4頭。整個試驗(yàn)周期共56d,分為3個階段,分別為試驗(yàn)Ⅰ期、試驗(yàn)Ⅱ期和試驗(yàn)Ⅲ期。試驗(yàn)Ⅰ期:試驗(yàn)?zāi)膛ｏ曃够A(chǔ)日糧作為對照組,試驗(yàn)周期為14d;試驗(yàn)Ⅱ期為構(gòu)建低乳脂奶牛模型:試驗(yàn)?zāi)膛Ｔ陲曃够A(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上灌注玉米面,使奶牛日糧淀粉含量達(dá)到27%,試驗(yàn)周期為28d;試驗(yàn)Ⅲ期:試驗(yàn)?zāi)膛Ｔ陲曃够A(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上灌注玉米面,使奶牛日糧淀粉含量達(dá)到27%,并補(bǔ)飼200g甘露寡糖(Mannan-oligosaccharides MOS),試驗(yàn)期周期為14d。本試驗(yàn)通過研究和分析高精料誘導(dǎo)的低乳脂奶牛補(bǔ)飼MOS對瘤胃發(fā)酵參數(shù)、瘤胃菌群、CAZy及血清指標(biāo)的影響,旨在探究MOS在奶牛乳脂調(diào)控等方面的作用機(jī)理,為MOS在奶牛健康養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供更多理論依據(jù)。試驗(yàn)結(jié)果如下:補(bǔ)飼MOS極顯著提高了低乳脂奶牛瘤胃pH值(P0.01);顯著提高了瘤胃中乙酸的含量和乙丙比(P0.05),顯著降低了丙酸的含量(P0.05);提高了 MCP的含量(P0.05);對NH3-N和丁酸無顯著影響(P0.05);并且提高了低乳脂奶牛的乳脂率。MOS對高精料誘導(dǎo)的低乳脂奶牛瘤胃細(xì)菌菌群結(jié)構(gòu)產(chǎn)生了影響。在門水平上,與試驗(yàn)Ⅱ期相比,低乳脂奶牛瘤胃中擬桿菌門(P0.05)、螺旋體門(P0.05)和放線菌門(P0.05)的豐度降低;厚壁菌門的豐度顯著提高(P0.05),且豐度顯著高于對照組(P0.05);纖維桿菌門的豐度增加,與試驗(yàn)Ⅱ期和對照組相比均極顯著增加(P0.01)。在屬水平上,普雷沃氏菌屬_1、普雷沃氏菌屬_7、乳桿菌屬和乳球菌屬的豐度均極顯著降低(P0.01);普雷沃氏菌屬_UCG-001和_UCG-300的豐度增加,其中普雷沃氏菌屬_UCG-001極顯著高于對照組(P0.01),普雷沃氏菌屬_UCG-003的豐度極顯著高于對照組和試驗(yàn)Ⅱ期(P0.01);解琥珀酸菌屬的豐度顯著增加(P0.05)。對瘤胃菌群進(jìn)行功能預(yù)測發(fā)現(xiàn),低乳脂奶牛補(bǔ)飼MOS降低了參與淀粉和蔗糖代謝的菌群豐度。補(bǔ)飼MOS改變了低乳脂奶牛瘤胃微生物CAZy的組成比例,與試驗(yàn)Ⅱ期相比,低乳脂奶牛瘤胃中纖維降解酶系 GH48(P0.01)、CBM2(P0.05)、CBM3(P0.05)、AA10(P0.01)的豐度均上調(diào);淀粉降解酶系GH24的豐度極顯著下調(diào)(P0.01);半纖維素降解酶系GH43和GH28的豐度顯著下調(diào)(P0.05);對纖維素降解酶系GH5的下調(diào)無緩解作用。補(bǔ)飼MOS可以顯著降低低乳脂奶牛血液中INS的含量(P0.05);顯著提高NEFA的含量(P0.05);對ALB和IgG含量的降低無緩解作用,試驗(yàn)Ⅲ期ALB和IgG的含量均極顯著低于對照組(P0.01);提高了低乳脂奶牛血液中IL-6、IgA和IgM的含量(P0.05);降低了 TNF-α的含量(P0.05);對 SOD、T-AOC、BHBA 和 GLU 均無顯著影響(P0.05)。綜上所述,高精料誘導(dǎo)的低乳脂奶牛添加MOS可以改善瘤胃發(fā)酵模式,通過提高瘤胃部分纖維降解菌的豐度,上調(diào)纖維素降解酶的豐度,降低了部分淀粉降解菌的豐度,下調(diào)淀粉降解酶的豐度,對穩(wěn)定瘤胃pH具有積極的作用;提高了瘤胃中乙酸的含量,降低了丙酸的含量,提高了低乳脂奶牛的乳脂率;抑制部分致病菌的增殖,在一定程度上提高奶牛機(jī)體的免疫能力;但同時也下調(diào)了部分半纖維素降解酶基因的豐度。
【學(xué)位單位】：寧夏大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：S823.5
【部分圖文】：

