本文旨在運用江西省自主分離純化的流行毒株進行病例復制試驗及防治研究,確定我省蛋鴨減蛋癥致病原因,系統(tǒng)運用中草藥制劑對當前鴨坦布蘇病毒病防治效果進行研究,確定最優(yōu)防治鴨坦布蘇病毒病的藥物組方,獲得藥效學和安全性分析基礎(chǔ)數(shù)據(jù),以期為開展好該病的防控提供科學性的建議與指導。課題研究過程中,綜合運用病毒分離純化、病例復制、防治研究等綜合試驗和方法,從病原特性、致病機理、致病因素、預(yù)防控制等方面進行了研究。本課題研究成功分離純化了江西省鴨坦布蘇病毒YF毒株,成功復制鴨坦布蘇病毒并證實了鴨坦布蘇病毒病的傳播方式,驗證疫苗和中草藥是防治鴨坦布蘇病毒病的較好措施和方法。具體結(jié)果如下:一是通過病例復制試驗,病毒分離、基因序列測定后,證實病原是鴨坦布蘇病毒,其不僅具有致病性,并且是獨立的病毒種類,具有可復制性,在感染機體內(nèi)能夠穩(wěn)定存在。二是通過鴨坦布蘇病毒病傳播試驗,結(jié)果證明鴨坦布蘇病毒病不僅具有致病性,且能夠通過混群接觸感染、空氣傳播等方式進行傳播,在日常生產(chǎn)過程中對患病鴨群應(yīng)盡早實行較好的隔離措施等方式,才能阻止疫病的傳播。在鴨坦布蘇病毒病臨床防治上,本課題研究通過對鴨坦布蘇病毒預(yù)防用藥與攻毒試驗,結(jié)果表明本試驗所選用F疫苗和中草藥1組、2組配方均能很好地控制鴨坦布蘇病毒對鴨群產(chǎn)蛋的危害,能夠顯著地增強鴨群抵抗力,減輕卵巢的損傷,縮短恢復產(chǎn)蛋的時間;但中草藥1組配方在治療時沒能很好的控制蛋鴨死亡,鴨群死亡率為3.33%。這表明疫苗是預(yù)防該病發(fā)生與防控的較好選擇,中草藥在預(yù)防該病防控與治療中有一定效果,但用法、用量及生產(chǎn)效益比等仍需進一步深入研究。
【學位單位】：江西農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：S852.65
【部分圖文】：

預(yù)測基本相符，結(jié)果見圖 1。將擴增的片段純化進行回收（1%瓊脂凝膠純化），克隆到 pEASY-B 載體中，對每個擴增的片段，挑選 3 個陽性克隆送生物技術(shù)公司測序。圖1病毒YF 株基因組的擴增Figure 1 genome amplification of YF strain of virusM：DNA分子量標尺；1-8：YF毒株基因組各擴增片段3.1.2 序列比對結(jié)果序列分析表明，該株病毒全基因組全長 10990nt，未出現(xiàn)核苷酸插入或缺失及基因重組的變異情況，與已報道的 DTMUV 分離株的核苷酸同源性均在 98.5%以上，且親緣關(guān)系與當前鴨群中優(yōu)勢病毒亞群非常近。

表3 坦布蘇病毒信息及序列同源性比對結(jié)果Table 3 Tembusu virus information and sequence homology comp毒株GenBankID宿主YF 株 (%)毒株GenBankID核苷酸氨基酸ZD/2010 JQ595407鴨 99.2 99.0JXSP JQ920423andong1 JX965381鴨 99.3 99.4Du/CH/LSD/110128KC136210MH220 JQ928189鴨 99.3 98.6ZJ-6 JF459991J-407 JQ314464鴨 99.3 99.0byd1 JQ920420YY5 JF270480鴨 99.2 99.1TA JQ289550JS JQ920422鴨 99.4 99.2WR JX196334JS804 JF895923鵝 99.3 98.7JX2 JQ920426goose JQ920424鵝 99.4 99.6duan JQ920421J GH-2 JQ314465鵝 99.1 99.0JS/2010 JX273153S-PT-7 JQ627864鵝 99.4 99.8WJ-1 JX549382itiawan JX477686肉雞 87.2 96.2MM 1775 JX477685

鴨坦布蘇病毒病病原學特性及其防治研究16圖3 基于病毒E蛋白（A）和NS5基因（B）的分子進化分析FIG. 3 molecular evolution analysis based on virus E protein (A) and NS5 gene (B)黑三角(▲)標注的毒株為本試驗分離的毒株，圖中樹結(jié)處的阿拉伯數(shù)字為自舉檢驗置信值(1,000次重復)以上果表明，在宜豐發(fā)病場采集的病料中分離到了鴨坦布蘇病毒。鴨群中流行的鴨坦布蘇病毒存在 2 個病毒群，但主要以 II 群的病毒為主，其中 II-C 亞群的毒株為流行的優(yōu)勢病毒群。本研究分離獲得的江西分離株（YF 株）基因組與已報道的高度同源，遺傳穩(wěn)定，沒有出現(xiàn)核苷酸的缺失或插入，未發(fā)生基因重組現(xiàn)象。基于 YF 株全基因組的系統(tǒng)進化分析表明，YF 株與鴨群中流行的 II-C 譜系病毒群親緣關(guān)系最近，這與基于 YF 株病毒 E 蛋白及 NS5 蛋白編碼基因的遺傳進化分析結(jié)果一致

【參考文獻】

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本文編號：2812667