【摘要】：本試驗(yàn)以12月齡兩種飼養(yǎng)條件下(放牧和舍飼)蘇尼特羊脂肪組織(背最長(zhǎng)肌,尾脂、腎脂)和瘤胃液作為試驗(yàn)材料,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法、氣相質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)和高通量測(cè)序技術(shù),測(cè)定兩種飼養(yǎng)方式下脂肪組織中脂肪酸代謝基因的表達(dá)和脂肪酸含量以及瘤胃菌群結(jié)構(gòu)。研究不同飼養(yǎng)方式下脂肪組織中SCD、FADS1、FADS2和elove5基因的表達(dá)量和脂肪酸的含量以及瘤胃菌群的差異,并分析了脂肪酸含量和脂肪酸代謝基因與瘤胃菌群結(jié)構(gòu)三者之間的相互關(guān)系。結(jié)果表明:通過(guò)分析脂肪組織中脂肪酸的含量可知,在舍飼組中辛酸(C8:0)的含量顯著高于放牧組,在背最長(zhǎng)肌和尾脂中癸酸(C10:0)的含量放牧組顯著高于舍飼組;在儲(chǔ)能脂肪(尾脂和腎脂)中亞油酸(C18:2)的含量放牧組顯著高于舍飼組;放牧組中亞麻酸(C18:3)的含量顯著高于舍飼組;放牧條件下更有利于脂肪組織中EPA(C20:5)和DHA(C22:6)的沉積。儲(chǔ)能脂肪(尾脂和腎脂)更有利于飽和脂肪酸的沉積,肌肉中更有利于多不飽和脂肪酸的沉積。通過(guò)分析脂肪組織中脂肪酸代謝基因的表達(dá)量可知,舍飼組中SCD基因表達(dá)量顯著高于放牧組;在背最長(zhǎng)肌和腎脂中FADS1和FADS2基因舍飼組中表達(dá)量高于放牧組;在儲(chǔ)能脂肪(尾脂和腎脂)中elove5舍飼組的表達(dá)量高于放牧組。SCD和elove5基因在尾脂中的表達(dá)量顯著高于背最長(zhǎng)肌和尾脂,FADS1和FADS2基因在背最長(zhǎng)肌和腎脂中的表達(dá)量顯著高于尾脂。對(duì)脂肪酸代謝基因表達(dá)量與脂肪酸含量相關(guān)性分析可知,FADS2基因表達(dá)量與EPA(C20:5)呈顯著正相關(guān);在尾脂和腎脂中FADS1基因的表達(dá)與EPA(C20:5)成正相關(guān);在背最長(zhǎng)肌中SCD基因的表達(dá)量與EPA(C20:5)和DHA(C22:6)呈顯著負(fù)相關(guān)。通過(guò)分析不同飼養(yǎng)方式下門(mén)和屬水平瘤胃菌群結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn),放牧組中厚壁菌門(mén)(Firmicutes)的相對(duì)豐度顯著低于舍飼組;而擬桿菌屬(Bacteroides)的豐度顯著高于舍飼組。對(duì)瘤胃菌群結(jié)構(gòu)與脂肪酸含量相關(guān)性分析可知,瘤胃中纖維桿菌門(mén)(Fibrobacteres)的高豐度有助于背最長(zhǎng)肌和尾脂中EPA(C20:5)的沉積,會(huì)減少降低DHA(C22:6)的沉積;纖維桿菌門(mén)還有利于儲(chǔ)能脂肪(尾脂和腎脂)中油酸(C18:1)的沉積;腎脂中花生四烯酸(C20:4)和DHA(C22:6)的含量與擬桿菌門(mén)豐度呈正相關(guān),但與厚壁菌門(mén)的豐度呈顯著負(fù)相關(guān)。亞麻酸(C18:3)的沉積與丁酸弧菌屬(Butyrivibrio)的相對(duì)豐度呈顯著負(fù)相關(guān);擬桿菌屬相對(duì)豐度提高對(duì)脂肪組織中的多不飽和脂肪酸的沉積有促進(jìn)作用。
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：S826.5
【圖文】：

圖 1 FADS1 和 FADS2 脂肪酸 的代謝路徑[32 ]Fig1 Fatty acid metabolism of FADS1 and FADS2備注： 虛線(xiàn)表示哺乳動(dòng)物缺少的路 徑脂肪酸脫氫酶不僅可以催化與載體結(jié)合的脂肪酸脫氫形成雙鍵，在生物體內(nèi)對(duì)維持膜結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、調(diào)控脂肪酸代謝和生物學(xué)功能方面起著重要作用。由圖 1 代謝途徑可知Δ5-脂肪酸脫氫酶（FADS1）和Δ6-脂肪酸脫氫酶（FADS2）是合成長(zhǎng)鏈不飽和脂肪酸如花生四烯酸（C20:4）、EPA（C20:5和 DHA（C22:6）的關(guān)鍵酶。大量的研究發(fā)現(xiàn) FADS1 基因脂肪組織表達(dá)量與 花 生 四 烯 酸 （ C20:4） 含 量 呈 顯 著 正 相 關(guān) ， FADS2 基 因 表 達(dá) 量 與 EP（C20:5）含量呈顯著正相關(guān)，F(xiàn)ADS1 基因和 FADS2 基因的表達(dá)量與牲畜的日齡、性別和飼養(yǎng)方式均有關(guān)系[33 -36 ]。因此通過(guò)調(diào)控脂肪酸脫氫酶基因的表達(dá)已成為促進(jìn)肌肉中多不飽和脂肪酸沉積的重要手段之一。脂肪酸延長(zhǎng)酶 5（elongase of very long chain fatty acid 5，elove5）利用膳食中 n-3 和 n-6 系的十八碳和二十碳多不飽和脂肪酸生成相應(yīng)的 n

圖 2 總 RNA 電泳圖Fig2 Agarose gel eiectrophoresis of the total RNA，提取所得樣品的 RNA 有三條明亮清晰的NA 的質(zhì)量良好。對(duì) RNA 的濃度和 OD2OD 值均在 1. 8-2. 0 范圍內(nèi)（OD 值小于 1 2. 0 可能有 DNA 污染）。綜合分析，提，未發(fā)生降解和蛋白污染，符合后續(xù)的試R 產(chǎn)物電泳檢測(cè)DS2、SCD 和 elove5 基因的 RNA 再經(jīng)過(guò)NA，在瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后凝膠成像

圖 2 總 RNA 電泳圖Fig2 Agarose gel eiectrophoresis of the total RNA，提取所得樣品的 RNA 有三條明亮清晰NA 的質(zhì)量良好。對(duì) RNA 的濃度和 OD2OD 值均在 1. 8-2. 0 范圍內(nèi)（OD 值小于 2. 0 可能有 DNA 污染）。綜合分析，提，未發(fā)生降解和蛋白污染，符合后續(xù)的試R 產(chǎn)物電泳檢測(cè)DS2、SCD 和 elove5 基因的 RNA 再經(jīng)過(guò)NA，在瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后凝膠成像

【參考文獻(xiàn)】

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1 陳澤斌;李冰;王定康;余磊;徐勝光;任y

本文編號(hào)：2802851