適當(dāng)?shù)牡蜏靥幚砜梢栽鰪?qiáng)動(dòng)物的免疫功能和抗病能力。本研究旨在探究適宜的冷刺激促進(jìn)肉仔雞建立冷適應(yīng)的機(jī)制及耐受范圍,以提高肉仔雞對(duì)冷應(yīng)激的抵抗力和機(jī)體的免疫力。將600只健康的1日齡愛拔益加(AA)雌性商品肉雛雞隨機(jī)分為5組,每組4個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)30只雞,分別飼養(yǎng)在5個(gè)人工氣候室中。對(duì)照組于1-42日齡在常規(guī)飼養(yǎng)溫度條件下飼養(yǎng),即1-3日齡為34℃,4-7日齡為33℃,此后,每?jī)商旖档?℃,于32日齡降到20℃后維持此溫度直至42日齡早07:00;其余4組作為冷刺激組,1-7日齡的飼養(yǎng)溫度與對(duì)照組相同,從8日齡早07:00開始,4個(gè)冷刺激組的溫度分別比對(duì)照組低3℃、6℃、9℃和12℃,各組的溫度分別于32日齡、26日齡、20日齡和14日齡早07:00降低到17℃,并維持此溫度一直到42日齡早07:00,于42日齡早07:00起,對(duì)5組肉仔雞同時(shí)進(jìn)行為期24h的急性冷應(yīng)激處理,溫度設(shè)為7℃。第一部分:冷刺激模型的篩選比較各組肉仔雞的生產(chǎn)性能指標(biāo)(平均日采食量、平均日增重、料肉比、42d體重、試驗(yàn)全程的成活率)、行為指標(biāo)(采食、趴臥、行走、站立等狀態(tài)性行為以及飲水、伸展、舒適等事件性行為)和福利指標(biāo)(FA腿圍、FA腿長、FA翅長),得出如下結(jié)果:(1)與對(duì)照組相比,低9℃組和低12℃組的平均日增重、42d體重和成活率顯著降低(P0.05),平均日采食量和料肉比顯著升高(P0.05);低6℃組的平均日增重顯著降低(P0.05),平均日采食量和料肉比顯著升高(P0.05);低3℃組的平均日采食量、平均日增重、料肉比和42d體重未見顯著差異(P0.05),成活率顯著高于對(duì)照組和其余冷刺激組(P0.05)。(2)在整個(gè)行為觀察周期(2-6周)內(nèi),與對(duì)照組相比,低9℃組和低12℃組的采食行為、站立行為、行走行為和飲水行為顯著增加(P0.05),趴臥行為、舒適行為和伸展行為顯著降低(P0.05);低6℃組的采食行為、站立行為和飲水行為顯著增加(P0.05),趴臥行為、舒適行為和伸展行為顯著降低(P0.05);低3℃組的采食行為、趴臥行為、行走行為、飲水行為和舒適行為與對(duì)照組無顯著差異(P0.05),站立行為顯著增加(P0.05),伸展行為顯著降低(P0.05)。(3)經(jīng)過34天的冷刺激后,低6℃組、低9℃組和低12℃組的FA腿長和FA腿圍高于對(duì)照組,但未達(dá)到差異顯著水平(P0.05),低3℃組的FA腿長和FA腿圍顯著低于對(duì)照組(P0.05);各冷刺激組的FA翅長均低于對(duì)照組,但未達(dá)到差異顯著水平(P0.05)。得出如下結(jié)論:隨著冷刺激溫度的降低,肉仔雞的冷應(yīng)激反應(yīng)逐漸加劇,而低3℃的冷刺激條件可促進(jìn)肉仔雞冷適應(yīng)的建立。通過對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能、行為和福利指標(biāo)的分析,我們發(fā)現(xiàn)比常規(guī)飼養(yǎng)溫度低12℃的冷刺激條件導(dǎo)致了肉仔雞的冷應(yīng)激,顯著降低了肉仔雞生產(chǎn)性能和成活率,并顯著改變了肉仔雞的行為表現(xiàn)。而比常規(guī)飼養(yǎng)溫度低3℃的冷刺激條件不但對(duì)肉仔雞的生產(chǎn)性能和行為無不良影響,還顯著提高了肉仔雞的成活率和福利水平。因此,接下來我們研究了常規(guī)溫度飼養(yǎng)組(對(duì)照組)、比常規(guī)飼養(yǎng)溫度低3℃組(篩選出來的適宜冷刺激組)以及比常規(guī)飼養(yǎng)溫度低12℃組(冷應(yīng)激組,負(fù)面對(duì)照)的肉仔雞在長期冷刺激條件下,其生理指標(biāo)、抗氧化功能、免疫功能以及對(duì)急性冷應(yīng)激抵抗能力的變化。