犬細(xì)菌性腹瀉是臨床中常見的疾病,主要是由于腸道中菌群比例失調(diào)而引發(fā)的。臨床治療一般選用抗生素加補(bǔ)液療法。近期,因抗生素的不合理使用而出現(xiàn)的耐藥菌株,使得細(xì)菌病的治療越來越復(fù)雜。芽孢桿菌作為安全性和抗逆性都極佳的益生菌已在畜牧行業(yè)被廣泛應(yīng)用,但對犬功效的報(bào)道還較少。因此,本研究旨在篩選優(yōu)良的犬源芽孢桿菌,研究其對動(dòng)物免疫功能的影響,以便為其日后在犬日糧中的合理使用奠定一定基礎(chǔ)。本研究采用熱處理法從犬糞中分離芽孢桿菌,通過抑菌試驗(yàn),藥物敏感性試驗(yàn),耐酸、膽鹽和高溫試驗(yàn)篩選出一株芽孢桿菌,經(jīng)形態(tài)學(xué)、生化試驗(yàn)和16S rDNA序列分析鑒定為枯草芽孢桿菌,命名為QY-20。以昆明鼠為試驗(yàn)動(dòng)物,觀察枯草芽孢桿菌對鼠傷寒沙門菌感染動(dòng)物的保護(hù)力。選取48只小鼠,隨機(jī)分為SP組、BS組、LB組和SL組,分別灌胃生理鹽水、10~8 CFU/mL枯草芽孢桿菌、10%腸胃寶益生菌、10~8 CFU/mL枯草芽孢桿菌和10%腸胃寶益生菌的等量混合菌劑,劑量均為0.2 mL/只,試驗(yàn)期四周。分別于試驗(yàn)開始第14天和第28天,每組隨機(jī)選擇3只小鼠,進(jìn)行眼球采血,無菌摘取胸腺、脾臟并收集盲腸內(nèi)容物,測出免疫器官指數(shù)以及盲腸內(nèi)容物中菌群的變化;用ELISA方法對收集到的血清進(jìn)行IgG、IL-4、INF-γ的檢測,試驗(yàn)第28天時(shí),將各組剩余小鼠以3LD_(50)腹腔注射鼠傷寒沙門菌,觀察枯草芽孢桿菌對小鼠的保護(hù)力,測出脾臟和腸內(nèi)容物中的荷菌量,并制作空腸石蠟包埋切片。結(jié)果表明:(1)隨著試驗(yàn)天數(shù)的增加,各試驗(yàn)組昆明鼠體重都有不同程度增長,BS組增長最明顯。(2)飼喂枯草芽孢桿菌QY-20能顯著增加小鼠盲腸中乳酸菌數(shù)目,降低大腸桿菌數(shù)目。(3)飼喂枯草芽孢桿菌QY-20后,BS組脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、血清中IgG、IL-4、IFN-γ水平較SP組均顯著或極顯著增加;SL組胸腺指數(shù)、血清中IL-4、IFN-γ水平較LB組均增加顯著。(4)BS組死亡率比SP組低66.7%,SL組死亡率比LB組低16.7%。(5)飼喂枯草芽孢桿菌QY-20能顯著或極顯著減少盲腸內(nèi)容物和脾臟中鼠傷寒沙門菌的數(shù)量。(6)攻毒后SP組腸道損傷最嚴(yán)重,BS組損傷最輕微;SL組損傷較LB組輕微。從以上結(jié)果可知,枯草芽孢桿菌QY-20可以提高昆明鼠的免疫功能和對鼠傷寒沙門菌感染的抵抗力,其與腸胃寶益生菌共同作用效果優(yōu)于后者單獨(dú)使用。
【學(xué)位單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S816
【部分圖文】：

圖 1.1 芽孢桿菌菌落形態(tài) 圖 1.2 芽孢桿菌液體培養(yǎng)形態(tài)Fig.1.1 Colonial morphology of Bacillus Fig.1.2 Bacillus liquid culture morpho2 芽孢桿菌的篩選2.1 革蘭染色結(jié)果鏡檢視野中可見兩端呈紫色的桿菌，中間有一個(gè)與菌體同寬的橢圓形未。具體形態(tài)如圖 1.3 所示。2.2 芽孢染色結(jié)果鏡檢視野中呈現(xiàn)中央綠色，兩端粉紅色的桿狀菌體，兩端顏色較深。具圖 1.4 所示。

圖 1.1 芽孢桿菌菌落形態(tài) 圖 1.2 芽孢桿菌液體培養(yǎng)形態(tài)Fig.1.1 Colonial morphology of Bacillus Fig.1.2 Bacillus liquid culture morpho2 芽孢桿菌的篩選2.1 革蘭染色結(jié)果鏡檢視野中可見兩端呈紫色的桿菌，中間有一個(gè)與菌體同寬的橢圓形未。具體形態(tài)如圖 1.3 所示。2.2 芽孢染色結(jié)果鏡檢視野中呈現(xiàn)中央綠色，兩端粉紅色的桿狀菌體，兩端顏色較深。具圖 1.4 所示。

圖 1.1 芽孢桿菌菌落形態(tài) 圖 1.2 芽孢桿菌液體培養(yǎng)形態(tài)Fig.1.1 Colonial morphology of Bacillus Fig.1.2 Bacillus liquid culture morphol孢桿菌的篩選 革蘭染色結(jié)果檢視野中可見兩端呈紫色的桿菌，中間有一個(gè)與菌體同寬的橢圓形未著具體形態(tài)如圖 1.3 所示。 芽孢染色結(jié)果檢視野中呈現(xiàn)中央綠色，兩端粉紅色的桿狀菌體，兩端顏色較深。具體 1.4 所示。
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2844556