【摘要】：GapC蛋白是無(wú)乳鏈球菌(Sterptococcus agalactiae)表面的纖溶酶原(Plasminogen,Plg)受體之一,該蛋白可通過(guò)其C末端的賴氨酸殘基與Plg的賴氨酸結(jié)合位點(diǎn)(Lysine binding site,LBS)結(jié)合。由于Plg與脂蛋白(a)[Lipoprotein(a),Lp(a)]結(jié)構(gòu)中的載脂蛋白(a)[Apo(a)]具有高度同源性,故本文旨在研究GapC蛋白與Lp(a)的相互作用。利用大腸桿菌原核表達(dá)系統(tǒng)重組表達(dá)了無(wú)乳鏈球菌的gapC基因及缺失編碼末位賴氨酸三堿基的突變體基因gapC△K,經(jīng)TALON SuperflowTM填料過(guò)柱純化后,得到對(duì)應(yīng)重組蛋白rGapC和rGapC△K,通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、親和色譜層析(Pull down)及蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)研究rGapC與Lp(a)的相互作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),rGapC能與Lp(a)結(jié)合,且結(jié)合值明顯高于rGapC△K;rGapC和rGapC△K均不與對(duì)照低密度脂蛋白Low density lipoprotein(LDL)結(jié)合;rGapC能與Plg結(jié)合,且結(jié)合值高于rGapC△K;賴氨酸類似物6-氨基乙酸(EACA)可以抑制rGapC與Lp(a)的結(jié)合;Lp(a)能抑制rGapC和Plg結(jié)合,但抑制作用不顯著。結(jié)果表明,rGapC能與Lp(a)的結(jié)合,且是通過(guò)rGap C的C末端的賴氨酸殘基與Lp(a)的Apo(a)中LBS結(jié)合的,本研究首次探究了rGapC與Lp(a)的結(jié)合作用及主要結(jié)合位點(diǎn),為進(jìn)一步研究Lp(a)的生理作用和與微生物的關(guān)系提供參考依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S852.61
【圖文】：

Plg的結(jié)構(gòu)

無(wú)乳鏈球菌重組 GapC 蛋白與脂蛋白（a）的相互作用Plg 激活的抑制是由絲氨酸蛋白酶抑制劑調(diào)控的，包括 Plg 激活抑inogen activator inhibitors, PAIs）、α2 抗纖溶酶（α2-antiplasmin，α2球蛋白（α2-microglobalin）[8]。病原菌利用宿主 Plg 的致病機(jī)制病原菌可以黏附于 ECM、BM 等組織屏障結(jié)構(gòu)，通過(guò)其表面的 Plg 受 結(jié)合，PAs 將 Plg 激活為 Pm 后，進(jìn)一步降解 ECM、BM，使得病原菌屏障的滲透力，加劇機(jī)體感染風(fēng)險(xiǎn)[8]。有實(shí)驗(yàn)研究表明，賴氨酸類似度上抑制這類受體蛋白與 Plg 的結(jié)合，這暗示該種結(jié)合可能是受體蛋殘基與 Plg 含有的 LBS 的特異性結(jié)合（圖 2）。

Lp(a)和Plg的結(jié)構(gòu)

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 許穎;紀(jì)智星;韓潤(rùn)林;;重組金黃色葡萄球菌次黃嘌呤單核苷酸脫氫酶與脂蛋白(a)的相互作用[J];微生物學(xué)通報(bào);2011年09期

2 代霄燕;許麗萍;白文成;韓潤(rùn)林;;重組A群鏈球菌三磷酸甘油醛脫氫酶與脂蛋白(a)的相互作用[J];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2011年03期

本文編號(hào)：2794082