第二部分:長期冷刺激對(duì)肉仔雞生理、抗氧化、免疫功能以及對(duì)急性冷應(yīng)激抵抗能力的影響分別檢測(cè)14日齡、21日齡、28日齡、35日齡、42日齡和43日齡各組肉仔雞血清中的免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)、細(xì)胞因子(IL-2、IL-4、IFN-γ、TNF-α)以及急性期蛋白(AGP、CP、OVT)的水平;檢測(cè)14日齡、21日齡、28日齡、35日齡、42日齡和43日齡各組肉仔雞的氣管、回腸和胸腺組織中氧化(MDA、iNOS、NO、H_2O_2)與抗氧化(SOD、CAT、GSH-Px)指標(biāo),免疫相關(guān)基因(IgA、IgM、IgG、AvBD1、AvBD6、AvBD7、AvBD9、AvBD10、AvBD12)、細(xì)胞因子(IL-4、IFN-γ、TNF-α)、熱休克蛋白(HSP27、HSP40、HSP60、HSP70、HSP90)和炎癥因子(NF-κB、iNOS、COX-2、PTGEs)的mRNA表達(dá)量;以及檢測(cè)急性冷應(yīng)激前后各組肉仔雞氣管、回腸和胸腺組織中熱休克蛋白(HSP60、HSP70、HSP90)的蛋白表達(dá)量和3個(gè)組織的顯微與超微結(jié)構(gòu),得出如下結(jié)果:(1)在34天的冷刺激后,與對(duì)照組相比,低12℃組肉仔雞血清中免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)含量降低(P0.05),急性期蛋白(AGP、CP)和炎癥相關(guān)細(xì)胞因子(IL-4、TNF-α)含量升高(P0.05);低3℃組肉仔雞血清中免疫球蛋白(IgA、IgM和IgG)含量增加(P0.05),急性期蛋白(AGP、CP、OVT)和炎癥相關(guān)細(xì)胞因子(IL-4、TNF-α)含量與對(duì)照組差別不大(P0.05)。(2)在34天的冷刺激后,與對(duì)照組相比,低12℃組肉仔雞抗氧化酶(氣管和回腸中的SOD、GSH-Px,胸腺中SOD、CAT、GSH-Px)活性降低(P0.05),自由基(氣管中iNOS、MDA、H_2O_2,回腸中iNOS、MDA、NO、H_2O_2,胸腺中MDA、NO、H_2O_2)水平增加(P0.05);低3℃組肉仔雞抗氧化酶(氣管中SOD、CAT、GSH-Px,回腸中GSH-Px,胸腺中SOD、GSH-Px)活性增強(qiáng)(P0.05),自由基水平未見增加(P0.05)。(3)經(jīng)過34天的冷刺激后,與對(duì)照組相比,低12℃組肉仔雞免疫球蛋白(氣管中IgA、IgG,回腸和胸腺中IgA、IgM、IgG)和抗菌肽(氣管和回腸中AvBD1、AvBD6、AvBD7、AvBD9、AvBD10,胸腺中AvBD1、AvBD6、AvBD7、AvBD10、AvBD12)mRNA表達(dá)量降低(P0.05);低3℃組肉仔雞免疫球蛋白(氣管、回腸和胸腺中IgA、IgM、IgG)和抗菌肽(氣管和回腸中AvBD1、AvBD6、AvBD7、AvBD9、AvBD10、AvBD12,胸腺中AvBD6、AvBD7、AvBD9、AvBD10、AvBD12)mRNA表達(dá)量增加(P0.05)。(4)經(jīng)過34天的冷刺激后,與對(duì)照組相比,低12℃組肉仔雞細(xì)胞因子(氣管、回腸和胸腺中IL-4、TNF-α)和炎癥因子(氣管、回腸和胸腺中NF-κB、iNOS、COX-2、PTGEs)mRNA表達(dá)量升高(P0.05);低3℃組肉仔雞細(xì)胞因子(氣管、回腸和胸腺中IL-4、TNF-α)和炎癥因子(氣管、回腸和胸腺中NF-κB、iNOS、COX-2、PTGEs)mRNA表達(dá)量未見升高(P0.05)。(5)經(jīng)過34天的冷刺激后,與對(duì)照組相比,低12℃組肉仔雞熱休克蛋白(氣管、回腸和胸腺中HSP27、HSP40、HSP60、HSP70、HSP90)mRNA表達(dá)量以及(氣管、回腸和胸腺中HSP60、HSP70、HSP90)蛋白表達(dá)量增加(P0.05);低3℃組肉仔雞熱休克蛋白(氣管、回腸和胸腺中HSP27、HSP40、HSP60、HSP70、HSP90)mRNA表達(dá)量以及(氣管中HSP60、HSP70、HSP90,回腸中HSP60,胸腺中HSP70、HSP90)蛋白表達(dá)量未見升高(P0.05)。