沙冬青是一種超旱生灌木,經(jīng)歷了古地中海退縮、氣候干旱化過程中幸存的第三紀(jì)古亞熱帶常綠闊葉林孑遺植物。是我國西北干旱區(qū)唯一四季常青的闊葉灌木植物。沙冬青不僅具有固沙、綠化、觀賞等功能,還有很多的藥理作用價值。已有研究表明,沙冬青種子總黃酮具有良好的抗病毒活性與免疫活性,但到目前為止,國內(nèi)外有關(guān)沙冬青種子總黃酮抗氧化特性及對小鼠黏膜免疫活性未見報道。因此,深入探索沙冬青種子總黃酮抗氧化特性及對機(jī)體黏膜免疫的影響具有重要意義。本試驗(yàn)進(jìn)行了以下研究:(1)采用提純后沙冬青種子總黃酮(含量86.78%)進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)。(2)沙冬青種子總黃酮抗氧化活性研究。采用體外Fenton體系產(chǎn)生羥基自由基(·OH)和鄰苯三酚自氧化法產(chǎn)生超氧自由基(O_2~-),測定總黃酮的清除作用。同時,采用D-半乳糖復(fù)制小鼠衰老模型,檢測總黃酮對衰老小鼠血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影響。(3)采用不同濃度劑量沙冬青種子總黃酮灌胃小鼠,連續(xù)灌胃15 d,取十二指腸、空腸、回腸常規(guī)石蠟包埋切片,統(tǒng)計(jì)、分析上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞和杯狀細(xì)胞的動態(tài)變化規(guī)律。結(jié)果表明:(1)沙冬青種子總黃酮(含量86.78%)急性毒性試驗(yàn)劑量≥5000mg/kg未見動物死亡,符合《食品毒理學(xué)》、《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》、《動物毒物學(xué)》等無毒化合物標(biāo)準(zhǔn),屬于無毒化合物。(2)沙冬青種子總黃酮對·OH和O_2~-都具有良好的清除能力。在濃度為1250μg/m L時,對·OH和O_2~-清除效果最好,清除率分別達(dá)到了96.45%和50.39%。(3)沙冬青種子總黃酮可顯著提高小鼠血清中的超氧化物歧化酶(SOD)活力。與衰老模型組比較,高、中、低三個劑量組均能顯著提高SOD的活性(P0.01),其中沙冬青種子總黃酮中劑量組(150mg/Kg·d)對SOD活性提高效果最佳,高達(dá)102.42±2.11(U·mL~(-1))。(4)沙冬青種子總黃酮可顯著降低小鼠血清中丙二醛(MDA)含量。與衰老模型組比較,高、中、低三個劑量組均能顯著降低小鼠血清中丙二醛MDA含量(P0.01),其中沙冬青種子總黃酮中劑量組(150mg/Kg·d)降低效果最明顯,達(dá)到15.16±0.27(nmol·mL~(-1))。(5)沙冬青種子總黃酮可明顯促進(jìn)小鼠小腸黏膜上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞(IEL)和黏膜杯狀細(xì)胞的增殖。與空白組比較,沙冬青種子總黃酮高劑量組(250mg/Kg·d)可以顯著提升十二指腸、空腸、回腸IEL與杯狀細(xì)胞數(shù)量(P0.05,P0.01)。上述研究表明,沙冬青種子總黃酮為無毒化合物;并且具有良好的抗氧化活性。除此以外,沙冬青種子總黃酮對小鼠腸道黏膜免疫活性細(xì)胞具有誘導(dǎo)增殖作用。
【學(xué)位單位】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S853.7
【部分圖文】：

圖 6 可知，沙冬青種子總黃酮對由 Fenton 體系產(chǎn)生的·OH 具有良好的清除作用，在由低到高的劑量濃度中，對·OH 的清除率也逐漸上升。當(dāng)沙冬青種子總黃酮劑量濃度為 1250μg/mL 時，清除·OH 效果最高達(dá)到 96.45%。Vit C 對由 Fenton 體系產(chǎn)生的·OH 清除效果良好且穩(wěn)定，在 Vit C 劑量濃度為

圖 7 可知，沙冬青種子總黃酮對由鄰苯三酚自氧化法產(chǎn)生的 O2-有良好的清除作用，在由低到高的總酮濃度組中，對 O2-的清除率也逐漸上升。沙冬青種子總黃酮劑量濃度為 1250μg/mL 時，清除 O2-效果最高達(dá)到 50.39%。it C 對由鄰苯三酚自氧化法產(chǎn)生的 O2-清除效果也隨著劑量濃度的增加而增

圖 8 圖 9 可知，模型組與空白組對比，模型組小鼠血清中 SOD 活力為 83.03±4.25，MDA 含量為 52.68±3.58，空白組 SOD 含量為 98.12±4.39，MDA 為 16.34±0.77，差異極顯著（P＜0.01），提示復(fù)制 D-gal 衰老模型成功。與模型組比較，低、中、高三個沙冬青種子總黃酮劑量組均能極顯著提高小鼠血清中 SOD 的活性（P＜0.01）和降低 MDA 含量（P＜0.01）。與空白組比較，高、中、低三個沙冬青種子總黃酮劑量組沒有明顯的活力與含量變化。5 討論本試驗(yàn)采用 D-gal 致小鼠衰老模型的構(gòu)建，檢測沙冬青種子總黃酮對致小鼠衰老的血清中 SOD 和 MDA 的影響。顯示出沙冬青種子總黃酮具有很好的抗氧化作用，低、中、高三個沙冬青種子總黃酮劑量組與模型組比較，三個沙冬青種子總黃酮劑量組均能極顯著提高小鼠血清中 SOD 的活性（P＜0.01）和降低 MDA 含量（P＜0.01）。并且在沙冬青種子總黃酮中劑量組（150mg/Kg·d）

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本文編號：2831863