沙冬青是一種超旱生灌木,經(jīng)歷了古地中海退縮、氣候干旱化過程中幸存的第三紀古亞熱帶常綠闊葉林孑遺植物。是我國西北干旱區(qū)唯一四季常青的闊葉灌木植物。沙冬青不僅具有固沙、綠化、觀賞等功能,還有很多的藥理作用價值。已有研究表明,沙冬青種子總黃酮具有良好的抗病毒活性與免疫活性,但到目前為止,國內(nèi)外有關沙冬青種子總黃酮抗氧化特性及對小鼠黏膜免疫活性未見報道。因此,深入探索沙冬青種子總黃酮抗氧化特性及對機體黏膜免疫的影響具有重要意義。本試驗進行了以下研究:(1)采用提純后沙冬青種子總黃酮(含量86.78%)進行急性毒性試驗。(2)沙冬青種子總黃酮抗氧化活性研究。采用體外Fenton體系產(chǎn)生羥基自由基(·OH)和鄰苯三酚自氧化法產(chǎn)生超氧自由基(O_2~-),測定總黃酮的清除作用。同時,采用D-半乳糖復制小鼠衰老模型,檢測總黃酮對衰老小鼠血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影響。(3)采用不同濃度劑量沙冬青種子總黃酮灌胃小鼠,連續(xù)灌胃15 d,取十二指腸、空腸、回腸常規(guī)石蠟包埋切片,統(tǒng)計、分析上皮內(nèi)淋巴細胞和杯狀細胞的動態(tài)變化規(guī)律。結果表明:(1)沙冬青種子總黃酮(含量86.78%)急性毒性試驗劑量≥5000mg/kg未見動物死亡,符合《食品毒理學》、《藥理實驗方法學》、《動物毒物學》等無毒化合物標準,屬于無毒化合物。(2)沙冬青種子總黃酮對·OH和O_2~-都具有良好的清除能力。在濃度為1250μg/m L時,對·OH和O_2~-清除效果最好,清除率分別達到了96.45%和50.39%。(3)沙冬青種子總黃酮可顯著提高小鼠血清中的超氧化物歧化酶(SOD)活力。與衰老模型組比較,高、中、低三個劑量組均能顯著提高SOD的活性(P0.01),其中沙冬青種子總黃酮中劑量組(150mg/Kg·d)對SOD活性提高效果最佳,高達102.42±2.11(U·mL~(-1))。(4)沙冬青種子總黃酮可顯著降低小鼠血清中丙二醛(MDA)含量。與衰老模型組比較,高、中、低三個劑量組均能顯著降低小鼠血清中丙二醛MDA含量(P0.01),其中沙冬青種子總黃酮中劑量組(150mg/Kg·d)降低效果最明顯,達到15.16±0.27(nmol·mL~(-1))。(5)沙冬青種子總黃酮可明顯促進小鼠小腸黏膜上皮內(nèi)淋巴細胞(IEL)和黏膜杯狀細胞的增殖。與空白組比較,沙冬青種子總黃酮高劑量組(250mg/Kg·d)可以顯著提升十二指腸、空腸、回腸IEL與杯狀細胞數(shù)量(P0.05,P0.01)。上述研究表明,沙冬青種子總黃酮為無毒化合物;并且具有良好的抗氧化活性。除此以外,沙冬青種子總黃酮對小鼠腸道黏膜免疫活性細胞具有誘導增殖作用。
【學位單位】：甘肅農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：S853.7
【部分圖文】：

圖 6 可知，沙冬青種子總黃酮對由 Fenton 體系產(chǎn)生的·OH 具有良好的清除作用，在由低到高的劑量濃度中，對·OH 的清除率也逐漸上升。當沙冬青種子總黃酮劑量濃度為 1250μg/mL 時，清除·OH 效果最高達到 96.45%。Vit C 對由 Fenton 體系產(chǎn)生的·OH 清除效果良好且穩(wěn)定，在 Vit C 劑量濃度為

圖 7 可知，沙冬青種子總黃酮對由鄰苯三酚自氧化法產(chǎn)生的 O2-有良好的清除作用，在由低到高的總酮濃度組中，對 O2-的清除率也逐漸上升。沙冬青種子總黃酮劑量濃度為 1250μg/mL 時，清除 O2-效果最高達到 50.39%。it C 對由鄰苯三酚自氧化法產(chǎn)生的 O2-清除效果也隨著劑量濃度的增加而增

圖 8 圖 9 可知，模型組與空白組對比，模型組小鼠血清中 SOD 活力為 83.03±4.25，MDA 含量為 52.68±3.58，空白組 SOD 含量為 98.12±4.39，MDA 為 16.34±0.77，差異極顯著（P＜0.01），提示復制 D-gal 衰老模型成功。與模型組比較，低、中、高三個沙冬青種子總黃酮劑量組均能極顯著提高小鼠血清中 SOD 的活性（P＜0.01）和降低 MDA 含量（P＜0.01）。與空白組比較，高、中、低三個沙冬青種子總黃酮劑量組沒有明顯的活力與含量變化。5 討論本試驗采用 D-gal 致小鼠衰老模型的構建，檢測沙冬青種子總黃酮對致小鼠衰老的血清中 SOD 和 MDA 的影響。顯示出沙冬青種子總黃酮具有很好的抗氧化作用，低、中、高三個沙冬青種子總黃酮劑量組與模型組比較，三個沙冬青種子總黃酮劑量組均能極顯著提高小鼠血清中 SOD 的活性（P＜0.01）和降低 MDA 含量（P＜0.01）。并且在沙冬青種子總黃酮中劑量組（150mg/Kg·d）

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