籠養(yǎng)蛋雞骨質疏松癥(cage layer osteoporosis,CLO)是當前籠養(yǎng)蛋雞生產中易發(fā)的疾病之一。目前大多數(shù)學者認為,該病的發(fā)生是由于蛋雞體內鈣磷平衡被打破所造成的。蛋雞鈣磷代謝過程由十二指腸、腎臟、蛋殼腺和骨共同調節(jié)。在產蛋后期,蛋雞需要及時補充大量的鈣質以滿足產蛋需求,否則會動用骨鈣,長此以往最終會引發(fā)骨質疏松癥。但到今天為止,CLO發(fā)生的確切機制尚不清楚。本試驗通過誘導CLO模型,檢測CLO模型血液、十二指腸和腎臟中與鈣磷代謝相關的因子、骨生物學指標以及腎臟組織形態(tài)學的變化,以期從中發(fā)現(xiàn)規(guī)律,揭示CLO的發(fā)病機制,為生產中CLO的防治提供理論依據(jù)。將海蘭褐商品蛋雞(73周齡共216只)作為試驗動物,進行低鈣日糧的飼喂以制備CLO模型,比色法、微板法檢測血清中與鈣磷代謝相關生化指標變化;常規(guī)方法檢測骨指數(shù)、骨密度、脛骨三點彎曲載荷和最大應力;micro-CT掃描脛骨,并對脛骨進行TRAP染色制作骨切片,觀測骨組織形態(tài)學變化;Real time PCR方法檢測十二指腸、腎臟中與鈣磷代謝相關因子mRNA表達水平;HE染色和電鏡觀察腎臟組織形態(tài)學變化情況。試驗結果顯示:1.本試驗成功制備出CLO模型,CLO發(fā)生時,血清Ca、P含量降低;堿性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)含量升高;骨骼生物力學指標降低;皮質骨和髓質骨溶解,破骨細胞(OC)增多,脛骨皮質骨部分變薄,髓質骨部分骨小梁數(shù)量減少、體積變小。2.骨質疏松蛋雞十二指腸鈣結合蛋白(CaBP-D28k)和維生素D受體(VDR)mRNA表達量顯著上調,鈉磷協(xié)同轉運蛋白2b(NaPi-Ⅱb)mRNA表達量顯著下調,隨著CLO程度的加劇漿膜鈣ATP酶(PMCA1b)mRNA表達量先上調后下調,鈉鈣交換體(NCX1)mRNA表達量先下調后上調,表明CLO時十二指腸對鈣的吸收能力增強,對磷的吸收能力減弱。3.骨質疏松蛋雞腎臟中24-羥化酶(Cyp24al)、鈣通道瞬時感受器電位香草素受體5(TRPV5)、鈣通道瞬時感受器電位香草素受體6(TRPV6)、NCX1和鈉磷協(xié)同轉運蛋白2a(NaPi-IIa)mRNA表達量顯著下調,甲狀旁腺激素受體(PTHR)、CaBP-D28k、PMCA1b、成纖維生長因子受體1(FGFR1)、成纖維生長因子受體3(FGFR3)、成纖維生長因子受體4(FGFR4)和Klotho mRNA表達量上調,表明腎臟對鈣的重吸收能增強,對磷的吸收能力減弱,對磷的排泄能力增強。4、骨質疏松蛋雞腎小管壁層破裂,腎小管上皮細胞胞質空泡化,腎小管內有滲出物,線粒體破裂,線粒體膨大、嵴溶解或斷裂,表明CLO時腎臟結構發(fā)生破壞。本試驗結果表明:蛋雞發(fā)生CLO時,骨重建活動活躍,但破骨活動強于成骨活動,骨骼生物學指標降低,十二指腸和腎臟對鈣的吸收/重吸收能力增強,十二指腸和腎臟對磷的吸收能力減弱,腎臟對磷的排泄能力增強。
【學位單位】：沈陽農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：S858.31
【部分圖文】：

17對照組 低鈣模型 1 組 低鈣模型 2 組圖 13 77 周齡 CLO 脛骨 micro-CT 掃描結果Fig13 CLO tibial micro-CT scan results of 77 weeks old age

對照組 低鈣模型 1 組 低鈣模型 2 組圖 14 79 周齡 CLO 脛骨 micro-CT 掃描結果Fig14 CLO tibial micro-CT scan results of 79 weeks old age3.2.3 脛骨 TRAP 染色結果：77、79 周齡 CLO 脛骨 TRAP 染色結果如圖 15 和圖 16 所示，在鏡下放大 200 倍可

對照組 低鈣模型 1 組 低鈣模型 2 組圖 16 79 周齡脛骨 TRAP 染色觀察 OC 數(shù)量（200×）Fig16 Tibial TRAP staining at 79 weeks of age to observe the number of OC（200×）3.3 十二指腸中鈣磷代謝相關因子表達檢測結果十二指腸中的 1,25-(OH)2VD 與其受體 VDR 結合后，可促進進入細胞內 Ca2+與

【參考文獻】

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本文編號：2832871