【摘要】：內(nèi)蒙古絨山羊是自治區(qū)地方優(yōu)秀的遺傳種質(zhì)資源,具有優(yōu)良的絨毛生產(chǎn)性能。在絨山羊的絨毛生長過程中,褪黑激素與miRNA均可發(fā)揮重要調(diào)控作用。Let-7是最早被發(fā)現(xiàn)miRNAs之一,發(fā)現(xiàn)在絨山羊皮膚中,被高頻表達(dá)且與皮膚毛囊的周期性發(fā)育相關(guān)。多數(shù)研究分析let-7家族單個或少數(shù)幾個成員及其靶基因的調(diào)控作用,較少涉及整個let-7家族成員及其靶基因的共表達(dá)模式的研究。為探索褪黑激素對let-7家族成員及其靶基因在內(nèi)蒙古絨山羊皮膚周期性表達(dá)的影響,本研究針對絨山羊皮膚組織展開以下兩方面的研究:1.選取內(nèi)蒙古絨山羊(罕山型)成年母羊6只,分別作為埋植組(持續(xù)埋植褪黑激素,n=3)和對照組(不埋植褪黑激素,n=3),連續(xù)12個月采集絨山羊個體的體側(cè)部皮膚組織,利用qRT-PCR技術(shù)檢測11個let-7家族成員的表達(dá)變化,結(jié)合RNA-Seq技術(shù)分析let-7家族靶基因的表達(dá)情況。結(jié)果表明:褪黑激素上調(diào)let-7b、let-7e、let-7a-3p的表達(dá)(P0.05),下調(diào)let-7f、let-7g、let-7c、let-7a-5p、let-7d、miR-98的表達(dá)(P0.05)。在4月份,褪黑激素上調(diào)“l(fā)et-7g、let-7i、miR-98”的表達(dá),下調(diào)PTGS2、PLCG1等靶基因的表達(dá);下調(diào)“l(fā)et-7a-5p、let-7b、let-7c”的表達(dá),上調(diào)TGIF2、RBL1等靶基因的表達(dá)。在6月份,褪黑激素下調(diào)“l(fā)et-7g、let-7i、miR-98”的表達(dá),上調(diào)PTGS2、PLCG1、SRC等靶基因的表達(dá);上調(diào)“l(fā)et-7a-5p、let-7b、let-7c”的表達(dá),下調(diào)GDF5、TGIF2、RBL1等靶基因的表達(dá)。let-7家族成員的靶基因主要參與VEGF、TGF-β、Oxytocin和NF-kappa B信號通路,可能在細(xì)胞過程、激素調(diào)節(jié)和轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控方面發(fā)揮重要作用。以上提示,褪黑激素可能通過改變let-7家族重要成員的表達(dá)水平,影響相應(yīng)靶基因的表達(dá),進(jìn)而在皮膚毛囊的周期性生長過程中發(fā)揮重要作用,研究結(jié)果為進(jìn)一步揭示褪黑激素介導(dǎo)miRNAs影響羊絨生長的分子機(jī)理提供了理論依據(jù)。2.比較分析絨山羊皮膚的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),長光照期(3～8月)有差異表達(dá)基因1803個,主要富集在ECM-受體相互作用、Wnt信號通路、補(bǔ)體和凝血級聯(lián)、黑色素、信號通路調(diào)節(jié)干細(xì)胞的多能性等信號通路;短光照期(9～2月)有差異表達(dá)基因551個,主要富集在補(bǔ)體和凝血級聯(lián)、白細(xì)胞跨內(nèi)皮遷移、B細(xì)胞受體信號通路、造血細(xì)胞譜系、細(xì)胞因子-細(xì)胞因子受體相互作用等信號通路。使用WGCNA方法對12個月的所有差異表達(dá)基因進(jìn)行分析,篩選得到5個與皮膚毛囊生長發(fā)育相關(guān)的重要模塊,包括59個核心基因,作為褪黑激素促羊絨生長的相關(guān)候選基因,為進(jìn)一步揭示褪黑激素促進(jìn)絨毛生長的分子機(jī)制提供了理論依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S827
【圖文】：

圖１試驗技術(shù)路線圖逡逑Ｆｉｇ．邋１邋Ｔｈｅ邋ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ邋ｒｏｕｔｅ邋ｏｆ邋ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ逡逑

圖２部分ＲＮＡ檢測結(jié)果逡逑Ｆｉｇ．邋２邋Ｔｈｅ邋ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ邋ｒｅｓｕｌｔｓ邋ｏｆ邋ｓｏｍｅ邋ＲＮＡ邋ｓａｍｐｌｅｓ逡逑

圖４不同光照期ｌｅｔ－７家族成員的網(wǎng)絡(luò)關(guān)系逡逑Ｆｉｇ．４邋Ｔｈｅ邋ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ邋ｏｆ邋ｍｅｍｂｅｒｓ邋ｏｆ邋ｌｅｔ－７邋ｆａｍｉｌｙ邋ｉｎ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｐｅｒｉｏｄｓ逡逑

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2790965