(6)經(jīng)過34天的冷刺激后,低12℃組肉仔雞的氣管、回腸和胸腺組織嚴(yán)重?fù)p傷,細(xì)胞結(jié)構(gòu)遭到破壞,甚至發(fā)生細(xì)胞凋亡;低3℃組肉仔雞相對(duì)應(yīng)的3個(gè)組織和細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常,并未造成肉仔雞的組織損傷。(7)急性冷應(yīng)激后,低3℃組肉仔雞血清中免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)和免疫相關(guān)細(xì)胞因子(IL-2、IFN-γ)含量高于對(duì)照組和低12℃組(P0.05),而細(xì)胞因子(IL-4、TNF-α)和CP含量低于對(duì)照組和低12℃組(P0.05)。(8)急性冷應(yīng)激后,低3℃組肉仔雞抗氧化酶(氣管和胸腺中SOD,各組織中的CAT、GSH-Px)活性高于對(duì)照組和低12℃組(P0.05),而自由基(氣管和胸腺中MDA,回腸和胸腺中NO,回腸中H_2O_2)水平低于對(duì)照組和低12℃組(P0.05)。(9)急性冷應(yīng)激后,低3℃組肉仔雞各組織中免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)和抗菌肽(AvBD1、AvBD6、AvBD7、AvBD9、AvBD10、AvBD12)mRNA表達(dá)量,以及氣管、胸腺中IFN-γmRNA表達(dá)量高于對(duì)照組和低12℃組(P0.05)。(10)急性冷應(yīng)激后,低3℃組肉仔雞細(xì)胞因子(回腸和胸腺中IL-4,各組織中TNF-α)和炎癥因子(回腸中NF-κB,氣管和回腸中iNOS,回腸和胸腺中COX-2、PTGEs)mRNA表達(dá)量低于對(duì)照組和低12℃組(P0.05)。(11)急性冷應(yīng)激后,低3℃組肉仔雞各組織中熱休克蛋白(HSP27、HSP40、HSP90)mRNA表達(dá)量,氣管、胸腺中HSP60 mRNA表達(dá)量,以及氣管和回腸中HSP70 mRNA表達(dá)量低于對(duì)照組和低12℃組(P0.05);低3℃組肉仔雞熱休克蛋白(氣管中HSP60、HSP70、HSP90,回腸和胸腺中HSP60、HSP90)的蛋白表達(dá)量低于對(duì)照組和低12℃組(P0.05)。(12)急性冷應(yīng)激后,對(duì)照組和低12℃組肉仔雞氣管、回腸和胸腺組織嚴(yán)重?fù)p傷,細(xì)胞結(jié)構(gòu)遭到破壞,甚至發(fā)生細(xì)胞凋亡;低3℃組肉仔雞各組織結(jié)構(gòu)相對(duì)完整,細(xì)胞核形態(tài)正常,氣管和胸腺組織有輕微的線粒體嵴減少現(xiàn)象。得到如下結(jié)論:(1)低3℃的冷刺激條件在一定程度上增強(qiáng)了肉仔雞氣管、回腸和胸腺組織的抗氧化能力、免疫功能以及對(duì)急性冷應(yīng)激的抵抗能力;而低12℃的冷刺激條件導(dǎo)致了肉仔雞的冷應(yīng)激反應(yīng),誘導(dǎo)了其組織的氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng),降低了肉仔雞的免疫功能。(2)冷適應(yīng)可在一定程度上緩解冷應(yīng)激導(dǎo)致的氧化應(yīng)激、熱休克蛋白和炎癥因子的高表達(dá),這可能是冷適應(yīng)對(duì)機(jī)體的保護(hù)機(jī)制。綜上所述,在肉仔雞8-42日齡時(shí)對(duì)其進(jìn)行長達(dá)34天的低3℃的冷刺激,對(duì)肉仔雞的生產(chǎn)性能及行為無不良影響,并提高了肉仔雞的成活率;低3℃的冷刺激在一定程度上提高了機(jī)體的抗氧化能力、免疫水平以及對(duì)急性冷應(yīng)激的抵抗能力,為東北寒區(qū)肉雞養(yǎng)殖的適宜溫度提供了理論和技術(shù)支持。
【學(xué)位單位】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：S831
