新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)是危害養(yǎng)禽業(yè)的重要病原之一。近年來,新基因亞型ⅦhNDV已在東南亞及南非等地區(qū)雞群廣泛流行。為了探討基因Ⅶh亞型NDVGXC110083株感染雞的致病機理和TLR3、IRF7在NDV感染過程中的作用,本研究分別用NDV GXC110083毒株和中國標準強毒株F48E8感染42日齡的SPF雞,觀察感染雞臨床發(fā)病情況,并于感染后(days post inoculation,DPI)1、2、4天分別采集各組雞的脾臟、胸腺、法氏囊、腎臟、胰腺、十二指腸等組織器官,運用組織病理學、免疫組織化學(immunohistochemistry,IHC)和圖像分析等技術來觀察各組織器官中NDV病毒抗原、TLR3、IRF7的分布及其動態(tài)變化。具體結(jié)果如下:(1)NDV感染雞后各組織器官的病理學變化GXC110083與F48E8毒株感染雞后均能夠在2d內(nèi)引起雞明顯發(fā)病并在4d內(nèi)出現(xiàn)快速死亡,表現(xiàn)典型的臨床癥狀和剖檢病變。病理組織學觀察發(fā)現(xiàn),GXC110083和F48E8毒株感染組雞的脾臟、胸腺、法氏囊、腎臟、胰腺、十二指腸等組織器官均呈現(xiàn)較嚴重的病理組織學損傷。感染后第1天,GXC110083攻毒組的脾臟、胸腺、法氏囊、腎臟、十二指腸均出現(xiàn)不同程度病變,表現(xiàn)為免疫器官組織中淋巴細胞減少、腎小管上皮細胞變性并有少量壞死及腸黏膜上皮細胞壞死脫落,隨著病程的發(fā)展,各組織損傷越來越嚴重,第4DPI時損傷最為嚴重,所有組織均出現(xiàn)不同程度的壞死,法氏囊淋巴濾泡嚴重萎縮,且脾臟、胸腺、十二指腸組織的壞死灶內(nèi)有大量炎性滲出物。而F48E8攻毒組各組織的損傷也很嚴重,且與GXC110083攻毒組相比,F48E8攻毒組的脾臟、胰腺、法氏囊的損傷更嚴重些。(2)NDV感染雞后的病毒的分布及其動態(tài)變化IHC結(jié)果顯示,GXC110083和F48E8感染組均可在1DPI分別從脾臟、胸腺、法氏囊、腎臟、胰腺、十二指腸中檢測到病毒抗原,主要出現(xiàn)在淋巴細胞、網(wǎng)狀細胞以及各類上皮細胞的胞漿中。GXC110083感染組在感染初期1DPI時在十二指腸、法氏囊、腎臟中的病毒含量最多,在胰腺中的病毒含量最少。在2DPI時,腎臟、法氏囊組織中的病毒含量呈下降趨勢,其他組織均呈顯著的上升趨勢,與感染1DPI相比差異顯著(P0.01)。感染4DPI時,腎臟組織中病毒含量明顯上升,其他組織中的病毒含量均下降。F48E8感染組在感染初期1DPI時在十二指腸、脾臟、腎臟中的病毒含量最多,胰腺中的病毒含量最少,在感染2DPI時在脾臟中的病毒含量呈明顯的上升趨勢,在法氏囊、胸腺、胰腺中的病毒含量變化不明顯,腎臟、十二指腸中的病毒含量則明顯下降,感染4DPI時法氏囊、腎臟、十二指腸中的病毒含量顯著升高,胸腺、脾臟、胰腺中的病毒含量則明顯下降。(3)NDV感染SPF雞后各組織中TLR3表達的動態(tài)變化IHC檢測結(jié)果顯示,TLR3在脾臟、胸腺、法氏囊、腎臟、胰腺、十二指腸中均有表達。在感染后第1、2、4天,GXC110083攻毒組脾臟和腎臟中的TLR3表達量均上調(diào),F48E8攻毒組脾臟、胸腺、法氏囊、腎臟中TLR3的表達量均上調(diào),與對照組相比均差異極顯著(P0.01)。GXC110083攻毒組在感染后第2、4天胸腺中的TLR3表達量均上調(diào),在感染后第1、4天法氏囊中TLR3表達量均上調(diào),在感染后1、2天胰腺、十二指腸中TLR3表達量均上調(diào),與對照組相比差異極顯著(P0.01)。F48E8攻毒組感染后第2、4天胰腺中的TLR3表達量上調(diào),在感染后第1天十二指腸中的TLR3表達量上調(diào),與對照組相比差異極顯著(P0.01)。(4)NDV感染SPF雞后各組織中IRF7表達的動態(tài)變化IHC檢測結(jié)果顯示,IRF7在脾臟、胸腺、法氏囊、腎臟、胰腺、十二指腸中均有表達。在感染后1、2、4天,GXC110083攻毒組胸腺、法氏囊、腎臟、胰腺、十二指腸中IRF7的表達量均上調(diào),F48E8攻毒組脾臟、胸腺、法氏囊、胰腺、十二指腸中IRF7的表達量均上調(diào),與對照組相比差異極顯著(P0.01)。在感染后第1、2天GXC110083攻毒組脾臟中IRF7的表達量均上調(diào),在感染后2、4天F48E8攻毒組腎臟中IRF7的表達量均上調(diào),與對照組相比差異極顯著(P0.01)。因此,本研究結(jié)果表明,基因Ⅶh亞型NDVGXCI10083和F48E8毒株均能夠?qū)PF雞的內(nèi)臟器官造成嚴重損傷,GXC110083毒株與F48E8毒株感染雞后能夠在1DPI廣泛分布于脾臟、胸腺、法氏囊、腎臟、胰腺、十二指腸等器官中,并迅速增殖從而對組織器官造成損傷,兩攻毒組各個組織器官中TLR3和IRF7蛋白的表達水平均有顯著上調(diào),表明TLR3和IRF7參與了 SPF雞抵抗GXC110083和F48E8新城疫病毒感染的過程。
【學位單位】：廣西大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：S858.31
【部分圖文】：

