發(fā)布時間：2020-08-17 15:35

【摘要】：目的:腸神經膠質細胞(enteric glial cell,EGC)來源于神經外胚層,是腸神經系統(tǒng)的主要成員之一,EGCs主要有營養(yǎng)和支持神經元的作用,并能在一定程度上對腸道炎癥的發(fā)生和發(fā)展起調節(jié)作用。以往對于EGC的研究多集中在哺乳動物小鼠的腸道炎癥病方面,對于雞腸道EGC的研究資料比較匱乏。在雞的腸炎疾病中壞死性腸炎可感染雞各個日齡階段,死亡率高,發(fā)病后可對養(yǎng)殖業(yè)可造成巨大損失。本文以新疆黃羽肉雞為研究動物,建立雞壞死性腸炎疾病模型,詳細研究了EGC在壞死性腸炎雞腸道的形態(tài)結構特征及分布規(guī)律,及EGC分泌因子中的神經營養(yǎng)因子(GDNF)、神經肽A及SOX9在整個腸道中的表達情況,并分析其功能。為進一步研究其生理功能、免疫機能奠定了一定的理論基礎,同時為雞的飼養(yǎng)、疾病預防及治療提供科學依據。方法:本試驗選用80只50日齡體重相似的健康黃羽肉雞,公母各40只,將其分為對照組和實驗組,每組40只,對照組為健康雞,試驗組為壞死性腸炎模型組。試驗組通過人工感染魏氏梭菌A型而引發(fā)壞死性腸炎,實驗組40只黃羽肉雞連續(xù)10天經口腔灌服魏氏梭菌15×10~8cfu/只,直至雞只出現臨床癥狀宰殺后迅速取組織樣,其中一部分樣品固定于2.5%的戊二醛液中,用于制作電鏡材料;另一部分樣品固定于helly液中用于改良的Holzer染色;第三部分樣品放于10%的中性甲醛液中進行固定,用于免疫組織化學試驗。對照組雞只取材與試驗組方法一致。結果:應用透射電鏡與改良的Holzer染色方法研究壞死性腸炎中腸神經膠質細胞形態(tài)結構特征及分布規(guī)律,電鏡對其超微結構的觀測結果為壞死性腸炎實驗組腸道EGC胞質內空泡增多,胞漿明顯減少且分布不均勻,相鄰兩細胞間間隙增大,突起斷裂。光鏡觀測的結果表明對照組EGC廣泛分布于雞腸道黏膜層、黏膜下層、肌層,并在黏膜上皮之間可見少量分布,應用免疫組織化學染色觀察,結果表明,在壞死性腸炎雞腸道中神經肽A觀察結果表明主要表達黏膜下神經叢和肌間神經叢中的EGCs中。而腸神經膠質細胞分泌的膠質源性神經營養(yǎng)因子(GDNF)在壞死性腸炎雞腸道中主要表達于在黏膜上皮和小腸腺及其血管周圍表達,腸神經膠質細胞分泌的Sox9在壞死性腸炎雞腸道中的主要表達于黏膜上皮及固有層,黏膜下神經叢和肌間神經叢與對照組相比表達減少。結論:腸神經膠質細胞在壞死性腸炎雞腸道形態(tài)發(fā)生變化和數量減少;腸神經膠質細胞分泌的神經肽A、GDNF和Sox9在壞死性腸炎雞腸道中主要表達于黏膜層、黏膜下神經叢和肌間神經叢,與對照組相比,表達減弱。
【學位授予單位】：石河子大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S858.31
【圖文】：

圖 G-1、G-2 十二指腸 100× 圖 H-1、H-2 空腸 100×圖 I-1、I-2 回腸 100× 圖 J-1、J-2 盲腸 100×圖 K-1、K-2 直腸 100× 圖 L-1、L-2 對照組 100×表 3 免疫反應定位與實驗結果判定表 Sox9Table 3 immunoreactive localization and experimental results determine table Sox9結構十二指腸（對照組）十二指腸（實驗組）空腸（對照組）空腸（實驗組）回腸（對照組）回腸（實驗組黏膜上皮 ＋＋ ＋＋＋ ＋＋ ＋ ＋＋＋ ＋固有層 ＋＋ ＋ ＋ - ＋＋＋ ＋黏膜肌層 ＋ - ＋ - ＋ ＋小腸腺 ＋＋ ＋＋＋ ＋＋＋ ＋＋ ＋＋ ＋＋＋黏膜下層 ＋ ＋ - - - -黏膜下神經叢- - ＋ ＋ ＋＋ ＋內環(huán)形肌 ＋ - - ＋ - －

圖 1-1、1-2 十二指腸 100× 圖 2-1、2-2 空腸 100×圖 3-1、3-2 回腸 100× 圖 4-1、4-2 盲腸 100×圖 5-1、5-2 直腸 100× 圖 6-1、6-2 陰性對照表 1 免疫反應定位與實驗結果判定表神經肽 ATable 1 immunoreactive localization and experimental results to determine tabna-A十二指腸 十二指腸 空腸 空腸 回腸 回腸結構 （對照組） （實驗組） （對照組） （實驗組） （對照組） （實驗組黏膜上皮 ＋＋＋ ＋＋ ＋＋＋ ＋＋ ＋＋＋ ＋＋固有層 ＋ ＋ ＋ ＋＋ ＋＋ ＋黏膜肌層 ＋ ＋ ＋＋＋ ＋ ＋＋＋ ＋小腸腺 ＋＋＋ ＋＋ ＋＋ ＋ ＋ ＋＋＋黏膜下層 ＋ ＋ ＋ ＋＋ ＋＋ ＋

【參考文獻】

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本文編號：2795506