【摘要】：出殼初期,是雞存活的關(guān)鍵時(shí)期,因?yàn)榇藭r(shí)雛雞免疫系統(tǒng)和消化系統(tǒng)等尚未發(fā)育成熟,而且體內(nèi)母源抗體有限。如何提高出殼初期機(jī)體尤其是腸道的免疫功能,以抵抗外界病原體的入侵尤為重要。研究表明,胚蛋給養(yǎng)是一種能夠在孵化期根據(jù)胚胎發(fā)育的需要提供額外營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來(lái)調(diào)節(jié)雛雞早期生長(zhǎng)發(fā)育和免疫功能的有效可行方法。黃芪多糖(Astraglus polysaccharide,APS)作為免疫增強(qiáng)劑,具有顯著增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗氧化、促生長(zhǎng)、促進(jìn)腸道發(fā)育和提高腸道黏膜免疫的作用。因此,本試驗(yàn)通過(guò)卵內(nèi)注射黃芪多糖對(duì)雛雞早期腸道免疫進(jìn)行調(diào)節(jié),以提高出殼初期雛雞免疫功能,這對(duì)預(yù)防雛雞發(fā)育早期疾病的發(fā)生具有重要意義。為探討卵內(nèi)注射APS對(duì)雛雞早期腸道黏膜免疫的影響,本試驗(yàn)選用240枚愛(ài)拔益加肉雞(AA+肉雞)胚蛋,隨機(jī)分成4個(gè)處理組,每個(gè)處理組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)20枚蛋。在孵化至18.5胚齡時(shí),處理組Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ向羊膜腔內(nèi)注射0.5mL濃度為2mg/ml、4mg/ml和8mg/ml的APS,并分別用APS_L、APS_M和APS_H表示,處理組Ⅰ于同部位注射0.5mL 0.9%生理鹽水作為對(duì)照,用Control表示。在出殼當(dāng)天計(jì)算各組出殼率,并分別在出殼后的第1、7、14、21d進(jìn)行取材:稱量體重;HE染色方法觀察腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化;SP免疫組化法觀察腸道黏膜內(nèi)IgA~+細(xì)胞的分布及數(shù)量變化;ELISA法檢測(cè)空腸洗液中SIgA含量的變化;熒光定量PCR方法檢測(cè)腸道中IL-2、IL-6、IFN-γ及TLR4基因mRNA表達(dá)水平的變化。試驗(yàn)結(jié)果如下:1.與對(duì)照組相比,胚蛋注射APS對(duì)孵化率影響不顯著,但顯著增加了14d及21d時(shí)的肉仔雞體重,其中以APS_M對(duì)體重的促進(jìn)作用最為明顯。2.與對(duì)照組比較,胚蛋注射APS可以增加肉仔雞小腸黏膜的絨毛高度(VH),降低隱窩深度(CD),并提高VH/CD比值從而在一定程度上促進(jìn)了腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的發(fā)育,三個(gè)濃度的APS對(duì)早期腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的作用效果因不同時(shí)間、不同腸段和不同濃度而表現(xiàn)不同,其中以21d時(shí)APS_M對(duì)空腸的作用效果最為明顯。3.與對(duì)照組比較,胚蛋注射APS能夠在7、14、21d增加十二指腸和空腸絨毛固有層中的IgA~+細(xì)胞。但各組在不同日齡對(duì)十二指腸和空腸的促進(jìn)作用并不相同,其中以APS_H組在21d時(shí)對(duì)十二指腸的促進(jìn)作用最為明顯。4.與對(duì)照組相比,胚蛋注射APS_M在7d和21d顯著增加了SIgA抗體的分泌。2.與對(duì)照組相比,胚蛋注射APS提高了IL-2及IFN-γ并降低了IL-6基因的的表達(dá)水平,表明胚蛋注射APS能夠調(diào)節(jié)機(jī)體中Th1/Th2細(xì)胞的相對(duì)平衡狀態(tài)。與對(duì)照組相比,APS能夠提高TLR4的表達(dá)水平,其中以7d時(shí)APS_L提高作用最為顯著。綜上所述,胚蛋注射APS能夠有效促進(jìn)腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的發(fā)育、增加黏膜中IgA~+細(xì)胞數(shù)量和腸洗液中SIgA的含量,并提高IL-2、TLR4、IFN-γ和降低IL-6基因的mRNA表達(dá)水平,從而增強(qiáng)了出殼初期雛雞的腸道黏膜免疫功能,進(jìn)而給機(jī)體提供有效和及時(shí)的免疫保護(hù)。
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S831.5
【圖文】：

圖 1.1 孵化 18.5d 羊膜腔注射示意圖e embryo injection of amniotic cavity of 1行編號(hào)，飼養(yǎng)于育雛籠內(nèi)，正常光

7d 時(shí) APSM組（圖2.1-B）與 Control 組（圖 2.1-A）相比，十二指腸絨毛排列更為緊密，VH 更長(zhǎng)。14d 時(shí)，與 Control 組相比（圖 2.1-C），APSM（圖 2.1-D）及 APSH組（圖 2.1-E）十二指腸絨毛排列更為緊密，VH 更長(zhǎng)，但絨毛的寬度變窄。21d 時(shí)，與 Control組（圖 2.1-F）相比，APSM組（圖 2.1-G）VH 更長(zhǎng)

與 Control 組（圖2.2-A）相比，APSL（圖 2.2-B）及 APSM組（圖 2.2-C）空腸 VH 更長(zhǎng)。14d 時(shí)，與 Control 組（圖 2.2-D）相比，APSL組（圖 2.2-E）VH 更長(zhǎng)，腸壁增厚，但絨毛寬度變窄。21d 時(shí)，與 Control 組（圖 2.2-F）相比，APSL組（圖 2.2-G）絨毛排列更為緊密，腸腺更為發(fā)達(dá)，VH 更長(zhǎng)

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本文編號(hào)：2796718