作用于ＴＲＩＦ［４７］。ＴＩＲＦ依賴途徑激活ＴＢＫ１和ＩＫＫｘ兩種激酶來對ＩＲＦ３／ＩＲＦ７磷酸逡逑’邐化，從而誘導Ｉ型ＩＦＮ的表達。ＴＬＲ信號通路見圖１－１。逡逑５逡逑

眼瞼、胸腺等均出血嚴重，而脾臟腫大有彌漫性白色針尖狀壞死點；在感染后第逡逑４ｄ腺胃乳頭、十二指腸出血嚴重，腎臟腫大并有尿酸鹽沉積呈花紋狀，下眼瞼腫逡逑大出血，胰腺萎縮壞死，脾臟腫大壞死（如圖２－１）。Ｆ４８Ｅ８攻毒組在感染后第逡逑Ｉｄ出現(xiàn)了十二指腸、盲腸扁桃體及眼瞼出血，胰腺有彌漫性白色壞死點；在感染逡逑后第２ｄ腺胃乳頭出血，下眼瞼內(nèi)膜腫大出血，脾臟和胰腺均具有彌漫性白色壞逡逑死點，胸腺及十二指腸嚴重出血，氣管有粘液；在感染后第４ｄ胰腺嚴重萎縮壞逡逑死，胸腺及法氏囊明顯萎縮，腺胃出血，盲腸扁桃體及下眼瞼出血，腎臟腫大并逡逑有尿酸鹽沉積。逡逑｜Ｐ逡逑魏~|逡逑圖２－１邋ＧＸＣ１１００８３毒株感染雞后主要剖檢病變逡逑Ｆｉｇ邋２－１邋Ｔｈｅ邋ｍａｉｎ邋ｇｒｏｓｓ邋ｆｉｎｄｉｎｇｓ邋ｏｆ邋ｃｈｉｃｋｅｎ邋ｉｎｆｅｃｔｅｄ邋ｗｉｔｈ邋ＧＸＣ１１００８３邋ｓｔｒａｉｎ逡逑１７逡逑

