養(yǎng)羊業(yè)是我國畜牧業(yè)的重要組成部分,我國存欄綿、山羊約3.8億只。在草食家畜中,羊?qū)︼暳系霓D(zhuǎn)化率較高,采食范圍和適應(yīng)性較廣,可以充分利用其他家畜無法利用的資源。提高我國農(nóng)業(yè)資源的綜合產(chǎn)出率,對促進畜牧業(yè)經(jīng)濟發(fā)展、維護產(chǎn)業(yè)平衡和健康可持續(xù)發(fā)展具有重要的作用。繁殖性狀是養(yǎng)羊業(yè)重要的經(jīng)濟性狀。本實驗檢測了新吉細毛羊8個基因多態(tài)性,并對布魯拉美利奴羊與新吉細毛羊雜交后代卵巢顆粒細胞上8個基因表達量研究。旨在為提高綿羊、山羊繁殖力,增加產(chǎn)羔數(shù)工作中提供理論依據(jù)。本研究主要獲得以下結(jié)論:1、利用PCR-RFLP技術(shù)對126只新吉細毛羊BMPR-1B基因多態(tài)性分析,結(jié)果顯示新吉細毛羊不存在BMPR-1B基因多態(tài)性。推測BMPR-1B基因不是新吉細毛羊群體多胎性狀主效基因。2、利用PCR-SSCP技術(shù)對118只新吉細毛羊骨形態(tài)發(fā)生蛋白15基因(BMP15)、生長分化因子基因9(GDF9)的多態(tài)性研究。在BMP15基因研究中,發(fā)現(xiàn)P1引物擴增片段存在多態(tài)性,呈現(xiàn)三種基因型:AA型、AC型、CC型。該突變?yōu)锽MP15基因外顯子1上58-60位置CTT三個堿基缺失。新吉細毛羊?2值達到顯著水平,Hardy-Weinberg不平衡。不同基因之間新吉細毛羊平均產(chǎn)羔數(shù)差異不顯著(P0.05)。在GDF9基因研究中,新吉細毛羊不存在多態(tài)性。GDF9基因T477C突變不能作為新吉細毛羊多胎性狀遺傳標(biāo)記位點。3、利用ABI測序儀對119只新吉細毛羊Gn RHR、LHR、FSHR、PRLR、ESR基因多態(tài)性分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)FSHR基因不存在突變位點。Gn RHR、LHR、PRLR、ESR四個基因存在13個突變位點。Gn RHR基因存在A505G、G720C突變,LHR基因存在T1262G、A1991G、C2012T、A2032T、T2041A的突變,PRLR基因存在A1263G、C1544G突變,ESR基因存在A106T、C181T、G612A、C735T突變。在新吉細毛羊群體四個基因多態(tài)性與產(chǎn)羔數(shù)相關(guān)性分析結(jié)果中,Gn RHR基因G720C突變對新吉細毛羊產(chǎn)羔數(shù)影響顯著(P0.05)。其中CC型個體平均產(chǎn)羔數(shù)為2,比GG基因型、GC基因型分別多0.822、0.806個。ESR基因A106T突變對新吉細毛羊產(chǎn)羔數(shù)影響顯著。其中AA、AT、TT 3種基因型個體的平均產(chǎn)羔數(shù)分別為1.391、1.101、1.417。AA基因型、TT基因型平均產(chǎn)羔數(shù)比AT基因型分別多0.290、0.316個(P0.05)。AA基因型、TT基因型平均產(chǎn)羔數(shù)之間差異不顯著(P0.05)。4、利用實時熒光定量PCR分析了布魯拉美利奴羊與新吉細毛羊雜交1代++型和B+型卵巢顆粒細胞上BMPR-1B、BMP15、GDF9、Gn RHR、LHR、FSHR、ESR、AMH八個基因表達情況。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn):++型和B+型卵巢顆粒細胞的BMPR-1B、Gn RHR、LHR、FSHR基因m RNA表達水平差異不顯著(P0.05);B+型卵巢顆粒細胞的BMP15、AMH基因m RNA表達水平顯著高于++型(P0.05);GDF9、ESR基因m RNA表達水平極顯著低于++型(P0.01);ESR基因m RNA表達水平顯著高低于++型(P0.05)。實驗結(jié)果表明BMPR-1B、BMP15、GDF9、LHR、FSHR、PRLR基因不存在與新吉細毛羊多胎性狀相關(guān)的突變位點。而ESR的A106T突變推測可作為新吉細毛羊多胎性狀遺傳標(biāo)記。同時,新吉細毛羊群體引入Fec B基因后,繁殖性狀相關(guān)基因表達水平發(fā)生明顯改變。其實驗結(jié)果為Fec B基因提高綿羊產(chǎn)羔率的機理提供了實驗依據(jù)。
【學(xué)位單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：S826
【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻綜述
    第一章 綿羊多胎基因研究進展
        1.1 綿羊主效多胎基因
        1.2 生殖激素相關(guān)基因
        1.3 其他多胎候選基因
        1.4 小結(jié)
    第二章 基因多態(tài)性檢測方法
        2.1 限制性片段長度多態(tài)性（RFLP）
        2.2 單鏈構(gòu)象多態(tài)性（SSCP）
        2.3 高分辨率熔解曲線（HRM）
        2.4 測序技術(shù)
        2.5 其他技術(shù)
第二篇 研究內(nèi)容
    第一章 新吉細毛羊BMPR-1B基因多態(tài)性分析
        1.1 材料與方法
        1.2 結(jié)果
        1.3 討論
    第二章 新吉細毛羊BMP15、GDF9 基因多態(tài)性分析
        2.1 材料與方法
        2.2 結(jié)果
        2.3 討論
    第三章 新吉細毛羊生殖激素相關(guān)受體基因多態(tài)性分析
        3.1 材料與方法
        3.2 結(jié)果與分析
        3.3 討論
    第四章 八個繁殖相關(guān)基因在卵巢顆粒細胞上差異表達分析
        4.1 材料與方法
        4.2 實驗結(jié)果
        4.3 討論
結(jié)論
參考文獻
作者簡介
致謝

【參考文獻】

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本文編號：2852079