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胚蛋注射黃芪多糖對肉仔雞腸道黏膜免疫的影響

發(fā)布時間:2020-08-18 21:06
【摘要】:出殼初期,是雞存活的關(guān)鍵時期,因為此時雛雞免疫系統(tǒng)和消化系統(tǒng)等尚未發(fā)育成熟,而且體內(nèi)母源抗體有限。如何提高出殼初期機體尤其是腸道的免疫功能,以抵抗外界病原體的入侵尤為重要。研究表明,胚蛋給養(yǎng)是一種能夠在孵化期根據(jù)胚胎發(fā)育的需要提供額外營養(yǎng)物質(zhì)來調(diào)節(jié)雛雞早期生長發(fā)育和免疫功能的有效可行方法。黃芪多糖(Astraglus polysaccharide,APS)作為免疫增強劑,具有顯著增強機體免疫力、抗氧化、促生長、促進腸道發(fā)育和提高腸道黏膜免疫的作用。因此,本試驗通過卵內(nèi)注射黃芪多糖對雛雞早期腸道免疫進行調(diào)節(jié),以提高出殼初期雛雞免疫功能,這對預(yù)防雛雞發(fā)育早期疾病的發(fā)生具有重要意義。為探討卵內(nèi)注射APS對雛雞早期腸道黏膜免疫的影響,本試驗選用240枚愛拔益加肉雞(AA+肉雞)胚蛋,隨機分成4個處理組,每個處理組3個重復(fù),每個重復(fù)20枚蛋。在孵化至18.5胚齡時,處理組Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ向羊膜腔內(nèi)注射0.5mL濃度為2mg/ml、4mg/ml和8mg/ml的APS,并分別用APS_L、APS_M和APS_H表示,處理組Ⅰ于同部位注射0.5mL 0.9%生理鹽水作為對照,用Control表示。在出殼當(dāng)天計算各組出殼率,并分別在出殼后的第1、7、14、21d進行取材:稱量體重;HE染色方法觀察腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化;SP免疫組化法觀察腸道黏膜內(nèi)IgA~+細(xì)胞的分布及數(shù)量變化;ELISA法檢測空腸洗液中SIgA含量的變化;熒光定量PCR方法檢測腸道中IL-2、IL-6、IFN-γ及TLR4基因mRNA表達(dá)水平的變化。試驗結(jié)果如下:1.與對照組相比,胚蛋注射APS對孵化率影響不顯著,但顯著增加了14d及21d時的肉仔雞體重,其中以APS_M對體重的促進作用最為明顯。2.與對照組比較,胚蛋注射APS可以增加肉仔雞小腸黏膜的絨毛高度(VH),降低隱窩深度(CD),并提高VH/CD比值從而在一定程度上促進了腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的發(fā)育,三個濃度的APS對早期腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的作用效果因不同時間、不同腸段和不同濃度而表現(xiàn)不同,其中以21d時APS_M對空腸的作用效果最為明顯。3.與對照組比較,胚蛋注射APS能夠在7、14、21d增加十二指腸和空腸絨毛固有層中的IgA~+細(xì)胞。但各組在不同日齡對十二指腸和空腸的促進作用并不相同,其中以APS_H組在21d時對十二指腸的促進作用最為明顯。4.與對照組相比,胚蛋注射APS_M在7d和21d顯著增加了SIgA抗體的分泌。2.與對照組相比,胚蛋注射APS提高了IL-2及IFN-γ并降低了IL-6基因的的表達(dá)水平,表明胚蛋注射APS能夠調(diào)節(jié)機體中Th1/Th2細(xì)胞的相對平衡狀態(tài)。與對照組相比,APS能夠提高TLR4的表達(dá)水平,其中以7d時APS_L提高作用最為顯著。綜上所述,胚蛋注射APS能夠有效促進腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的發(fā)育、增加黏膜中IgA~+細(xì)胞數(shù)量和腸洗液中SIgA的含量,并提高IL-2、TLR4、IFN-γ和降低IL-6基因的mRNA表達(dá)水平,從而增強了出殼初期雛雞的腸道黏膜免疫功能,進而給機體提供有效和及時的免疫保護。
【學(xué)位授予單位】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:S831.5
【圖文】:

示意圖,行編號,示意圖


圖 1.1 孵化 18.5d 羊膜腔注射示意圖e embryo injection of amniotic cavity of 1行編號,飼養(yǎng)于育雛籠內(nèi),正常光

十二指腸,絨毛,雛雞,發(fā)育情況


7d 時 APSM組(圖2.1-B)與 Control 組(圖 2.1-A)相比,十二指腸絨毛排列更為緊密,VH 更長。14d 時,與 Control 組相比(圖 2.1-C),APSM(圖 2.1-D)及 APSH組(圖 2.1-E)十二指腸絨毛排列更為緊密,VH 更長,但絨毛的寬度變窄。21d 時,與 Control組(圖 2.1-F)相比,APSM組(圖 2.1-G)VH 更長

空腸,雛雞,腸腺,發(fā)育情況


與 Control 組(圖2.2-A)相比,APSL(圖 2.2-B)及 APSM組(圖 2.2-C)空腸 VH 更長。14d 時,與 Control 組(圖 2.2-D)相比,APSL組(圖 2.2-E)VH 更長,腸壁增厚,但絨毛寬度變窄。21d 時,與 Control 組(圖 2.2-F)相比,APSL組(圖 2.2-G)絨毛排列更為緊密,腸腺更為發(fā)達(dá),VH 更長

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