采用病理圖文系統(tǒng)和Ｉｍａｇｅ邋ｐｒｏ邋ｐｌｕｓ３２軟件分析統(tǒng)計得出ＧＸＣ１１００８３和逡逑Ｆ４８Ｅ８毒株感染雞后的第１、２、４天病毒抗原在脾臟中的含量變化，病毒含量用逡逑平均光密度值表示。如圖２－９結(jié)果顯示，在感染后的ｌ－２ｄ，Ｆ４８Ｅ８攻毒組的脾臟逡逑中病毒抗原量均顯著高于ＧＸＣ１１００８３攻毒組（Ｐ＜０．０１）。兩攻毒組病毒抗原在逡逑脾臟中的總體變化趨勢均呈先升高后降低趨勢，第２ｄ達到峰值。逡逑0．０６ｉ邐＊＊邋？逡逑Ｉ邐媝珍＾灥１卻ｉ逡逑＿邐＿邋．曰邋４：逡逑Ｉ邐｜１逡逑—．＿■＿■醒量逡逑ＧＸＣ１１００８３邐Ｆ４８Ｅ８逡逑圖２－９邋ＮＤＶ病毒感染雞后病毒抗原在脾臟中的含量變化逡逑注：＊表示該攻毒組與另一攻毒組差異顯著（Ｐ＜０．０５）邋，邋＊＊表示該攻毒組與另一攻毒組差異逡逑極顯著（Ｐ＜０．０１）逡逑Ｆｉｇ邋２－９邋Ｃｈａｎｇｅ邋ｏｆ邋ｖｉｒｕｓ邋ａｎｔｉｇｅｎ邋ｃｏｎｔｅｎｔ邋ｉｎ邋ｓｐｌｅｅｎ邋ｏｆ邋ｃｈｉｃｋｅｎ邋ｉｎｆｅｃｔｅｄ邋ｗｉｔｈ邋ＮＤＶ邋ｓｔｒａｉｎｓ邋Ｎｏｔｅ：邋＊逡逑ｉｎｄｉｃａｔｅｄ邋ｔｈｅ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ邋ｂｅｔｗｅｅｎ邋ＧＸＣ１１００８３－ｉｎｆｅｃｔｅｄ邋ａｎｄ邋Ｆ４８Ｅ８－ｉｎｆｅｃｔｅｄ邋ｉｓ邋ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ邋（Ｐ＜０．０５），逡逑＊＊邋ｉｎｄｉｃａｔｅｓ邋ｂｅｔｗｅｅｎ邋ＧＸＣ１１００８３－ｉｎｆｅｃｔｅｄ邋ａｎｄ邋Ｆ４８Ｅ８－ｉｎｆｅｃｔｅｄ邋ｔｈｅ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ邋ｉｓ邋ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ邋ｈｉｇｈｌｙ逡逑（Ｐ＜０．０１）．逡逑２．３．４．２邋胸腺逡逑病毒抗原主要位于胸腺髓質(zhì)區(qū)的網(wǎng)狀細胞和淋巴細胞上。１ＤＰ１

【參考文獻】

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1 崔健;;雞新城疫病原學及疫苗研究進展[J];中國畜牧業(yè);2015年07期

2 韋天超;李海瓊;翟國勝;何成偉;磨美蘭;農(nóng)海連;韋平;;雞新城疫病毒的分離與鑒定[J];中國家禽;2014年03期

3 閻富龍;魯會軍;金寧一;趙權;;新城疫病毒V蛋白研究進展[J];動物醫(yī)學進展;2013年06期

4 于洋;封振;何孔旺;仇旭升;丁鏟;;新城疫病毒毒力分子機制研究進展[J];江蘇農(nóng)業(yè)學報;2013年02期

5 陳安莉;謝芝勛;劉加波;龐耀珊;鄧顯文;謝志勤;謝麗基;范晴;;白鷺源新城疫病毒的分離與鑒定[J];動物醫(yī)學進展;2012年07期

6 金仕強;孟春春;仇旭升;于圣青;丁鏟;左之才;;ClassⅠ新城疫病毒概述[J];動物醫(yī)學進展;2012年04期

7 谷臣君;劉興盛;范安武;李科;;新城疫的研究進展[J];中國畜禽種業(yè);2012年02期

8 田獻禮;寧紅梅;銀梅;岳峰;魏繼濤;郭東光;劉衛(wèi);;雞新城疫病毒的分子生物學特性及應用研究進展[J];江蘇農(nóng)業(yè)科學;2011年06期

9 韓正強;王楠楠;;Toll樣受體的研究進展[J];畜牧與獸醫(yī);2011年12期

10 丁鏟;;新城疫病毒核衣殼蛋白的結(jié)構和功能[J];中國預防獸醫(yī)學報;2011年01期

本文編號：2814616