【部分圖文】：

圖 3-4 長期冷刺激對(duì)肉仔雞血清中 IgG 含量的影響Figure 3-4 Effects of long-term cold stimulation on IgG content in serum of broiler chickens急性冷應(yīng)激對(duì)肉仔雞血清中免疫球蛋白含量的影響見圖 3-5。急性冷應(yīng)激后（43 日齡）與 42 日齡相比，對(duì)照組 IgA、IgM 和 IgG 含量均顯著降低（P<0.05）；低 3℃組 IgM 和 Ig含量顯著降低（P<0.05），IgA 含量降低不顯著（P>0.05）；低 12℃組 IgA 和 IgG 含量顯著降低（P<0.05），IgM 含量降低不顯著（P>0.05）；低 3℃組的 IgA、IgM 和 IgG 含量顯著高于對(duì)照組和低 12℃組（P<0.05）；對(duì)照組 IgA 和 IgG 含量顯著高于低 12℃組（P<0.05），IgM 含量與低 12℃組無顯著差異（P>0.05）。ckxabyzbxybzkbkyayzazayxbybxcz02468101214d 21d 28d 35d 42d血清中IgG含量(mg/ml)

圖 3-9 長期冷刺激對(duì)肉仔雞血清中 TNF-α 含量的影響3-9 Effects of long-term cold stimulation on TNF-α content in serum of broiler chic冷應(yīng)激對(duì)肉仔雞血清中細(xì)胞因子含量的影響見圖 3-10。急性冷應(yīng)激后（43 日相比，對(duì)照組 IL-2 含量降低不顯著（P>0.05），IFN-γ 含量顯著降低（P<0.05-α 含量顯著升高（P<0.05）；低 3℃組 IL-2 和 TNF-α 含量升高不顯著（P>0.05）低不顯著（P>0.05），IL-4 含量顯著升高（P<0.05）；低 12℃組的 IL-2 含量降低05），IFN-γ 含量顯著降低（P<0.05），IL-4 和 TNF-α 含量顯著升高（P<0.05）。低 IFN-γ 含量顯著高于對(duì)照組和低 12℃組（P<0.05），IL-4 和 TNF-α 含量顯著低 12℃組（P<0.05）；對(duì)照組 IL-2 和 IFN-γ 含量與低 12℃組無顯著差異（P>0.顯著高于低 12℃組（P<0.05），TNF-α 含量顯著低于低 12℃組（P<0.05）。bz bzbxybxbybzbzbxybxbyazazaz02040608014d 21d 28d 35d 42d血清中TNF-α含量

：AAGP 含量；B CP 含量；C OVT 含量圖 3-14 急性冷應(yīng)激對(duì)肉仔雞血清中急性期蛋白含量的影響Figure 3-14 Effects of ACS on contents of acute phase proteins in serum of broiler chickens.7 長期冷刺激對(duì)肉仔雞抗氧化功能的影響.7.1 對(duì)氣管、回腸和胸腺組織中 SOD 活性的影響冷刺激溫度、冷刺激時(shí)間以及二者的交互作用對(duì)肉仔雞氣管、回腸和胸腺中 SOD 活性均顯著影響（P<0.05）。氣管中 SOD 活性的變化見圖 3-15。14 日齡時(shí)，對(duì)照組和低 3℃組 SOD 活性無顯著差異P>0.05），二者均顯著低于低 12℃組（P<0.05）；21 日齡時(shí)，對(duì)照組和低 12℃組 SOD 活性顯著差異（P>0.05），二者均顯著低于低 3℃組（P<0.05）；28 和 35 日齡時(shí)，對(duì)照組和低 3℃ SOD 活性無顯著差異（P>0.05），二者均顯著高于低 12℃組（P<0.05）；42 日齡時(shí)，低 3℃ SOD 活性顯著高于對(duì)照組（P<0.05），低 12℃組 SOD 活性顯著低于對(duì)照組（P<0.05）�；啬c中 SOD 活性的變化見圖 3-16。14 日齡時(shí)，3 組的 SOD 活性無顯著差異（P>0.05）； 日齡時(shí)，對(duì)照組和低 12℃組 SOD 活性無顯著差異（P>0.05），二者均顯著低于低 3℃組

本文編號(hào)：2826297