?４．０７±１．９７ｂ??２．２．４?ＭＯＳ對高精料誘導(dǎo)的低乳脂奶牛乳脂率的影響??由圖２－１可知，低乳脂奶牛模型構(gòu)建成功，模型構(gòu)建的第６－７ｄ乳脂開始下調(diào)，模型構(gòu)建的第１０－１２ｄ??低乳脂奶牛的乳脂率開始趨于穩(wěn)定，在添加ＭＯＳ后的第５－６ｄ奶牛的乳脂率開始增加，在第１０－１２ｄ??乳脂率開始趨于穩(wěn)定。說明補(bǔ)飼ＭＯＳ在一定程度上可以緩解因飼喂大量精飼料造成的乳脂下調(diào)的現(xiàn)??象，提高低乳脂奶牛的乳脂率。??１３??

經(jīng)Ｉｌｌｕｍｉｎａ?Ｍｉｓｅｑ測序結(jié)束后，除去低質(zhì)量序歹［Ｊ，通過序列拼接，應(yīng)用Ｍｏｔｈｕｒ根據(jù)９７％的序列??相似度，對序列進(jìn)行ＯＴＵ劃分，對樣品進(jìn)行ＯＴＵ的統(tǒng)計，見表３－１，并根據(jù)ＯＴＵｓ聚類分析結(jié)果，??分析不同樣品的聚類信息，依照其共有、特有的ＯＴＵｓ信息繪制韋恩圖（Ｖｅｎｎ?Ｇｒａｐｈ），見圖３－２。??由表３－１和圖３－２可知，低乳脂組奶牛（試驗(yàn)ＩＩ期，ＣＯ）瘤胃中細(xì)菌總數(shù)要略低于對照組奶牛（試??驗(yàn)Ｉ期，ＣＫ）瘤胃中細(xì)菌總數(shù)，但差異不顯著（Ｐ＞０．０５）；添加ＭＯＳ組奶牛（試驗(yàn)ＩＩＩ期，ＣＭ）瘤??胃細(xì)菌總數(shù)較試驗(yàn)ＩＩ期增加了?８．７２％，且差異極顯著（Ｐ＜０．０１），且試驗(yàn)ＩＩＩ期瘤胃細(xì)菌的總數(shù)略高于??對照組，說明高精料誘導(dǎo)奶牛會導(dǎo)致瘤胃細(xì)菌的總數(shù)降低，補(bǔ)飼ＭＯＳ可以提高奶牛瘤胃細(xì)菌的總數(shù)。??２０??

為了檢測測序得到的數(shù)據(jù)能否科學(xué)充分反映各個試驗(yàn)期瘤胃液細(xì)菌菌群的分布情況，本試驗(yàn)根??據(jù)獲得的ＯＴＵ數(shù)據(jù)，以隨機(jī)抽取的序列數(shù)與ＯＴＵ數(shù)來構(gòu)建曲線，做出每個樣品的稀釋曲線，可用??來說明樣本測序數(shù)據(jù)量是否足以反映物種多樣性。從圖３－３和圖３－４中可以看出，測序深度較小時，??ＯＴＵ數(shù)目變化劇烈，ＯＴＵ數(shù)目隨著測序深度的增加而大幅增加，當(dāng)測序深度達(dá)到５０００?ｒｅａｄｓ數(shù)時，??２１??
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本文編號：2857237