【摘要】：鉻(Cr)作為一種常見(jiàn)的工業(yè)金屬,充斥在我們的生活中,然而重金屬污染問(wèn)題一直困擾著人們。鉻在自然界中有多種形態(tài),其中兩種形態(tài)Cr(VI)和Cr(III)最為最常見(jiàn),而這兩種價(jià)態(tài)在一定條件下是可以互相轉(zhuǎn)換,如Cr(VI)與某些有還原性的物質(zhì)在一定條件下接觸會(huì)被還原為Cr(III),而三價(jià)鉻若暴露于天然存在的一些氧化物如存在于水中或空氣中的氧氣等,則會(huì)被氧化成Cr(VI)。研究顯示,Cr(III)作為飼料添加劑有促進(jìn)禽類生長(zhǎng)的作用,但是如果過(guò)量仍會(huì)導(dǎo)致一系列對(duì)禽畜和人類的中毒和疾病。重鉻酸鉀是各種工業(yè)制品的常見(jiàn)原料,也用作保存一些禽類疫苗的保存液,其中的鉻元素為六價(jià),具有強(qiáng)氧化性,大量接觸可造成皮膚損傷,如在飲食中添加也會(huì)與體內(nèi)還原物質(zhì)反應(yīng),進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生毒性。本研究旨在研究重鉻酸鉀對(duì)肉雞肝臟損傷以及探究篩選重鉻酸鉀導(dǎo)致的肉雞肝臟損傷的代謝標(biāo)志物。試驗(yàn)一以肉雞為研究對(duì)象,先取16只雛雞分為四組,采用Horn法做急性毒性試驗(yàn),確定重鉻酸鉀對(duì)肉雞的半數(shù)致死量(LD_(50))為464mg/kg。將200只肉雞采取常規(guī)養(yǎng)殖并在肉雞飲水中添加定量的重鉻酸鉀令肉雞染鉻。將7d肉雞隨機(jī)分為4組(n=50),分別為對(duì)照組(CG,常規(guī)飲水)、低鉻組(LG,4%LD_(50),18.56 mg/kg/d)、中鉻組(MG,8%LD_(50),37.12 mg/kg/d)、高鉻組(HG,16%LD_(50),74.24 mg/kg/d)。通過(guò)每天定量飲水的方法來(lái)保證每組每天飲用相同劑量的重鉻酸鉀。于肉雞14d、21d、28d、35d稱量肉雞體重并處死解剖取樣。通過(guò)觀察肉雞以及肝臟整體及切片的變化,檢測(cè)肉雞血清生化指標(biāo),肝臟氧化功能指標(biāo),探討重鉻酸鉀對(duì)肉雞肝臟功能的影響。試驗(yàn)二中,取CG和HG組肉雞肝臟組織各7例,使用超高效液相-質(zhì)譜聯(lián)用法進(jìn)行肝臟代謝組學(xué)檢測(cè),結(jié)合使用了正離子及負(fù)離子模式兩種電離方式,對(duì)代謝物進(jìn)行定性、定量分析,將所有代謝物進(jìn)行數(shù)據(jù)歸一化后進(jìn)行聚類分析,再使用PCA,PLS-DA,OPLS-DA等方法進(jìn)行多元統(tǒng)計(jì)分析,從而篩選出具有差異的代謝物質(zhì),并對(duì)差異代謝物做聚類分析及KEGG代謝通路分析。實(shí)驗(yàn)一結(jié)果表明,與對(duì)照組和低劑量組相比,中劑量及高劑量鉻處理會(huì)導(dǎo)致肉雞表觀及其肝臟的不同程度的病變和損傷。一般毒性指標(biāo)觀察結(jié)果說(shuō)明,MG和HG組肉雞表現(xiàn)毛色雜亂,精神狀態(tài)相對(duì)較差,食欲不振體重減輕等,臟器系數(shù)偏低,死亡率有所上升;肝臟組織病理學(xué)結(jié)果顯示MG,HG組肝臟細(xì)胞出現(xiàn)破裂出血和炎性浸潤(rùn)現(xiàn)象,并且細(xì)胞損傷同劑量成正相關(guān)關(guān)系;血清生化指標(biāo)ALT,AST,GGT顯示,MG和HG組指標(biāo)與處理時(shí)間和劑量成一定的正相關(guān)關(guān)系,提示肝臟損傷與鉻處理時(shí)間和劑量相關(guān);CAT,GSH-PX和SOD活力顯示MG和HG組在28,35日齡時(shí)總體上顯著降低,提示肝臟抗氧化能力的喪失同樣與鉻處理時(shí)間和劑量相關(guān)。實(shí)驗(yàn)二篩選出可定義的差異代謝產(chǎn)物99個(gè),其中能夠映射入通路中的有19個(gè)。取用FDR校正后的P-value與Q-value同時(shí)小于0.05時(shí)富集的代謝通路,共有兩條代謝通路,共包含6個(gè)不同差異代謝產(chǎn)物。初步證明肉雞在慢性鉻中毒時(shí),會(huì)對(duì)半乳糖代謝通路以及不飽和脂肪酸的生物合成產(chǎn)生一定影響。
【學(xué)位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S859.8
【圖文】：

重鉻酸鉀致肉雞肝臟損傷及其差異代謝物的篩選2.2.1.1 體質(zhì)特征觀察在試驗(yàn)期間，對(duì)照組以及低鉻組肉雞行為活動(dòng)、攝食、體重、死亡率等均正常。中、高劑量重鉻酸鉀染毒組肉雞在染毒過(guò)程中均出現(xiàn)了較明顯的中毒癥狀，表現(xiàn)為精神萎靡，活動(dòng)減少，外觀毛發(fā)蓬松、無(wú)光澤，反應(yīng)遲鈍，體重減輕，死亡率升高等，且高劑量重鉻酸鉀組的癥狀較中劑量重鉻酸組更嚴(yán)重。解剖各組肉雞，肉眼觀察，對(duì)照組及低鉻組肝臟顏色鮮紅，大小正常，未見(jiàn)明顯損傷及壞死。中鉻組及高鉻組均出現(xiàn)肝臟泛黃或無(wú)血色。

圖 2-2 肉雞肝臟相對(duì)重量(以平均相對(duì)重量表示)Fig.2-2 Relative liver weight in broiler chicken(data were expressed as mean)組肉雞肝臟相對(duì)重量隨日齡呈降低趨勢(shì)，在 28d 時(shí) CG，LG 組略有升高無(wú)顯著性差異，其余各日齡各組間均未見(jiàn)顯著差異。.3 肉雞存活率雞死亡率測(cè)定結(jié)果表明，鉻處理組雞的死亡率高于對(duì)照組，如圖 2-3 所示鉻劑量的增加和鉻處理時(shí)間的增長(zhǎng)，死亡數(shù)目增加，但鉻對(duì)雞的毒性作用率上表現(xiàn)并不顯著。 飼料中 Cr 含量檢測(cè)結(jié)果

重鉻酸鉀致肉雞肝臟損傷及其差異代謝物的篩選肝臟組織病理學(xué)變化組肉雞肝臟 HE 染色切片見(jiàn)圖 2-3。可明顯觀察到各組肝鉻酸鉀喂食時(shí)間和劑量逐漸遞增。各日齡 CG 組與 LG 組有脂肪細(xì)胞較多外無(wú)明顯損傷�？v向比較 28d，從 CG 組量效應(yīng)的損傷，MG 組肝細(xì)胞有出血現(xiàn)象，LG 組細(xì)胞皺縮細(xì)胞核染色深且不均勻。35d 時(shí)，HG 組形成炎癥，伴有大滲出。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2771906